4. 组培技术和理论迅速发展阶段(1960-1979) 1960年以来组织培养理论、实践、技术和方法不断完善和发展,形成独具特色的专业技术 在实验技术上建立了较完整的实验程序,已成为一种重要和精细的实验技术 组织培养已广泛应用于生物学的许多分支学科,并取得丰硕的成果。 1960年:Cocking酶解法分离原生质体获得成功。使植物细胞可以象动物细胞一样进行细胞融合。 1971年,日本 takebe和Nagata首次利用烟草叶片分离原生质体并获得再生植株。我国获得了30个以上品种的原生质体再生植株,其中包括难度较大的重要粮食作物和经济作物大豆、水稻、玉米、小麦、谷子、高梁、大麦、棉花、油莱、马铃薯等 。 1972年,美国Carlson诱导粉蓝烟草和郎氏烟草的原生质体融合得到种间体细胞杂种-第一株体细胞杂种。 1978年,有性杂交不亲和的番茄/马铃薯间的体细胞杂交获得了杂种植株(Melchers)。随后获得了地上结番茄,地下生马铃薯的杂种植物。 1985年,马铃薯的栽培品种与野生种的体细胞杂交,得到了抗晚疫病和卷叶病的体细胞杂种(Austin)。 胚胎培养和试管受精 避免受精后胚乳发育不良或因种胚与胚乳间不亲和而致使杂种胚夭折,及时分离幼胚接种在无激素培养基上使之直接成苗,这就是胚挽救。 大大提高远缘杂交的成功率。 印度科学家在裁培种菜豆、黄麻和花生的远缘杂交中获得了理想的重组体。 中国农科院蔬菜所培养结球甘蓝和大白菜的杂种胚得到了种间杂种。 是指植物的每一个具生命力的细胞都具有在适宜的条件下形成完整植株所必备的一整套遗传信息。 * 植物离体培养的理论,源于19世纪30年代德国植物学家Schleiden和动物学家Schwann提出的”细胞学说“,其主要观点:细胞是生物体的基本结构单位,由它构成整个生物个体;同时认为植物细胞又是在生理上、发育上具有潜在的全能性功能单位。Schwann还指出:”每一个细胞应该可以独立生活和发展,假如具有的条件正如它存在于有机体内一样…….“。 1902年德国著名植物学家Haberlandt根据细胞学说,提出高等植物的器官和组织可以不断分割,直至单个细胞的观点,这种单个细胞是具有潜在的全能性功能单位。 * Knotte为Haberlandt的学生 * 本讲主要内容 植物组织培养含义 组织培养类型。 组织培养的发展简史。 组织培养在农业上的应用。 学习要求 掌握基本概念及研究类型 了解植物组织培养技术的发展简史 掌握植物组织培养在农业生产方面的应用 一、植物组织培养的基本概念 定义(Definition):植物组织培养(Tissue culture)是指用无菌方法使植物体的离体器官、组织、细胞或原生质体等(也就是外植体)在人为提供的条件下生长和发育形成完整植物体的过程。也称之为离体培养(In vitro culture)。 1、什么是植物组织培养? 也定义为:利用植物体的器官、组织或细胞,通过无菌操作接种于人工配制的培养基上,在一定的光照和温度条件下进行培养,使之生长发育的技术称为植物组织培养 2、外植体(Explants):由活植物体上切取下来的可以用于组织培养的组织或器官。 3、愈伤组织(Callus):是指一团形态、功能相似的具有较强分裂能力的可以无需生长的薄壁组织细胞。 4、初代培养(Primary culture):指外植体的最初培养。 5、继代培养(Subculture):将初代培养得到的培养体移植于新鲜培养基中这种反复多次移植的培养,称为继代培养。 愈伤组织 6、细胞全能性(Totipotency):指细胞能够发展成为一棵完整植株的潜能。是指植物的每一个具生命力的细胞都具有该植物所包含的全部遗传信息,在适宜的条件下都具有形成完整植株的能力。 二、植物组织培养的类型 按培养材料的不同可以将植物组织培养分为: 器官培养:胚、胚乳、珠心、子房、根、茎、叶、花和幼果等器官部分组织(薄壁组织)的培养。 分生组织培养:茎尖、形成层等组织的培养。 愈伤组织的培养:最常见的植物组织培养形式。 细胞培养: 原生质体培养: 按培养基的物理状态可以将组织培养分为: 液体培养 固体培养 按培养方法可以将组织培养分为 看护培养 微室培养 包埋培养 按培养过程可以将组织培养分为 初代培养 继代培养 器官培养 分生组织培养 愈伤组织的培养 细胞培养 原生质体培养 液体培养 固体培养 看护培养 微室培养 初代培养 继代培养 三、植物组织培养的发展简史 植物组织培养是二十世纪发展起来的新技术。 它的发展经历了五个发展阶段 探索阶段(1902-1929年) 组培方法和定义的建立阶段(1930-1939年) 细胞全能性的证实阶段(1940-1959) 组培技术和理论迅速发展阶段(1960-1979) 组培技术在生
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