用于西兰花和亚细胞定位的高效遗传转化系统,Frontiers in Plant Science
IntroductionAgrobacterium 介导的遗传转化已广泛用于鉴定植物的功能基因以及调控和发育机制。但十字花科作物仍存在遗传转化效率低、基因型依赖性高等问题。选择、过表达载体类型、RNAi 和 CRISPR/cas9 对遗传转化效率的影响。同时，利用PEG-Ca2+介导的西兰花原生质体瞬时转化系统，利用PHG-031350和PHG-CRa两个载体对萝卜硫苷合成相关基因FMOGS-OX5和根肿病抗性基因进行亚细胞定位。最后，结果与讨论 本研究表明，下胚轴外植体更适用于农杆菌介导的西兰花转基因和CRISPR/Cas9基因编辑。对比以往的研究，我们发现5 mg/L的潮霉素B更有利于抗性西兰花芽苗的筛选，基因型19B42的转化率最高，达到26.96%，高于甘蓝类作物。此外，自交系19B42成功实现过表达、RNAi和CRISPR/Cas9载体的高遗传转化；因此，它是西兰花遗传转化的强大受体材料。亚细胞定位证明萝卜硫素代谢相关基因Bol031350和根肿病抗性基因CRa均在细胞质和细胞核中表达，为研究十字花科作物硫苷代谢调控及根肿病抗性提供了科学依据。因此，这些发现将为甘蓝类作物的遗传转化和分子育种的改良提供新的见解。
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