两种药用植物中抗炎活性成分分析
目的:建立UPLC-Q-TOF-MS/MS方法,总结归纳双黄酮类化合物及木藜芦烷二萜的质谱裂解规律,并对翠云草中的双黄酮类化合物以及紫花杜鹃中木藜芦烷二萜进行鉴别与表征;对翠云草的粗提物及双黄酮类单体化合物的PDE4抑制活性进行研究,并在细胞水平上对双黄酮化合物的抗炎活性进行研究。阐明两种药用植物抗炎活性物质基础,为植物样本中双黄酮类化合物以及木藜芦烷类二萜成分的结构鉴定和快速发现提供依据。方法:1.通过UPLC-Q-TOF-MS/MS技术推导不同类型双黄酮化合物的质谱裂解途径,总结其裂解规律与特征离子,并对翠云草乙酸乙酯层进行成分分析,对其中双黄酮化合物进行鉴别与表征。使用体外酶活性实验测定翠云草的石油醚、乙酸乙酯和正丁醇三个不同极性萃取部位以及双黄酮单体化合物对磷酸二酯酶-4B2(PDE4B2)的抑制活性,并采用SYBYL分子对接软件研究单体化合物与PDE4B的结合作用。此外,运用LPS诱导RAW 264.7细胞模型,对双黄酮化合物的抑制释放NO活性进行检测。2.以紫花杜鹃中分离得到的木藜芦烷二萜为标准品,通过UPLC-Q-TOF-MS/MS技术,研究其质谱裂解规律,并对紫花杜鹃乙酸乙酯层萃取部位进行成分分析,对其中的木藜芦烷二萜进行表征。结果:1.推导出双黄酮类化合物的裂解主要集中于黄酮两部分中C环的断裂产生~(1,3)IIB~+离、~(0,2)IIB~+离子、~(1,3)IA~+离子、~(1,3)IIB~+离子、~(0,4)IIB~+离子等一系列离子和一些中性碎片诸如CO、CO_2、C_2H_2O等的丢失,归纳出不同类型双黄酮化合物的特征碎片离子,并依据总结出的质谱裂解规律从翠云草的乙酸乙酯萃取部位中指认出21个双黄酮化合物。2.体外酶活性实验表明翠云草的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇三个不同极性部位能抑制PDE4B2酶的活性,其IC_(50)值分别为513.0μg... （共108页)
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