本研究以晚熟葡萄品种‘金田皇家无核’为母本,早熟品种‘白鸡心无核’、中熟品种‘奇妙无核’、晚熟品种‘克瑞森无核’葡萄为父本进行了杂交试验。发育过程中调查了果实单果重、种子数及种子平均重。在授粉后40d85d期间采用胚培养技术,进行了无核葡萄杂种培育和培养方法的研究。结果表明:1金田皇家无核自交胚初花期后85d取样发育最好。胚发育率、萌发率和成苗率分别达到55.78%、23.08%和11.54%。‘金田皇家无核’ב白鸡心无核’、‘金田皇家无核’ב奇妙无核’和‘金田皇家无核’ב克瑞森无核’胚挽救最适取样时期分别为授粉后70d、65d和80d,胚成苗率分别达到7.50%、7.69%和11.76%。2金田皇家无核自交、‘金田皇家无核’ב白鸡心无核’、‘金田皇家无核’ב奇妙无核’和‘金田皇家无核’ב克瑞森无核’较适合的胚挽救培养基分别为:改N+6-BA2.5mg·L-1+IAA1.5mg·L-1+AC0.5g·L-1+Pro2.0mmol·L-1,改N+6-BA2.5mg·L-1+IAA1.5mg·L-1+CH500mg· L-1,改N+IBA2.0mg·L-1+6-BA0.5mg·L-1+GA30.5mg·L-1+AC1.5g·L-1和改N+6-BA0.5mg·L-1+IAA1.0mg·L-1+AC0.5g·L-1+CH500mg·L-1。pH值为5.0的蔗糖固体培养基较适合金田皇家无核为母本的杂交材料进行胚挽救,培养环境应为25±1℃的光照培养(2000Lx)。3适合胚挽救苗继代的培养基是:添加蔗糖20g·L-1或25g·L-1的1/2MS+NAA0.1mg·L-1。培养的幼苗株高适中、节间短、根数短而多,适宜移栽。4适合胚挽救壮苗的培养基是:MS+IBA0.02mg·L-1+PP3331.0mg·L-1或CCC1.5mg·L-1。苗高分别达到3.43cm和1.72cm,茎粗分别达到1.25mm和0.92mm,十分适合用作试管苗嫁接使用。5.选用50d苗龄的健壮幼苗,并在移栽前进行适宜的温度、湿度锻炼,使其逐渐适应自然环境。在移栽时修剪根,将其移栽在2/5蛭石+3/5园土的基质中,可以获得较高的移栽成活率。
缩略词 4-5
中文摘要 5-6
Abstract 6-11
第一章 绪论 11-21
1.1 无核葡萄的成因 11-12
1.2 无核葡萄胚挽救育种 12-18
1.2.1 无核葡萄胚挽救的影响因子 12-16
1.2.1.1 杂交组合 12
1.2.1.2 接种时期 12-13
1.2.1.3 培养基 13-15
1.2.1.4 添加物 15
1.2.1.5 珠被处理方式 15
1.2.1.6 外施外源生长调节剂 15-16
1.2.2 胚挽救试管苗继代培养研究进展 16
1.2.3 胚挽救试管苗壮苗培养研究进展 16-17
1.2.4 胚挽救幼苗移栽研究进展 17-18
1.3 本研究的目的意义 18-21
第二章 材料与方法 21-29
2.1 试验材料 21
2.2 试验方法 21-29
2.2.1 杂交亲本的去雄、花粉收集和人工授粉杂交 21
2.2.2 无核葡萄胚发育动态及败育程度的研究 21-22
2.2.3 胚挽救研究 22-27
2.2.3.1 幼果采集与消毒 22
2.2.3.2 胚培养 22-25
2.2.3.3 影响胚挽救苗继代生长的因素 25-26
2.2.3.4 PP_(333) CCC对杂交无核葡萄试管苗复壮的影响 26
2.2.3.5 胚挽救试管苗的移栽 26-27
2.2.4 数据统计及分析 27-29
第三章 结果与分析 29-53
3.1 各组合形态学观察 29-32
3.1.1 果实单果重 29-30
3.1.2 种子动态变化 30-32
3.2 ‘金田皇家无核’葡萄自交及其杂交组合胚挽救影响因素的研究 32-43
3.2.1 采样时期的筛选 32-35
3.2.2 培养环境的筛选 35-36
3.2.3 基本培养基的筛选 36-38
3.2.4 添加物对胚挽救的影响 38-41
3.2.4.1 不同抗褐变处理对胚挽救的影响 38-39
3.2.4.2 添加不同氨基酸对胚挽救的影响 39-40
3.2.4.3 添加不同浓度 CH 对胚挽救的影响 40-41
3.2.5 不同碳源对胚挽救的影响 41-42
3.2.6 不同蔗糖浓度对胚挽救的影响 42
3.2.7 培养基pH对胚挽救的影响 42-43
3.3 胚挽救试管苗的继代试验 43-47
3.3.1 胚挽救苗继代基本培养基的筛选 43-44
3.3.2 胚挽救继代培养基激素及其浓度的筛选 44
3.3.3 不同浓度蔗糖对胚挽救苗生长的影响 44-45
3.3.4 不同浓度AC对胚挽救苗生长的影响 45-46
3.3.5 不同植物生长调节剂对胚挽救苗生根的影响 46
3.3.6 不同pH值对胚挽救苗生长的影响 46-47
3.4 胚挽救苗的复壮试验 47-50
3.4.1 不同浓度PP_(333)对胚挽救苗的复壮的影响 47-48
3.4.2 不同浓度CCC对胚挽救苗的复壮的影响 48-50
3.5 胚挽救苗的移栽 50-53
3.5.1 不同质量的胚挽救苗对移栽成活率的影响 50
3.5.2 不同苗龄的胚挽救苗对移栽的影响 50-51
3.5.3 不同移栽基质对胚挽救苗移栽的影响 51
3.5.4 不同移栽方式对胚挽救苗移栽的影响 51-52
3.5.5 移栽前用CaCl_2浸根对胚挽救苗移栽的影响 52
3.5.6 不同组合胚挽救苗的移栽成活率比较 52-53
第四章 讨论 53-57
4.1 ‘金田皇家无核’葡萄自交及其杂交组合适宜的胚挽救采样时期筛选 53
4.2 ‘金田皇家无核’葡萄自交及其杂交组合胚挽救影响因素的研究 53-55
4.3 ‘金田皇家无核’葡萄自交及其杂交组合胚挽救试管苗移栽影响因素的研究 55-57
第五章 结论 57-59
参考文献 59-67
附图 67-73
发表论文 73-74
致谢 74
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