山核桃成花分子机理研究
山核桃成花分子机理研究
【摘要】：为缩短山核桃(Carya cathayensis)童期促进成花,探讨木本植物成花机理,本文以山核桃为材料,采取成花决定前、成花决定、成花决定后共三个时段的雌花芽,分别利用cDNA-AFLP技术、简并PCR技术和Affymetrix基因芯片杂交技术克隆成花相关基因和探讨成花的分子网络调控体系。cDNA-AFLP试验共获得278个成花特异基因片段(TDFs),经测序和序列同源性分析显示,其中65个TDFs为未知基因序列,213个TDFs具有同源序列,功能涉及激素合成、酶合成、细胞信号转导、叶绿体合成、光诱导等。采用简并PCR技术获得FT DNA上长度分别382bp、152bp、82bp和80bp四个片段,其中第一个片段跨越第三个外显子和第四个外显子,后三个片段位于第四个外显子上。基因芯片杂交结果显示,共有232个基因表达发生变化,占总基因数的1.0%左右,有196个基因表达至少发生2倍及以上的变化,占总基因数的0.9%左右。其中,总共有106个上调基因和90个下调基因。山核桃成花过程中响应的基因主要涉及到细胞壁合成、细胞周期调控、细胞信号转导、胁迫响应、光合代谢、脂类代谢、蛋白代谢、碳水化合物代谢、转录调控、细胞凋亡,激素合成与运输,核酸代谢,物质运输,氨基酸代谢等等,从分子水平上证实了成花的细胞生物学理论。
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