实验1 自花授粉植物有性杂交技术 自花授粉有两种含义,对于有性繁殖植物,是指雌蕊接受同一花朵的花粉;对于营养繁 殖的果树等作物,是指同一品种(基因型)内的相互授粉。在自然条件下,以自花授粉为主 的植物就叫自花授粉作物,又叫自交植物。自花授粉作物必然是兼有雄蕊和雌蕊的完全花; 而且雄雌基本上同时成熟;不存在自交不亲和等特点;在花器结构上具有某些特点使自花授 粉在整个传粉过程中占主导地位,其自然杂交率一般在 5% 以下。大体上可以分为花粉隔离 型和花药包围型。 1.花粉隔离型:有些是整个花冠形成一个隔离空间,使外部花粉不能接触花柱,如小 麦、燕麦、冰草等;有些是部分花冠如豌豆、豇豆等豆类蔬菜由两片龙骨瓣合生形成一个隔 离空间,不仅使外部花粉难以进入,而且可以使花粉受到保护不易受昆虫吞食和雨水淋湿。 2 .花药包围型:指花柱受到裂药雄蕊群的包围,如番茄等由若干枚雄蕊合生的花药筒 紧紧地围裹在中间,在授粉受精前难以接触外来花粉。 自花授粉作物群体是由许多遗传组成纯和的个体组成,即使个别植株或个别花朵偶然发 生天然杂交,也会因连续几代的自花授粉,而使其后代的遗传组成很快趋于纯和。而且自花 授粉作物具有自交不退化或退化缓慢地特点,自花授粉方式是在长期的自然选择作用下产生 和保留下来的,具有对物种的生存和繁衍有利的特性。 不同科、属的自花授粉植物的有性杂交技术也是不尽相同的,但是,目前在育种上人工 去雄杂交还是一个重要手段。为了提高杂交的结实率,应注意掌握和改进杂交技术,本实验 以番茄的杂交技术为例来说明自花授粉作物的有性杂交技术。 一、试材及用具 1.试材:供杂交用的亲本材料为番茄,同时也可根据实验安排,准备小麦、葡萄、大 豆、芸豆、豇豆等。 2 .用具:镊子、授粉器、放大镜、指形管(或小玻璃瓶)、干燥器、培养皿、剪刀、75% 酒精棉球、纸袋、纸牌、铅笔等。 二、方法步骤 (一)选择亲本并套袋 1.株选:作杂交亲本的种株,无论是父本还是母本,都应具有该品种的典型性,生长 健壮,无病虫危害,选好后进行统一编号并套袋,以防昆虫等传递非目的性花粉。 2 .蕾选(小麦是穗选):番茄品种多样,有无限生长与有限生长之分,而无限生长型在 整枝上多留单杆;有限生长型的则留 2~4 杆;这样选择的花序也有所不同:有限生长最好 选2~3 穗上的花蕾,每花序选留2~3 个,而无限生长型,则选2~4 穗上的花蕾,每穗留 2~4 个花蕾,其余的及已开放的,全部去除。 (二)人工去雄 番茄是雌雄同花,其正常的花药通常联合成一个筒状,其花粉的散裂方式是由花药先端 向内纵裂,散出的花粉触及柱头而自交授粉,因此杂交去雄时必须于蕾期进行。去雄时的花 蕾应选择:花冠微露、色泽为绿中泛黄。去雄的最佳方法是:先用左手的大拇指和食指夹住 花柄基部,然后用右手持镊子伸到花药筒的基部,夹住后轻轻上提,技术熟练时,可一次将 花药筒全部取出(小麦是在发育时期以全穗抽出,穗基部距旗叶叶耳半寸左右,穗中部花药 呈绿带微黄为宜。选好穗,然后要整穗:用剪刀将穗两端发育较差的小穗剪掉,只留中部 10~12 个小穗,每一个小穗只保留基部两朵小花。葡萄、豆类多为闭花自交,被认为是最 严格的自花授粉植物,要选择花冠由绿转淡绿,第二天要开放的花蕾为好)。注意一定要把 花药去除干净,并且注意不要损伤柱头。操作完成后,挂上纸牌、填好品种名称、株号、去 雄日期及操作人等,然后套上纸袋。 (三)花粉采集与贮备 通常于晴天早晨露干后,在选定的父本植物上选取当天盛开的花,用镊子将花药筒取出, 放入干燥器内干燥,2~4h 后,将花药取出放在培养皿中,压碎后将花粉过筛装入指形管中 备用。一般花粉在干燥、冷凉、黑暗的条件下保存寿命较长。用电动采粉器取粉时,一定要 在天气晴朗时进行,以防因花器潮湿不利取粉。如果父本的花期晚,则需要进行催花,即将 花枝采回室内插瓶,在温暖的条件下提前开花,然后取其花粉备用。 (四)授粉 通常在去雄的1~3d 内,选择晴朗无风、早晨露干时进行授粉结实率最高。授粉时,动 作要轻,用授粉器沾取少量花粉轻擦柱头即可,如果一株上有几个花序留蕾杂交时,可按从 下而上的自然位置循序授粉,以防遗漏,为提高结实率,有可能也可重复授粉一次,可由上 而下进行。操作完毕,在挂好的标牌上,填好父本名称及授粉次数、具体时间等,然后套好 纸袋。在授粉后的8~10d 检查结实情况,并按下表填写有关事项。
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