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蝴蝶兰的组织培养快速繁殖技术

花匠小妙招
2024-11-17 13:49

蝴蝶兰属兰科蝶兰属，蝴蝶兰以花姿似蝴蝶翩翩飞舞而得名，属于单茎类的兰花，但茎极短，被大片的椭圆形叶所遮盖，几乎无法明显的看出来。花茎的长短因品种之不同而差异甚大，可有１０～１００ｃｍ不等，而花朵的大小也因品种不同有所差异。有花的直径大于１５ｃｍ的大花种，也有小于２ｃｍ的小花种。而花色则有越来越多的趋势，计有纯白、粉红、紫红、黄、绿、黄色带赤斑纹、白色红唇、白底红条纹等，不胜枚举。常规繁殖较慢，常通过组织培养加快繁殖，现对其组织培养技术介绍如下。１原球茎的诱导培养１．１茎尖的培养将除去叶的茎用流水冲洗干净，再用１０％的漂白粉溶液表面消毒１５ｍｉｎ，除去叶原基后，用５％的漂白粉溶液灭菌１０ｍｉｎ，用无菌水冲洗干净。在无菌条件下将茎尖及叶基部腋芽切成大小约２～３ｍｍ的方块，进行接种。１．２蝴蝶兰的诱导培养基为ＶＷ、ＫＣ、ＭＳ、ＢＫ古川仁郎用培养基附加１５％的椰乳进行液体和固体培养。液体培养时，至于以１６０转／ｍｉｎ速度震荡培养，１０ｄ左右更换新的培养液。培养温度为２５℃，光强２０００ＬＸ，每天光照１６～２４ｈ，１个月左右诱导出原球茎，这时可转移到固体培养基上继续培养。也可取试管苗植株的直径约为０．３０ｍｍ的茎尖，不需消毒接种在ＭＳ＋６－ＢＡ３ｍｇ／ｌ的培养基上，培养温度为２３～２７℃，光强１５００ＬＸ，１４ｄ后茎尖膨大，颜色转绿，３个月后，原球茎直径生长达６ｍｍ。１．３叶片培养取试管实生苗叶片为外殖体，实生苗年龄以３～４个月为最好，其诱导率及每个外殖体上的原球茎增殖的个数最高。田中道男１９７５年报道，对于１２０ｄ的小苗，可将整叶切下直接插入培养基中，效果比将叶切断好。并且取自第１叶的外殖体，原球茎形成率较老叶好；将幼叶片切断进行培养时，中间部分原球茎形成率比顶部和基部好；成年植株用叶片基部好；切断大小与诱导率直接相关，切断太小成活率低，以０．５０ｃｍ左右为最好。原球茎的诱导培养基选用狞野氏（Ｋｙｏｔｏ）或ＭＳ附加ＫＴ１０ｍｇ／ｌ＋ＮＡＡ５ｍｇ／ｌ及１０％的苹果汁或椰乳，也有人用Ｋｙｏｔｏ附加ＫＴ１０ｍｇ／ｌ＋ＮＡＡ１ｍｇ／ｌ＋腺嘌呤（Ａｄｅ）１０ｍｇ／ｌ，或ＭＳ＋６－ＢＡ５ｍｇ／ｌ＋ＩＡＡ０．５０ｍｇ／ｌ＋Ａｄｅ６ｍｇ／ｌ。有实验证明用改良的ＶＷ培养基代替Ｋｙｏｔｏ效果很好。培养温度２５℃，光强５００ｌｘ，光照时间每天１６ｈ。１．４花梗腋芽及花梗节间的培养①取带腋芽的花梗，消毒方法同叶片。消毒后将芽接种到卡特兰属１号培养基上，并在培养基中加入１０％的香蕉匀浆。也可用ＶＷ液体培养基震荡培养一段时间后，产生原球茎，进行切割转移、增殖，最后分化成苗。②另一种培养方式是不切下腋芽，取带腋芽的花梗节。消毒后直接插入Ｋｙｏｔｏ培养基或Ｈｙｐｏｎｅｘ（花宝１号３ｇ／ｌ，胰蛋白胨２ｇ／ｌ，蔗糖３５ｇ／ｌ，琼脂１２ｇ／ｌ）培养基上，或ＭＳ＋６－ＢＡ３ｍｇ／ｌ。两种培养基上的外殖体，接种７ｄ左右，侧芽膨大并向外伸长。在Ｋｙｏｔｏ培养基上的侧芽多长成单株小苗，ＭＳ培养基上的侧芽多长成丛生芽。这时花梗变黑，应将新生芽尽快转移到新鲜培养基上。将丛生芽切断转移到ＭＳ＋６－ＢＡ３ｍｇ／ｌ，进行茎段诱导培养３０ｄ以后，可得到增殖的丛生芽，不定芽诱导率达５０％（王怀宇，１９８９）。按林其金（１９８５）的方法，取不同发育阶段的花梗，消毒后取不同的部位（花梗节间、花蕾、花梗节）的组织，斜切成１～１．５０ｍｍ厚的薄片，接种到斜面固体培养基上，培养基用１．２０倍的ＶＷ无机盐配方另加肌醇１０ｍｇ／ｌ，ＶＢ１、ＶＢ６和烟酸各０．５０ｍｇ／ｌ，蔗糖２％，琼脂０．８８％，附加不同浓度的激素。培养温度２４～２８℃，每天光照１６ｈ，实验结果为附加６－ＢＡ１ｍｇ／ｌ最好。发育时间短的花梗诱导率高，发育时间长的超过１５０ｄ的花梗诱导率为零。因此正在迅速伸长的蝴蝶兰花梗是诱导原球茎的最佳材料。花谢后的花梗不适合做外殖体。１．５根尖培养林瑞松（１９８１）报道，将１５０ｄ实生苗根尖培养在附加肌醇１００ｍｇ／ｌ、烟酸１ｍｇ／ｌ、ＶＢ６１ｍｇ／ｌ、ＶＢ１１０ｍｇ／ｌ、蔗糖３０ｇ／ｌ，ｐＨ＝５．５０的Ｂ５培养基上，或以３０转／ｍｉｎ的转速液体震荡培养，培养温度５℃，光强２０００ｌｘ每天光照１２ｈ，结果光培养与暗培养的诱导率差异不大，ＫＴ１０ｍｇ／ｌ和ＮＡＡ５ｍｇ／ｌ的激素配比诱导率最高达７０％。原球茎的增殖在同样的培养基上，６个月后可形成幼苗。２原球茎的继代培养与育苗继代培养基可选用诱导培养基，也可选用ＫＣ、Ｋｙｏｔｏ。可适当加入某些附加物质及调整激素含量以促进原球茎的生长。育苗时用培养基可选用继代培养基，加入一定量复合添加物质促进小植株的发育，如香蕉匀浆或椰乳，也可加入少量的维生素，促进根的生长。进行球茎增殖时，将需要转移的球茎切成几小块，转入新培养基进行增殖培养，培养一段时间后，再进行切割转移，通过这种方式原球茎成倍增长。不需继代的原球茎在继代培养基或育苗培养基上分化蝴蝶兰的组织培养快速繁殖技术０５６００１邯郸市园林局宁书祥０５６００１邯郸市农业科学院生物技术中心张希太

２００７年第７期

果树花卉

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