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[教学]花卉苗木脱毒技术

花匠小妙招
2024-11-18 15:51

现在许多科研单位和花木生产企业都已配置了组织培养室。组培技术已成为重要的生物技术之一。然而有的组培室组培苗的数量和质量却一直没有质的飞跃究其原因最主要的因素就是污染所造成的。被污染后首先是生产成本的提高其二对植株造成伤害其三增加接种源受污染的机率。一、常见污染源组织培养过程中的污染源主要有以下几种1户外风大菌类进屋机会多。有风就有沙有沙就有尘有尘就有菌菌尘共存这是菌类进屋的主要原因之一。2屋内太潮菌类繁衍多。需保持室内空气干燥如使用空调“除湿”功能也可减少真菌生长繁殖。3人员带菌多。在整个操作室内人员可说是最大的带菌者不管在毛发或是衣服等地方都隐藏着数不清的菌类。在进入操作室前最好能对作业人员进行清洁处理比如换上干净的白大褂换上实验室的鞋衣服鞋每星期洗一次上超净台前手要用肥皂清洗两遍接种前手再用酒精擦拭一遍。4屋内不干净。紫外线能杀灭或抑制真菌生长因此应在每次接种前进行20分钟的紫外灯消毒。5清理屋内带菌组培苗。在植物病害中真菌所引起的病害尤其严重且因会产生孢子随着空气飘散。一旦落入适当的环境下一粒小小的孢子便会扩大成一个菌落污染整个组织培养瓶。因此一旦有真菌污染的组培苗就要用高压灭菌器彻底消灭以防扩散。6接种不正确。不正确操作也会增加污染机率如开盖太快灭菌不够操作过慢等。接种过程应该轻开盖快操作。二、污染原因及污染苗抢救若污染菌类是零星分散在培养基中则可确定是人为引起的污染比如培养基灭菌不彻底超净工作台长时间不换滤网致使净化能力降低接种用具灭菌不彻底操作不正确动作生硬缓慢开瓶时间太久接种台摆放物品杂乱操作中心在人体范围之内接种室长期不灭菌菌类太多等。若污染菌类是从材料周围长起则可证明是植物材料带菌引起。可能是接种用具灭菌不彻底接种时材料被污染或者是未及时发现污染苗接种过程交叉感染等。若菌类从材料培养基以上部分长起而不是从培养基先长起且发生在5天以后则说明是材料带的内生菌。若从培养基以下开始长菌发生时间较早且有从里向外的趋势则说明是切口引起的污染原因可能是灭完菌后未剪去两个切口或虽剪但器具带菌。真菌污染后如果已形成孢子则必须经高压灭菌后扔掉即使仅形成菌丝也应处理后扔掉因为菌丝能够达到材料内部因此真菌污染是灭绝性的。如果是细菌污染由于细菌繁殖是靠芽孢细菌不会弥散在整个空间因此只要及时发现可将材料上部未感菌的部分剪下转接材料仍可以用。用抗生素等杀菌药剂进行处理这种方式虽有不少报道但至今还未发现那种抗生素能够对各种菌都有效并且也会影响植物材料的正常生长分化。还有一些药剂虽然杀菌效果好但往往容易引起盐害也无法利用。花卉苗木脱毒技术病毒病害严重影响着植物的生长发育特别是通过嫁接、扦插、根繁等常规无性繁殖的植物。由于病毒是通过维管束传导的因此就会利用有维管束的营养体繁殖把病毒传递下去并且逐代积累使病毒浓度越来越高。由于目前尚未找到一种对防治病毒病很有效的化学药品所以从植物本身入手使之无毒化已成为解决病毒病害问题的首选。国内外大量的研究和生产实践表明脱病毒植株的性状明显优于感病植株。国外的许多果树花卉等作物都已实现无毒化栽培并由此产生了巨大的经济效益。植物脱病毒通常可采用热处理、茎尖培养、茎尖微芽嫁接、热处理配合茎尖培养、热处理配合茎尖微芽嫁接等方法达到脱毒目的。热处理脱毒主要是利用有些病毒受热的不稳定性而使其失去活性从而达到脱病毒的目的。一般采用35℃至55℃的热水或高温蒸气、高温空气处理温度越高处理的时间越短。人们常将热处理中生长的新梢顶端嫩枝嫁接到无病毒砧木上或进行进一步的茎尖培养或茎尖微芽嫁接以增大脱毒几率。茎尖培养之所以能够除去病毒是由于病毒主要是通过维管束传导的所以在感病植株内的分布是不一致的。维管束越发达的部位病毒分布越多。由于生长点内无组织分化即尚未分化出维管束所以不存在病毒。把茎尖生长点接种在适宜的培养基上进行组织培养就能培养出无病毒植株。实验证明茎尖培养脱毒效果好后代遗传性稳定还可同时脱除类病毒、细菌和真菌。茎尖微芽嫁接法脱病毒是茎尖培养脱毒的一种改良方法这种方法主要用于那些茎尖培养较困难的植物。所谓茎尖微芽嫁接就是在无菌条件下将切取的茎尖经组织培养后嫁接到去顶的实生苗上。由于实生苗是通过种子繁殖的所以不带病毒。待茎尖发育后即可获得具有茎尖母本性状的无病毒植株。通过以上方法培育出的苗木还需要经过严格的鉴定证明确实无病毒存在才是真正的无病毒苗。常用的鉴定方法有指示植物法、抗血清鉴定法、