湘西杜鹃花根和茎中氨基酸含量测定
第21卷第4期吉首大学学报自然科学版VOI.21NO.42000年12月JOurnaIOfJishOuUniversityNaturaIScienceEditiOn!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!Dec.2000文章编号1007-2985200004-0001-02湘西杜鹃花根和茎中氨基酸含量测定王辉宪1彭晓春1刘文苹1张辉2"1.吉首大学生命科学与化学学院湖南吉首4160002.湘西民族教育学院湖南吉首416000摘要用HPLC方法对湘西杜鹃花植物根、茎中的15种氨基酸的含量进行了测定.测定的结果是根中氨基酸的质量分数为12.74%干样其中必需氨基酸为5.30%占41.60茎中氨基酸的质量分数为8.41%干样其中必需氨基酸为3.25%占41.85.该方法检测效果好平均回收率达93.6氨基酸保留时间变异系数平均为1.00.4其峰面积变异系数为4.20.8在10pmOI~2nmOI范围内线性关系系数平均为0.9870.009.关键词杜鹃花HPLC氨基酸中图分类号S685.21@496.91文献标识码
B杜鹃花系杜鹃花科杜鹃花属RhododendronSimsiiPIanch植物又称“映山红”.其叶、花、根、茎均可入药.该植物的多种制剂对止咳、祛痰、平喘见效快疗效好.1胡梅2等对邹皮杜鹃花等植物中的黄酮化合物及有关成分进行过研究但对湘西杜鹃花植物的分析尚未见报道.本文根据文献3~5选用邻苯二甲醛PA—!-硫基乙醇衍生化反相梯度洗脱荧光检测分析法对湘西杜鹃花植物根、茎中的15种氨基酸的含量进行了测定为临床应用和其它研究提供了参考依据.1材料与方法1.1供试样品杜鹃花植物根、茎于1998年5月采于湘西吉首市砂子坳地区由吉首大学植物学副教授谷中村鉴定.洗净60风干磨碎备用.1.2仪器与试剂1.2.1仪器高效液相色谱仪为SHMADMLC—6A岛津日本产系列.SCL—6A自动梯度控制仪控制LC—6A泵.CR—3A数据处理仪.RF—530荧光检测器激发波长为338nm发射波长为425nm.色谱柱为大连化物所产C18反相柱4.6X250mmXmm粒径5"m.1.2.2试剂氨基酸标准对照品为美国Waters公司产品甲醇上海化学试剂公司产品色谱纯邻苯二甲醛PAFIuka公司产品分析纯!-疏基乙醇FIuka公司产品分析纯其余试剂均为优级纯.所有实验用超纯水系自备三次石英蒸馏水.用0.1mOI/LHCI配制0.5mmOI/L氨基酸标准液.衍生试剂10mgPA溶于0.5mI甲醇中加入!-硫基乙醇0.03mI再加入0.4mOI/L硼酸缓冲液pH=9.52.5mI配制成衍生试剂.梯度洗脱所用流动相A0.05mOI/L醋酸钠缓冲液pH=6.8甲醇四氢呋喃=82171V/V流动相B0.05mOI/L醋酸钠缓冲液pH=6.8甲醇四氢呋喃=22711V/V使用前经0.45"m微孔滤膜过滤减压脱气备用.1.3方法准确称取100mg样品经110烘干至恒重于安瓶中加入6mOI/LHCI10mL充氮气封口后于110烤箱中水解24h取出冷却后过滤.取滤液0.5mI吹干准确加入2.0mI流动相A液用0.45"m滤膜过滤.取10"L滤液衍生振荡1min然后进柱进行测定
."收稿日期2000-11-27基金项目湖南省教育厅自然科学基金资助项目96163作者简介王辉宪1961~女白族湖南省桑植县人吉首大学生命科学与化学学院副教授主要从事分析化学、应用化学研究.
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