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11种兰属植物DNA的提取及RAPD

《种子》 2007年03期

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王国鼎   文晓鹏   季祥彪   乔光   胡鹏   开通知网号

【摘要】:采用改进的CTAB-DNA提取方法,从11种兰属植物的嫩叶中提取总DNA。所得的DNA样品的A260/A280值在1.7~1.9之间,琼脂糖凝胶上主带清晰,较少降解,样品纯度高,DNA量大。另外,对影响RAPD-PCR的Mg2+、dNTPs、Taq酶、引物浓度等因素进行了优化。确定优化的反应体系为75ng模板DNA,1×Buffer,2.5mmol/LMg2+,0.15mmol/LdNTPs,0.75UTaq酶,引物浓度0.4μmol/L,反应总体积为25μl。该体系在20个供试兰属实验材料中获得较好的扩增结果。

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