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茶树自交不亲和类型的鉴定及相关基因克隆与表达分析

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引言

第一章 文献综述

1 植物自交不亲和的研究概况

1.1 孢子体自交不亲和(SSI)

1.2 配子体型自交不亲和(GSI)

1.3 延迟作用型自交不亲和性(Late-acting self-incompatibility LSI)

1.4 异形花型自交不亲和性(heteromorphic SI)

1.5 潜在型自交不亲和性(cryptic self-incompatibility,CSI)

1.6 茶树的自交不亲和与茶树育种

2 植物自交不亲和的研究方法

3 cDNA-AFLP技术研究进展

3.1 cDNA-AFLP技术的基本原理和步骤

3.2 cDNA-AFLP的技术特点

3.3 cDNA-AFLP技术的应用

第二章 茶树离体花粉最适萌发条件及最适保存方式

1 材料与方法

1.1 材料

1.2 方法

2 结果与分析

2.1 培养基组分对茶树花粉离体最适萌发条件的影响

2.2 茶树花粉体外最佳保存方法研究

3 讨论与结论

第三章 自花及异花授粉后茶树花粉管生长情况比较

1 材料与方法

1.1 材料

1.2 方法

2 结果与分析

2.1 茶树品种间杂交后花粉管萌发与伸长

2.2 茶树品种自交后花粉管萌发与伸长

2.3 茶树授粉后花粉管在子房中的生长与停滞

3 结果与讨论

第四章 茶树自交授粉后雌蕊cDNA-AFLP分析

1 材料与方法

1.1 材料

1.2 试验方法

2 结果与分析

2.1 样品总RNA的提取

2.2 双链cDNA的合成

2.3 cDNA酶切片段的预扩增结果

2.4 选择性预扩增的PAGE检测结果

2.5 特异片段检测

3 讨论

第五章 茶树GADPH基因的克隆

1 材料

1.1 材料

1.2 仪器

2 方法

2.1 茶树总RNA提取(Trizol法)

2.2 去除总RNA中痕量DNA污染

2.3 茶树GAPDH基因的克隆

3 结果与分析

3.1 茶树中总RNA质量分析

3.2 茶GAPDH基因的扩增

3.3 GAPDH基因的cDNA序列分析

4 讨论

第六章 实时荧光定量PCR对自交后特异表达基因的检验及茶树钙依赖蛋白激酶(CsiCDPK)基因的克隆

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.2 cDNA-AFLP分析

1.3 荧光定量PCR反应检测茶树自交后雌蕊中基因的差异表达

1.4 目的片段的回收和克隆

1.5 RACE技术扩增基因全长

2 结果与分析

2.1 茶树自交后雌蕊中特异表达基因的荧光实时定量PCR检测

2.2 目的片段的获得

2.3 茶树CsiCDPK基因cDNA全长的获得及序列分析

2.4 CsiCDPK基因时空表达特异性分析

3 讨论

全文讨论

全文结论

全文创新点

参考文献

博士期间发表论文

致谢

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