小麦赤霉病菌麦角甾醇生物合成途径中关键基因的功能研究
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目录
引言
第一章 文献综述
1 小麦赤霉病研究进展
1．1 小麦赤霉病概况
1．2 小麦赤霉病菌的基本生物学特性
1．3 禾谷镰孢菌功能基因组学研究进展
2 小麦赤霉病的防控策略
2．1 小麦赤霉病的防控策略概况
2．2 小麦赤霉病化学防治中三大类药剂抗药机制研究进展
3 麦角甾醇生物合成和调控
3．1 酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中麦角甾醇生物合成途径
3．2 丝状真菌中麦角甾醇生物合成途径
3．3 麦角甾醇生物合成途径的调控
4 小麦赤霉病菌研究的分子生物学方法
4．1 小麦赤霉病菌基因功能研究方法
4．2 小麦赤霉病菌遗传转化体系
5 本研究的目的和内容
第二章 材料与方法
1 试验材料
1．1 菌株和质粒
1．2 供试植物
2 试验方法
2．1 小麦赤霉菌种的保存、培养、产孢
2．2 小麦赤霉病菌基因组DNA的提取
2．3 PCR技术
2．4 DNA琼脂糖电泳
2．5 PCR产物纯化
2．6 大肠杆菌E．Coli DH5a菌株感受态细胞的制备
2．7 DNA克隆技术
2．8 重组质粒的鉴定与提取
2．9 质粒酶切
2．10 小麦赤霉病菌基因敲除载体的构建及转化子的获得与鉴定
2．11 小麦赤霉病菌基因互补载体的构建及转化子的获得与验证
2．12 小麦赤霉病菌的遗传转化方法
2．13 小麦赤霉病菌基因组DNA Southern blot分析
2．14 小麦赤霉病菌总RNA的提取与基因表达量分析
2．15 基因组表达谱solexa测序
2．16 生长速率测定
2．17 产孢量分析和孢子染色
2．18 小麦赤霉病菌对细胞胁迫压力、杀菌剂敏感性的测定
2．19 小麦赤霉菌株对戊唑醇、咪酰胺的EC50值测定
2．20 三唑酮和戊唑醇复配防治小麦赤霉病的药效试验
2．21 小麦赤霉病菌致病性分析
2．22 小麦赤霉病菌DON毒素含量测定
2．23 小麦赤霉病菌麦角甾醇和总甾醇测定
2．24 酿酒酵母互补实验
第三章 结果与分析
1 小麦赤霉病菌3个同源的cyp51基因的功能研究
1．1 小麦赤霉病菌对戊唑醇、咪酰胺的敏感性测定
1．2 小麦赤霉DMI-R和DMI-S菌株的CYP51氨基酸序列分析和cyp51基因表达量测定
1．3 小麦赤霉病菌受戊唑醇处理6h基因组表达谱分析
1．4 小麦赤霉病菌3个同源cyp51基因的克隆和序列分析
1．5 3个同源cyp51基因敲除突变体和互补突变体的获得
1．6 突变体表型分析
1．7 三唑酮和戊唑醇对小麦赤霉病菌防治增效作用的测定
1．8 小结与讨论
2 小麦赤霉病菌FgERG24A／B和FgERG2基因的功能研究
2．1 小麦赤霉病菌对十三吗啉、苯锈啶和螺环茵胺的敏感性测定
2．2 小麦赤霉病菌FgERG24A／B和FgERG2基因的分离和序列分析
2．3 FgERG24A／B和FgERG2基因敲除突变体和互补突变体的获得
2．4 突变体表型分析
2．5 小结与讨论
3 小麦赤霉病菌FgERG4基因的功能研究
3．1 小麦赤霉病菌FgERG4基因的分离和序列分析
3．2 小麦赤霉病菌FgERG4基因敲除载体的构建
3．3 小麦赤霉病菌FgERG4基因敲除突变体的获得和鉴定
3．4 小麦赤霉病菌FgERG4基因的互补
3．5 突变体表型分析
3．6 小结与讨论
4 小麦赤霉病菌麦角甾醇生物合成途径其他14个ERG基因功能研究
5 小麦赤霉病菌麦角甾醇生物合成调控元件的分离鉴定和功能研究
5．1 麦角甾醇吸收调控转录因子upc2和ecm22分离鉴定和功能研究
5．2 SREBP途径相关元件的分离鉴定和功能研究
5．3 其他可能的甾醇平衡转录调控因子的分离鉴定和功能研究
5．4 小结与讨论
第四章 全文结果和后续工作展望
1 全文结果
2 后续工作展望
参考文献
附录
附录A：引物序列
附录B：培养基配方、常用试剂和试验仪器
附录C：个人简历和博士期间发表的学术论文
相关知识
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