一种桃儿七小根茎的繁殖方法技术
本发明专利技术提供了一种桃儿七小根茎的繁殖方法，通过获取无菌种胚、丛生芽的诱导、丛生芽的成熟与分割、幼苗的生长、小根茎的形成与贮藏等步骤，建立了桃儿七小根茎的组培方法，此方法具有繁殖效率高、繁殖系数大、培养周期短、方便栽培贮藏、方便运输、操作简便、成本低的优点，改进了桃儿七组培技术，为桃儿七的进一步扩大栽种提供了保障。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及农业生物
，具体的是一种通过细胞工程的手段直接繁殖桃儿七试管小根茎的方法。
技术介绍
桃儿七(SinopodophyllumhexandrumRoyle)是小檗科桃儿七属草本植物，国家三级保护植物，主要分布在我国西部。由于自然资源已面临匮乏与濒危，被收录入《中华珍稀濒危植物名录》和《中国植物红皮书》。桃儿七在民间主要用于痛疖肿毒、风湿性骨痛、气管炎等症，现代药学研究表明，其根及根茎中主要含有木脂素类、黄酮类、皂苷、多糖等成分，其中木脂素类的鬼臼毒素含量最高。鬼臼毒素具有广泛的药学活性，如0.5%鬼臼毒素酊在治疗尖锐湿疣方面具有起效快、治愈率高、安全性好等特点，1990年世界卫生组织推荐其为一线药物，1994年我国《国家基本药物》皮肤类抗病毒唯一入选药物。鬼臼毒素还是合成抗癌药物GP7、VP-16、VM-26、NK611等及抗艾滋病药物的前体物质。自然条件下，桃儿七以种子繁殖为主，种子休眠期长(6～8个月)，发芽后生长极为缓慢，5～6年才能完成性成熟，而且对生长环境的要求非常苛刻。为了缓解桃儿七资源危机，生产主要的活性成分鬼臼毒素，国内外学者利用愈伤组织培养、细胞悬浮培养进行鬼臼毒素的生产，但存在愈伤组织易褐化、增殖缓慢及鬼臼毒素含量低的问题；关于桃儿七离体胚培养、芽增殖培养、试管苗的炼苗移栽技术已有报道，虽然在一定程度上解决了资源的繁殖问题，但仍存在繁殖系数低、试管苗练苗操作繁琐、耗时长、生产成本高等问题。桃儿七在生长过程中，在叶柄基部与根上部区域能形成类似扁平球形的变态器官根茎，根茎作为一种宿生器官，具有不同发育时期的芽原基，能发芽...
【技术保护点】
一种桃儿七小根茎繁殖方法，其特征在于包括如下步骤：(1)获取无菌种胚：将新鲜的桃儿七种子消毒，取出无菌种胚；(2)丛生芽的诱导：将无菌种胚接种于丛生芽诱导培养基，在红蓝光比例3:1，光照强度600‑1200lux，光周期为14小时光照/10小时黑暗，相应的培养温度23/18℃，培养35天，至看到不定芽芽点，获得外植体；诱导培养基配方： MS基本培养液、蔗糖50g/L、酸水解酪蛋白1g/L、琼脂5g/L、吲哚乙酸0.1‑0.5mg/L、6‑苄基腺嘌呤0.5mg/L、玉米素0.5‑2mg/L；(3) 丛生芽的成熟与分割：将外植体转接入继代培养基，光照及温度同步骤(2)，培养10‑20天，至每外植体长出4‑6个叶芽，以1‑2个叶芽为分割单元进行分割；继代培养基配方：MS基本培养液、蔗糖50g/L、酸水解酪蛋白1g/L、琼脂5g/L、萘乙酸0.6mg/L、噻苯隆0.01‑0.06mg/L、脱落酸0.5‑2mg/L；(4) 幼苗的生长：将分割后的叶芽转入幼苗生长培养基，光照及温度同步骤(2)，培养40天至幼苗长高、长壮，并且有根原基形成；幼苗生长培养基配方： MS基本培养液、蔗糖50g/L、酸水...
【技术特征摘要】
1.一种桃儿七小根茎繁殖方法，其特征在于包括如下步骤：(1)获取无菌种胚：将新鲜的桃儿七种子消毒，取出无菌种胚；(2)丛生芽的诱导：将无菌种胚接种于丛生芽诱导培养基，在红蓝光比例3:1，光照强度600-1200lux，光周期为14小时光照/10小时黑暗，相应的培养温度23/18℃，培养35天，至看到不定芽芽点，获得外植体；诱导培养基配方：MS基本培养液、蔗糖50g/L、酸水解酪蛋白1g/L、琼脂5g/L、吲哚乙酸0.1-0.5mg/L、6-苄基腺嘌呤0.5mg/L、玉米素0.5-2mg/L；(3)丛生芽的成熟与分割：将外植体转接入继代培养基，光照及温度同步骤(2)，培养10-20天，至每外植体长出4-6个叶芽，以1-2个叶芽为分割单元进行分割；继代培养基配方：MS基本培养液、蔗糖50g/L、酸水解酪蛋白1g/L、琼脂5g/L、萘乙酸0.6mg/L、噻苯隆0.01-0.06mg/L、脱落酸0.5-2mg/L；(4)幼苗的生长：将分割后的叶芽转入幼苗生长培养基，光照及温度同步骤(2)，培养40天至幼苗长高、长壮，并且有根原基形成；幼苗生长培养基配方：MS基本培养液、蔗糖50g/L、酸水解酪蛋白1g/L、聚乙烯吡烙烷酮1g/L、琼脂5g/L、赤霉素0.2mg/L、油菜素内酯0.01-0.1mg/L、激动素0.5-2mg/L；(5)小根茎的形成：将幼苗转入小根茎诱导培养基中，在26℃，黑暗条件下培养60天，待幼苗逐渐枯萎后收获小根茎并储藏；小根茎诱导培养基配方：MS基本培养...
【专利技术属性】
技术研发人员：杨涛，郭琪，杨晖，张军，
申请(专利权)人：甘肃省科学院生物研究所，
类型：发明
国别省市：甘肃;62
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