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番茄黄化曲叶病毒病生防菌的筛选及防治效果研究

花匠小妙招
2024-11-23 11:21

邢卫锋丁雪玲柯红娇等番茄黄化曲叶病毒病生防菌的筛选及防治效果研究J江苏农业科学2013419110112番茄黄化曲叶病毒病生防菌的筛选及防治效果研究邢卫锋1丁雪玲2柯红娇2郭坚华21江苏省东海县现代农业园区管委会江苏连云港2220002南京农业大学植物保护学院江苏南京210095摘要对本实验室初步筛选到的对多种病原菌具有拮抗作用的102株生防潜在菌进行番茄黄化曲叶病毒病防效筛选试验。通过温室盆栽试验筛选获得5株对番茄黄化曲叶病毒病防效在50%以上的菌株分别为3JW1、54、5BS3、HS7、7ze3。田间试验结果表明3JW1、5BS3、54、HS7、7ze3的防效分别为5257%、5126%、4375%、3953%、28.50%其中3JW1和5BS3明显优于其他菌株。田间小区试验结果表明3JW1和5BS3防治的番茄分别增产18.35%、2796%番茄果实中维生素C、可溶性糖和可溶性蛋白的含量提高可滴定酸含量降低。试验表明3JW1和5BS3作为生防菌对防治番茄黄化曲叶病毒病具有良好的实际应用前景。关键词番茄黄化曲叶病毒病生防菌防治效果中图分类号S47619文献标志码A文章编号100213022013

09011003收稿日期20130311基金项目国家自然科学基金编号30971956国家公益性行业农业科研专项编号201003065江苏省科技创新与成果转化专项引导资金编号BY2009157。作者简介刑卫锋1968—男江苏东海人硕士农艺师主要从事植保生产工作。Emailxue95711@163com。通信作者**华博士教授博士生导师主要从事农作物土传病害和霜霉病、病毒病地上部病害的活菌制剂以及天然活性化合物的研发及其机理研究。Tel02584395312Emailjhguo@njaueducn。番茄黄化曲叶病毒病是由番茄黄化曲叶病毒tomatoyellowleafcurlvirusTYLCV引起的一种毁灭性病害并通过烟粉虱Bemisiatabaci传播。该病害于1964年在以色列最先被发现随后迅速蔓延至中东、地中海沿岸、欧洲、美国、中美洲、非洲、东亚、南亚、澳大利亚等国家和地区1。2002年传入到我国境内近年来该病在我国已逐步由南向北扩展发生蔓延速度极快严重威胁我国产值近千亿元的番茄产业23。目前应用于生产的番茄抗病品种虽然较多但由于现有的TYLCV变异速度快、致病性强使许多现有的抗病品种抗性丧失加之番茄抗病遗传机理和背景的复杂性很难培育出抗病性稳定的番茄新品系4。生产中主要采用农业措施和化学防治等方法对该病加以防治防治成本高效果不理想且化学防治造成的农药残留、环境污染等问题越来越严重正引起人们的重视。因此生物防治成为该病害防治研究的新方向。本研究对具有番茄黄化曲叶病毒病拮抗效果的菌株进行了筛选对其防治效果、增产作用和番茄品质方面的改善效果进行了评价旨在为番茄黄化曲叶病毒病的生物防治和生防菌制剂开发奠定基础。1材料与方法11材料供试毒源农杆菌介导的番茄黄化曲叶病毒侵染性克隆由江苏省农业科学院植物保护研究所周易军研究员提供。供试生防菌由本实验室微生物菌种库获得共102株。供试植株番茄感病品种“合作903”。12方法121生防菌发酵液的制备将供试菌株在LB平板上划线28℃生化培养箱中培养14h待长出单菌落后挑取单菌落接入含有4mLLB培养液的试管中置于28℃、200r/min的摇床中培养制成种子液以1%的接种量将种子液接种于装有500mLLB培养液的1L规格的大三角瓶里置于28℃、200r/min的摇床中培养48h待菌浓度达到109CFU/mL时稀释待用。122毒源接种体的制备将农杆菌侵染性克隆在含有利福平和卡那霉素终浓度均为50mg/L的LB平板上划线置于28℃生化培养箱中过夜培养挑取单菌落接种于LB培养液中28℃、200r/min摇床中培养24h。病毒人工接种方法待番茄长到45叶期时采用针刺法用注射器在番茄茎部注射20μLTYLCV农杆菌侵染性克隆操作时用力要轻每株苗均匀选取2点。123生防菌株在温室条件下的筛选试验将番茄种子播于育苗盘中放置于2527℃、12h12h光周期的温室中进行培育。所用基质为V草炭∶V蛭石=2∶1。待番茄苗长到45叶期时进行移栽。试验共设40个生防菌处理和1个清水对照处理每处理3次重复每重复12棵苗。喷雾处理时菌液中按照001%的终浓度加入表面活性剂吐温20均匀喷洒于番茄叶片以菌悬液在叶片上不下滴为宜菌液终浓度为5×107CFU/mL。对照处理采用清水处理。生防菌处理7d后接种病毒显症后调查病害严重度并计算防治效果。病害严重度=∑各级病株数×级值/调查总株数×最高级值×100%防治效果=对照组病害严重度处理组病害严重度/对照组病害严重度×100%。病害严重度分级标准560级无症状1级顶部叶片轻度黄化叶边缘轻度卷曲花期花轻度脱落2级顶部叶片中度黄化叶边缘中度卷曲褶皱花期花轻度脱落结果期轻度减产3级叶片严重黄化卷曲褶皱花期花中度脱落结果期中度减产4级大面积叶片严重畸形缩小植株生长缓慢明显矮化花期花严度脱落结果期严重减产或绝产。—011—江苏农业科学2013年第41卷第9期