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藏药大花黄牡丹根皮挥发油的提取和成分分析.docx

花匠小妙招
2024-11-23 11:58

? ? 藏药大花黄牡丹根皮挥发油的提取和成分分析 ? ? 蒋丽丽，李鹏飞，蒋　帅，张彦龙，胡　楠，赵丹丹,,* (黑龙江大学 a. 生命科学学院；b. 黑龙江省普通高等学校分子生物学重点实验室；c. 黑龙江大学医院，哈尔滨 150080) ? 藏药大花黄牡丹根皮挥发油的提取和成分分析蒋丽丽a,b，李鹏飞a,b，蒋帅a，张彦龙a,b，胡楠c，赵丹丹a,b,c,* (黑龙江大学 a. 生命科学学院；b. 黑龙江省普通高等学校分子生物学重点实验室；c. 黑龙江大学医院，哈尔滨 150080) 西藏大花黄牡丹(Paeonialudlowii)为芍药科、芍药属植物，主要生长在海拔2 900～3 200 m的雅鲁藏布江红河谷和林缘坡麓次生灌木林。主要分析西藏大花黄牡丹根皮部挥发油成分。通过回流法对其挥发油组分进行提取，进行单因素影响实验摸索最适的提取条件，通过GC-MS对其化学成分进行分析，采取面积归一法对成分相对含量进行分析。结果表明，大花黄牡丹根皮部挥发油最适提取为4倍水量，浸泡4 h，提取4 h，提取率为1.36%。通过GC-MS共检测出来22个化合物，其中最主要成分为丹皮酚。挥发油；藏药；大花黄牡丹；回流法；GC-MS 全球范围内，芍药属植物包括约35个种，主要分布在欧洲和亚洲的温带地区，其中在我国西南和西北分布着11个种，仅有少数种类分布在东北、华北及长江两岸各省[1]。西藏大花黄牡丹(Paeonialudlowii)为芍药科(Paeoniaceae)、芍药属(Paeonia)的一种亚灌木植物，为我国西藏特有种，主要分布在林芝地区米林县境内(米林藏语意为“药州”)[2]，堪称牡丹中的王中之王，其花朵呈金黄色、植株高大极具观赏价值[3]。大花黄牡丹根皮作为藏药的一种，常为民间所用[3-5]。芍药属的其他植物的根皮，也作为重要的天然药物使用，如牡丹(Paeoniasuffruticosa)、芍药(Paeonialactiflora)、白芍(Paeoniaalbiflora)、草芍药(Paeoniaobovata)等，都具有镇痛、镇痉、抗炎、清热凉血、活血散瘀、促进血液循环等功效[6-7]，近年来因其具有较好的药理活性[8],得到广泛的关注，在抗心脑血管疾病[9],抗肿瘤[10-12]，抗炎[13]等活性研究中，均表现出较好的活性。其主要成分丹皮酚具有减缓皮肤色素沉着的效果[14]，在大鼠中可有效地抑制酒精造成的损伤[15]，且在骨质疏松[16]和糖尿病治疗[17]研究中，均有疗效。对心脑血管疾病，妇科疾病也有好的疗效[6-7]。根据相关文献的梳理，国内外学者在芍药属根皮的化学成分及生物活性研究成果丰硕，然而对于西藏大花黄牡丹(P.ludlowii)根皮的化学成分和生物活性研究较少。国内主要针对其生物学特性作了少量研究，如生长、繁殖、引种、营养元素等；还有少量生态学研究，如生态习性直径[5]、种群数量动态[3,7-18]等。大花黄牡丹根皮富含大量活性成分，当地地方志记载，藏民早在几百年前就已经使用其根皮治疗妇科疾病、心脑血管疾病、皮肤癣菌病等，常以水煎法使用。所以，通过回流法对藏药大花黄牡丹根皮挥发油成分进行提取和成分分析。 1　材料与方法 1.1试验材料和仪器采用的大花黄牡丹根皮是本课题组2015年采自西藏林芝地区，无水乙醚、无水硫酸钠为国产分析纯。仪器：万能粉碎机、回馏装置、调温电热套、旋转蒸发仪、电热恒温鼓风干燥箱、电子分析天平、超声清洗仪、Thermo气相色谱/质谱联用仪TRACE_1300GC-ISQ_LT。 1.2试验方法 1.2.1挥发油的提取将大花黄牡丹根皮部用蒸馏水清洗，室温晾干，剪碎呈小块，用万能粉碎机粉碎后用40目筛子筛选制成粉末状样品。精确称40 g粉碎后样品，置于1 000 mL的圆底烧瓶中，加水室温浸泡。连接回流装置，将样品进行回流处理，保持圆底烧瓶里的混合液保持微沸的状态，回流后将混合液取出过滤，留上清液，用乙醚进行萃取，萃取3次后回收乙醚液，并对其进行过滤。得到液体利用旋转蒸发仪在40 ℃下将乙醚旋转蒸发掉，得到挥发油成分，精密称量，得到大花黄牡丹根皮部挥发油的提取率：提取率=大花黄牡丹根皮部挥发油量(g)/样品量(g)×100% 1.2.2挥发油提取的单因素实验在前期预实验发现，大花黄牡丹的挥发油提取量和加水量，浸泡时间以及蒸馏时间有关系，所以进行单因素实验对提取工艺进行摸索。浸泡时间对挥发油提取率的影响。按照1.2.1项方法，设置相对的浸泡时间为2 h、4 h、6 h，2倍水量蒸馏2 h，进行挥发油的提取，计算提取率。加水量对挥发油提取率的影响。按照1.2.1项方法，设置相对的加水量为2、4、6倍，浸泡2 h，蒸馏2 h，进行挥发油的提取，计算提取率。提取时间对挥发油