锦带花表型、花粉形态及ISSR分子标记比较研究
【摘要】： 锦带花(Weigela florida (Bunge) A. DC)是珍贵的观赏植物种质资源,在河北省主要集中分布在承德雾灵山地区,有粉色和白色两种花色。本研究以承德雾灵山区野生锦带花为材料,从枝、叶、花等器官的表型形态,孢粉形态和DNA分子标记3个方面分别对白色和粉色锦带花两个群体进行了分析研究。研究结果如下:1.不同花色锦带花叶1/4宽、叶3/4宽、叶宽距叶基处的距离、叶尖角、叶基角以及花冠长等形态因子均有极其显著差异。2.锦带花白花花粉粒为三突起不规则圆形,三个形状较规则萌发孔盖分布在对称的三个部位;粉花花粉粒为较规则圆形,有一个花粉萌发孔盖,形状不规则。两花色花粉粒大小差异明显,白花的花粉粒直径为80.9±2.9μm,粉花的花粉粒直径为77.7±1.2μm;花粉粒表面有锥状突出物,锥状突出物分布较白花分布密集。3.建立了锦带花ISSR-PCR反应体系,并对体系中各个影响因素进行了优化,即在20μL的反应体系中, DNA模板20.00 ng/μL,0.20mmol/L dNTP,稀释10倍体积高保真PCR缓冲液含(Mg2+)3.00μL;1.00μmol/L引物,1.25UTaq酶。扩增程序为:94℃预变性5min;94℃变性30s,52℃退火45s,72℃延伸90s,45个循环;最后72℃延伸5min,4℃保温。用此反应体系扩增得到了锦带花的ISSR图谱。4.采用ISSR技术,对2个花色锦带花群体的DNA进行扩增,每个引物扩增出谱带2-7条,平均扩增出4.5条谱带,产物大小均在200bp-2000bp之间,多态位点的数量为12,多态位点的百分比为100.00 %。利用POPGENE32软件分析得到,片段H上的等位基因频率在白色和粉色群体间有较大差异,白色群体出现的少,粉色群体出现的多;白色群体在不同的基因位点上A值变异大,粉色群体的Shannon’s信息指数高于白色群体,粉色群体的基因多样性较高;两个花色群体的无偏差遗传相似度(I)为0.6709,说明群体间的遗传变异较大;群体间的无偏差遗传距离为0.3991,群体间有一定的距离;群体之间Nm为1.5767,两种花色间存在基因流动。
【学位授予单位】：河北农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
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