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利用RAPD分子标记和同工酶酶谱技术对野牛草进行早期性别鉴定

花匠小妙招
2024-11-23 16:14

【摘要】： 野牛草(Buchloe dacryloides(Nutt.)Engelm.)又叫水牛草、牛毛草,属于禾本科画眉草亚科野牛草属植物。原产于北美南部(从蒙特那州到墨西哥北部)北美干旱大草原,在干旱季节是最好的牧草。野牛草具有低矮、耐旱、低管理水平等优点,也是很好的草坪草。野牛草是一种雌雄异花的植物,在营养生长期,不同性别植株间不存形态学上的差异,这对育种工作带来了巨大的困难。本试验从RAPD分子标记和同工酶酶谱两个方面,尝试对野牛草进行早期性别鉴定。利用RAPD分子标记在雄性植株中扩增出了一条特异性条带,可以用于鉴定雄性植株。对野牛草幼叶和幼穗的同工酶酶谱分析发现,幼叶的多酚氧化酶酶谱可以用于野牛草的性别鉴定。目前野牛草的性别鉴定比较困难,给育种工作者带来很大的障碍。试验结果如下：(1)在现有材料中,筛选出23份资源材料(过去三年性别稳定),其中包雄性9份,雌雄同株4份和雌性10份。共筛选了300条引物,只有引物S211可以标记出雄性植株。将特异性条带回收,纯化,克隆测序,得到一条833bp的DNA片段,现已上传至Genbank(登录号：JN982469)。将此结果在第一个生长季的188单株中进行验证,雄株的鉴定准确率为85.8%。(2)以已知性别植株的幼叶和幼穗为试验材料,分析其过氧化物同工酶(POD)超氧化物歧化酶同工酶(SOD)和多酚氧化酶同工酶(PPO)在性别表达上的差异性。结果表明,雄性野牛草幼穗的POD和PPO同工酶各有1条特异条带Rf0.12和Rf0.15：雌雄同株的幼穗PPO同工酶酶谱中有1条特异条带Rf0.12；雌株的叶片PPO同工酶酶谱有Rf0.12的特异性条带。通过分析发现幼叶PPO同工酶酶谱可以用来对野牛草进行早期性别鉴定。

【学位授予单位】：四川农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012

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