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RAPD技术在月季种质鉴定和遗传多样性分析中的应用

花匠小妙招
2024-11-23 16:14

【摘要】： 月季，是蔷薇科蔷薇属的一个重要类群，在世界上分布广泛，栽培历史悠久，是我国的四大切花之一，也是北京等许多城市的市花，月季具有很高的观赏价值和经济价值。由于月季种类繁多，来源广泛，名称混乱，又加上频繁的种内杂交，其种质资源复杂多样，使分类和鉴定工作难度加大，以往的形态学和生理生化指标鉴定分类受环境因素和发育阶段的影响，很难满足月季分类鉴定、产权保护和选育工作的需要。而新兴起来的分子标记技术(如RFLP、RAPD、AFLP、SSR等技术)克服了形态学方法的诸多缺点，尤其是RAPD技术，以其简单、快速、无同位素污染、多态性高和需DNA量少等优点，而被广泛的应用于农作物的种质鉴定和遗传多样性分析。本文利用RAPD标记对28个月季品种和2个蔷薇种进行了遗传多样性分析。从145个引物中筛选出17个引物，扩增出清晰、稳定的多态性片段63条。这些片段能将30个材料完全区分开，每个引物扩增的谱带有3-11个，而且扩增谱表现出很高的多态性，表明月季品种之间的多态性很高。其中4个引物从30个供试材料中扩增出3个品种的RAPD特异分子标记，品种“仙境”的RAPD标记有两个，分别为OPR-16_(876)、OPQ-07_(930)，品种“曼海姆”的为OPQ-17_(520)，品种“哈德富郡”的为OPT-09_(1600)。这些特异RAPD标记可以把这些月季品种和其它品种区别开，辅以形态学方法就可以用来对这些品种进行准确鉴定。通过对RAPD特异片段的回收、克隆和测序，设计特异引物进行PCR，将品种“仙境”的RAPD特异分子标记OPR-16876转换成了稳定的SCAR标记，从而在基层可以用此SCAR标记对品种“仙境”进行鉴定，也证明了RAPD标记转换成SCAR标记在月季中的可行性。利用筛选出的17个引物扩增出的63条多态性片段来做聚类分析，用UPGMA法通过计算机软件绘制了30个供试材料的亲缘关系树状图，聚类结果基本能反映出各类群所含品种遗传背景的一致性，一个类群内大部分品种都聚在了一起，所以，用RAPD标记对月季进行分类的结果与传统的分类方法基本一致。虽然杂种茶香月季、丰花月季、藤本月季和大花月季基本聚在了一起，但部分品种并没有归到各自所属的类群中，类群之间有重叠，表明月季在长期的选育过程中，各类群品种之间发生了频繁的杂交，使得一个品种包含了几个类群的遗传因子，遗传物质发生了渗透和交换。而微型月季和地被月季聚在一起与这几个类群相隔离，没有重叠，这些结果都与各类群月季的外部形态相吻合。与预期的结果一样，两个古老蔷薇野生种疏花蔷薇和尖刺蔷薇与现代月季在很小的相似系数(0.49)处聚在一起。本研究结果对月季的分类鉴定、良种选育和产权保护具有重要意义。

【学位授予单位】：西北农林科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2002

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