小报春制种技术及异型花柱SSR连锁标记的研究
【摘要】： 小报春(Primula forbesii)是中国特有的报春花科报春花属植物,花量大,花期长达3个月,市场需求量大,是冬春少花季节重要的观赏花卉。中国对于报春花属植物研究起步较晚,针对报春花属植物的生产技术研究更少,小报春作为二年生植物,高效制种生产技术是其产业发展的关键技术之一。为了解决小报春由于自交不亲和而影响生产效率的这一难题,本试验以小报春异型花柱这一重要性状为切入点,探究长短花柱比例及栽培方式对小报春制种效率的影响;引入虫媒传粉为新型媒介,探究蜂类传粉替代传统人工杂交授粉的可能性;利用SSR-BSA法开发与异型花柱性状相连锁的分子标记,作为早期辅助选择手段,寻找小报春高效制种的最佳方式,以期为报春花属植物产业化生产及重要性状的分子生物学研究提供理论依据。主要结果如下:1)以小报春品种'红星'为试材,研究了三种授粉方式(熊蜂、蜜蜂、人工授粉)、三种长短花柱植株数量比例(1:2、1:1、2:1)及两种空间排布方式(错位、交替)对小报春制种效率及种子质量的影响。结果表明,以熊蜂为授粉蜂,长、短花柱植株数量比例为1:2时,小报春种子生产效率最高(子房膨大率60.10%、单果结实数122.21粒/果、种子千粒重0.0760g、种子萌发率75.00%、种子发芽势47.50%),且生产所得种子培育的小报春在花色、花径、冠幅等性状上表现整齐一致,是较为合适的小报春制种方式。2)对450对EST-SSR引物进行多态性筛选,能够成功扩增的引物共103对,扩增成功率为23.41%,进一步筛选得到28对具有良好多态性的引物,占全部扩增成功引物的27.18%,占全部共筛选引物的6.22%。以小报春短花柱类型(T2)X长花柱类型(P2)的F1代分离群体为试验材料,通过BSA法对28对具有良好多态性的EST-SSR引物进行筛选,获得了 1个与决定小报春异型花柱性状基因紧密连锁的SSR标记c64326,遗传距离约为3.70cM,该片段可能为位于内含子或基因间的区域。对小报春制种技术进行研究,得到了一个以熊蜂为授粉蜂,长、短花柱植株数量比例为1:2的小报春虫媒传粉制种生产方案,并开发了 1个与异型花柱性状紧密连锁的分子标记c64326,可根据生产方案的要求对小报春植株类型进行苗期选择,本试验能够极大地提高小报春制种效率、同时缩短制种时间,为小报春种子的产业化生产提供了理论依据。
【学位授予单位】：北京林业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
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