番茄细菌性斑点病菌实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用
摘要： 以番茄细菌性斑点病病原菌丁香假单胞菌番茄致病变种（Pseudomonas syringae pv. tomato，Pst）的致病相关基因HrpZ为靶序列，设计了特异性引物Pst3F/Pst3R，能从Pst基因组DNA中特异性扩增出大小为161 bp的目的片段。建立的Pst实时荧光定量PCR检测技术体系的检测灵敏度比普通PCR高1 000倍。利用实时荧光定量PCR检测体系，检测模拟带菌种子中Pst的带菌量，检测下限为4.21 cfu ? g-1；检测人工接种叶片组织中Pst的带菌量，检测到1级发病叶片带菌量为4.15 × 102 cfu ? g-1。对田间采集的63个番茄细菌性斑点病明显症状和疑似症状样本，分别进行了实时荧光定量PCR、普通PCR和病原菌分离检测，检测到54个样本中含有Pst，3种方法检测结果一致。结果表明，建立的Pst实时荧光定量PCR检测体系具有特异性强、灵敏度高的特点，可以快速准确地定量检测番茄种子和发病组织中Pst的含量，为番茄细菌性斑点病的早期预防和流行监测提供了有效的技术手段。
中图分类号:
S 641.2
引用本文
柴阿丽1，帕提古丽2，郭威涛1，石延霞1，谢学文1，席先梅3，李宝聚1,*. 番茄细菌性斑点病菌实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用[J]. 园艺学报, 2019, 46(1): 182-192.
CHAI Ali1，Patiguli2，GUO Weitao1，SHI Yanxia1，XIE Xuewen1，XI Xianmei3，and LI Baoju1,*. Development and Application of Quantitative PCR for Detection of Pseudomonas syringae pv. tomato[J]. ACTA HORTICULTURAE SINICA, 2019, 46(1): 182-192.
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