七叶一枝花内生细菌的多样性及2株内生细菌促生机制的初步研究
七叶一枝花(Paris polypholla)为我国传统中药,野生资源匮乏。人工种植品已成为其市场的主要来源。然而,人工种植七叶一枝花存在品质下降问题。内生菌作为影响中药品质的关键因素之一,已成为保障与提升中药品质研究的新方向。本研究以四川省代表性种植区的五年生七叶一枝花为研究对象,采用高通量测序技术和传统微生物培养方法,对其根茎、茎和叶三种组织中的总内生细菌和可培养内生细菌的多样性、丰富度及其组成和分布特征进行分析;通过HPLC法检测其根茎、茎和叶中的重楼皂苷含量,并分析总内生细菌和可培养内生细菌与重楼皂苷含量的相关性;并将相关优势菌群与小麦幼苗共培养,筛选促生菌株;进一步将促生菌与黄芪幼苗进行共培养,分析不同时间点黄芪幼苗的生长和生理指标的变化,初步探究促生菌促进黄芪幼苗生长的机制,为后期利用内生菌改良黄芪和七叶一枝花品质的研究奠定基础。主要研究结果如下:1)采用高通量测序技术首次分析了四川地区种植的七叶一枝花的根茎、茎和叶中的总内生细菌多样性。共获得346730条有效序列,划分为1844个OTUs,分类到21个门、58个纲、143个目、245个科和502个属。根茎、茎和叶中相对丰度最高的菌属分别为鞘脂菌属(Sphingobium,8.29%)、贪铜菌属(Cupriavidus,14.03%)、甲基杆菌属(Methylobacterium,28.14%)。根茎中总内生细菌的丰富度、多样性和均匀度均高于茎和叶,根茎与茎中总内生细菌的组成更加相似。“代谢”功能预测表明,“氨基酸代谢”在根茎中相对丰度最高,“能量代谢”在茎和叶中相对丰度最高。通过检测根茎、茎和叶中重楼皂苷I、II、VI、VII的含量,发现三种组织中均含有该4种重楼皂苷。重楼皂苷I(1.496 mg/g)、II(1.122 mg/g)和VII(0.785 mg/g)在根茎中的含量最多,重楼皂苷VI(0.3... （共81页)
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