拮抗柑橘溃疡病内生细菌的筛选及鉴定
拮抗柑橘溃疡病内生细菌的筛选及鉴定
【摘要】：柑橘溃疡病是由地毯草黄单胞柑橘致病变种(Xanthomonas axonopdis pv.citri)引起的,为国内外重要的植物检疫性病害。该病害给美国、巴西、澳大利亚和中国等柑橘种植区域带来了巨大的经济损失(Das,2003)。目前,对柑橘溃疡病主要采用以农业防治为基础,化学药剂为主的防治技术(何秀玲等,2007)。柑橘是世界上最重要的商品水果之一,环境污染、病原菌抗药性以及果品农药残留等问题突显,要求在病害控制上限制化学农药的大规模利用,为了提高我国柑橘的品质和出口标准,达到绿色产品的要求,走生态之路、环保之路。因此,探索该病害新的防治途径以克服农药残留和病原菌抗药性等问题也势在必行。因生物防治对环境友好,生防制剂的毒性较低,不易在果实上残留毒性物,而受到人们的广泛关注(陈力等,2008)。目前,在对柑橘溃疡病生防研究国内外已有报道,但主要集中在从土壤、叶表面分离获得拮抗微生物(Das,2003;谭小艳等,2006;张洪波等,2007;陈力等,2008)。本研究采用江西赣州脐橙果园的健康叶片,经常规表面消毒后,用印迹法(黄云,2010)检测表面消毒无菌的样品,在研钵中研磨,将组织汁液涂布于NA(方中达,1998)平板上分离、纯化内生细菌。采用抑菌圈法对分离获得的内生细菌进行抑菌活性测定,将活化培养好的拮抗内生细菌和柑橘溃疡病菌配制为2.0×10~8CFU/ml的菌悬液,取10ml柑橘溃疡病菌菌液与冷却至50℃的150ml NA培养基混匀,倒平板,每个平板约20ml,再取已浸2.0×10~8CFU/ml的拮抗细菌的直径10 mm的滤纸片放入平板中间,每处理3次重复,以NB培养液处理为对照。30℃培养48 h后,观察记录抑菌情况。将有较好拮抗作用的菌株转移8代以上,继续测试其抑菌作用,测量抑菌圈直径。采用抗Rif.标记法(Bacon et al.,2002)测定拮抗作用较好的内生菌株在烟株内的定殖性。并于温室中采用先喷雾接种2.0×10~8CFU/ml菌悬液的内生细菌,第2d针刺接种2.0×10~8CFU/ml的柑橘溃疡病菌菌悬液,于28℃的环境中保湿培养5d后,统计发病率、病情指数和防治效果。对控病效果好的菌株按照常规细菌学方法(东秀珠等,2001;布坎南R E等,1984)进行测定其形态特征、培养性状和生理生化特性等,对其16S rDNA进行扩增、测序,将序列在GenBank数据库中进行BLAST比对。实验结果测得分离获得的内生细菌菌株Q34在NA平板上对柑橘溃疡病菌的抑菌圈直径达13.0mm,对柑橘溃疡病菌的生长有明显的抑制作用,连续转代8次以上,抑菌能力没有发生明显的改变;抗Rif.标记法测定菌株Q34能在柑橘叶片内定殖;根据其菌株形态特征、培养性状、生理生化特性及16S rDNA序列比对分析,确定为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis;温室控病试验表明,菌株Q34对柑橘溃疡病的预防效果达61.7%,表现出了较好的控制作用,可作为柑橘溃疡病的生防菌株进一步研究。
相关知识
桐花树内生细菌动态及拮抗植物病原菌菌株筛选鉴定
柑橘溃疡病菌分离鉴定、全基因组测序及防治药剂筛选
溃疡病（植物）
百合枯萎病拮抗细菌的筛选、鉴定及其抑菌物质研究
棉花枯、黄萎病拮抗细菌的筛选、鉴定及抑菌机制初探
柑橘溃疡病检疫与防治
柑橘溃疡病的识别与防治措施
1株油茶病害拮抗真菌的鉴定、生物学特性及拮抗作用研究
拮抗细菌Bs
植物病害生防细菌的筛选策略综述
网址: 拮抗柑橘溃疡病内生细菌的筛选及鉴定 https://m.huajiangbk.com/newsview623871.html
| 上一篇: 番茄细菌性溃疡病是什么 |
下一篇: 猕猴桃细菌性溃疡病菌 |
