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目前，全球共有5条新冠病毒疫苗技术路线，我国是全球唯一同时进行5条技术路线研发的国家，先后有26款新冠疫苗进入临床试验。陈薇院士团队与康希诺生物共同开发的重组腺

花匠小妙招
2024-11-24 18:16

题型：非选择题-解答题难度：0.65 引用次数：965 题号：15201343

目前，全球共有5条新冠病毒疫苗技术路线，我国是全球唯一同时进行5条技术路线研发的国家，先后有26款新冠疫苗进入临床试验。陈薇院士团队与康希诺生物共同开发的重组腺病毒疫苗（以腺病毒Ad5为载体）是首家获批的国产腺病毒载体新冠病毒疫苗。该疫苗的原理流程如下图所示。请回答下列问题：

(1)腺病毒Ad5是双链DNA病毒，在①过程中去除了Ad5复制有关的基因，对人体无害；而新冠病毒为单链RNA病毒，还需要经过体外诱导

__________

过程，才能合成相关DNA，②过程所用的工具酶为

____________

。
(2)③过程是基因工程中的核心步骤，即

_______________________________

。以病毒做为基因工程的载体，其优点之一是可以利用病毒

___________________

的特点，将目的基因导入受体细胞。
(3)灭活病毒疫苗技术是传统疫苗制备技术，有120年以上的使用历史，但其对生产的安全性要求更高。从新冠疫苗的制备流程分析，传统灭活病毒疫苗的风险在于生产疫苗必须先大规模培养

_________

。而重组腺病毒疫苗则明显降低了该风险，其引起机体产生免疫反应的有效物质是

___________________

，控制该有效物质合成的是进入到

___________________

（填“细胞核”或“细胞质”）中的目的基因。
(4)无论哪种技术路线生产的疫苗，要确认其是否引起机体产生对新冠病毒的免疫反应，常用

_________

方法进行检测。

更新时间：2022/02/28 21:38:13 |

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【推荐1】PHB2蛋白具有抑制细胞增殖的作用。为初步探究某动物PHB2蛋白抑制人宫颈癌细胞增殖的原因，研究者从基因数据库中获取了该蛋白的基因编码序列（简称phb2基因），大小为0．9kb（1kb=1000碱基对），利用大肠杆菌表达该蛋白。回答下列问题：
(1)为获取phb2基因，提取该动物肝脏组织的总RNA，再经

__________

过程得到cDNA，将其作为PCR反应的模板，并设计一对特异性引物来扩增目的基因。
(2)图1为所用载体图谱示意图，图中限制酶的识别序列及切割位点见下表。为使phb2基因（该基因序列不含图1中限制酶的识别序列）与载体正确连接，在扩增的phb2基因两端分别引入

__________

和

__________

两种不同限制酶的识别序列。经过这两种酶酶切的phb2基因和载体进行连接时，可选用

__________

（填“E．coliDNA连接酶”或“T4DNA连接酶”）。

相关限制酶的识别序列及切割位点

名称

识别序列及切割位点

名称

识别序列及切割位点

HindⅢ

A↓AGCTT

TTCGA↑A

EcoRI

G↓AATTC

CTTAA↑G

PvitⅡ

CAG↓CTG

GTC↑GAC

PstI

CTGC↓AG

GA↑CGTC

KpnI

G↓GTACC

CCATG↑G

BamHI

G↓GATCC

CCTAG↑G

注：箭头表示切割位点
(3)转化前需用CaCl2处理大肠杆菌细胞，使其处于

__________

的生理状态，以提高转化效率。
(4)将转化后的大肠杆菌接种在含氨苄青霉素的培养基上进行培养，随机挑取菌落（分别编号为1、2、3、4）培养并提取质粒，用（2）中选用的两种限制酶进行酶切，酶切产物经电分离，结果如图2，

________

号菌落的质粒很可能是含目的基因的重组质粒。

注：M为指示分子大小的标准参照物；小于0．2kb的DNA分子条带未出现在图中

【推荐2】回答下列有关基因工程的问题
据统计，维生素A缺乏每年导致67万名五岁以下儿童死亡。因此科学家研发了一种通过基因工程使得稻米的食用部分胚乳含有维生素A的前体——胡萝卜素的大米，胡萝卜素在人体内会转化成维生素A，可以缓解人体维生素A缺乏。这种大米的制作过程应用了根癌农杆菌介导法进行转基因操作，将能够合成胡萝卜素的酶的基因重组后导入大米的基因组中，具体原理如下图所示。

1．图1原理中X表示

______________________

；Y过程表示

____________

。
2．图1中Z过程需要用到的植物激素是

________

A．生长激素
B．细胞分裂素
C．赤霉素
D．脱落酸
E．乙烯
F．吲哚乙酸
根癌农杆菌介导法转基因需要利用根癌农杆菌的Ti质粒完成，图2是Ti质粒的具体组成。（T-DNA区大小约17kb）

3．若将图2质粒用限制酶I与限制酶II进行完全酶切（各个片段大小不一致），并用凝胶电泳分离酶切后的片段，电泳时分子量越小扩散越快，则电泳结果应为图3中的

____________

。
4．为了筛选符合条件的农杆菌，可以在培养基中加入卡那霉素进行筛选。则可以在此培养基中生存的农杆菌类型为

___________________

。
5．根癌农杆菌介导法转基因原理如图4所示。当植物受伤时会产生一种信号分子，该信号会作用于农杆菌细胞表面的

____________

。试分析接受信号分子后农杆菌将T-DNA导入植物细胞的过程：

_________________________

。

【推荐3】下图为三种质粒和一个含目的基因的片段的示意图。图中Ap为氨苄青霉素抗性基因，Tc为四环素抗性基因，lacZ为蓝色显色基因，EcoR Ⅰ（0.7Kb）、PvuⅠ（0.8 Kb）等为限制酶及其切割的位点与复制原点的距离，1Kb=1000个碱基对长度。请据图回答：

（1）质粒A、C不能作为目的基因运载体的理由分别是