PCR介导观赏向日葵DFR基因改造及其真核表达载体构建研究初报.pdf 全文 文档投稿网
福建农林大学学报(自然科学版) 第37卷第2期 of and Science Journal Agriculture University(NaturalEdition) 2008年3月 Fujian Forestry PCR介导观赏向日葵DFR基因改造 及其真核表达载体构建研究初报 张剑亮，潘大仁，周以飞，吴明伟，柯祥德，林钿 (福建农林大学作物科学学院，福建福州350002) 摘要：二氢黄酮醇_4．还原酶(DVa)是花色素苷代谢途径中的关键酶之一，本研究利用PCR技术将观赏向日葵DFR底物结 合区敲除，并将该区域中134位保守氨基酸天冬酰胺定点突变为天门冬氨酸和亮氨酸，最后获得已敲除底物结合区的基因 pCAM-N134D和pCAM—N134L． 关键词：观赏向日葵；PCR；二氢黄酮醇_4．还原酶；底物结合位点突变；载体构建 文献标识码：A 文章编号：1671-5470(2008)02-0166-04 中图分类号：$565．5；Q781；凹84 PCR．mediatedmodificationofDFR fromornamentalsunflower gene andconstructionofthe vector gene’Splantexpression ZHANG Dian Da—ren，ZHOUYi—fei，WUMing-wei，KEXiang-de，LIN Jian—liang，PAN and ForestryUniversity，Fuzhou，Fujian350002，China) (College。fCropScience，FujianA#culmre ● thelastcommoninthe Abstract：Dihydrotlavonol4-reductase(on)cataly’zesstep anthocyaninbiosynthesispathway．Byusing ofDFRfromornamental conservedami— PCR，substrate ff,11．rtuJl．$)w幽knockedout，and一134 bindingregion 8unⅡower(Helianthus no into N134DandN134L acidresidue w矗smutated orleueine．KODFR．mutated aspara#ne aspartate wer℃successfullystopS#． also willbeusedfor Plant vector and Were pcAM—N134Lsuccessfullyconstructed，which expressionpCAM-KODFR，pC
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