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功能化核酸技术检测病原菌研究

摘要:创伤弧菌是威胁水产养殖业发展的重要的病原微生物,现场及时检测对于控制养殖户的经济损失至关重要。本研究利用体外筛选技术和磁性分离原理对创伤弧菌的胞外产物(CEM-VV)进行DNAzyme筛选。经过7轮筛选获得了特异性检测创伤弧菌的富集DNA文库,经高通量测序,选择出5条对创伤弧菌具有明显切割活性的DNAzyme,其中DNAzyme-RFD-VV-1的活性最高。通过定点突变,DNAzyme-RFD-VV-M2对创伤弧菌的切割活性高于突变前,其最佳反应条件进行优化,最终确定在缓冲液pH在碱性条件8.0,二价金属离子Mg2+浓度为30mM时切割活性最高。DNAzyme-RFD-VV-M2能够特异性识别创...

在线出版日期:

2023-07-06 (万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

[7] 王崇明,杨冰,宋晓玲,等.应用双抗夹心ELISA法检测皱纹盘鲍致病病原-创伤弧菌的研究[J].海洋水产研究.1999,(1).30-34.

[9] 彭薇.RNA-DNAzyme的研究[D].2005.

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