植物病原细菌检测和细菌病害诊断方法刘学敏1*,孟玉芹2(1.东北农业大学农学院,哈尔滨150030;2.黑河出入境检验检疫局,黑河164300)摘要:植物病害诊断是通过病菌鉴定和致病性测定等步骤实现的。在过去的10年里用于细菌鉴定的基因组技术的快速发展极大地简化和促进了病菌的检测和鉴定,但是DNA分子检测方法不能完全取代传统的培养检验和表型检验方法。文中介绍了未显示病害症状的植物或植物产品中已知细菌的免疫检测和基因组DNA检测方法,以及细菌病害诊断鉴定的新方法。关键词:病原细菌;免疫检测;DNA分子检测;基因组探针;多相分析诊断中图分类号:S43211文献标识码:A文章编号:1672-3538(2009)03-04-0211-07ApproachesofPlantPathogenicBacteriaDetectionandBacterialDiseaseDiagnosisLIUXue-min1,MENGYu-qin2(1.CollegeofAgronomy,NortheastAgriculturalUniversity,Harbin150030,China;2.HeiheEntry-Ex-itInspectionandQuarantineBureau,Heihe164300,China)Abstract:Plantdiseasediagnosisisbasedonanumberoffactors,includinglaboratorytestsforpathogenidentificationandpathogenicitytests.Rapiddevelopmentofgenomictechniquesforcharacterizationofbacteriaoverthepastdecadehasgreatlysimplifiedandimprovedpathogendetectionandidentification,butDNA-basedmethodshavenotyetentirelyreplacedtraditionalcultureandphenotypictests.ThepapersummarizedrapidimmunodiagnosticandDNA-baseddetectionmethodsforknownbacterialpathogensinplantsorplantproducts,whichoftenmanifestnosymptomsofdisease,andnewmethodsforidentifyingandcharacterizingbacteriadiseasediagnosis.Keywords:pathogenicbacteria;immunodiagnosis;DNA-baseddetection;genomicprobe;polyphasicanalysisdiagnosis细菌是仅次于真菌和病毒的重要植物病原物。迄今已知由细菌引起的病害在500种以上,其中青枯病、软腐病、马铃薯环腐病以及水稻白叶枯病等都是世界性重要病害[1-2]。病原细菌鉴定和细菌病害诊断始终是细菌学家和植物病理学家的重要工作。然而至今还没有一套仅靠少数指标就能准确鉴定细菌和诊断细菌病害的简便方法,细菌病害诊断往往需要综合方法。细菌表型和基因型特征作为细菌鉴定的依据可相互印证。对已知细菌的诊断只需症状识别和快速检验等简单程序,但对未知病菌的诊断则要有田间观察、染病植物组织检查和基于柯赫氏法则的病菌分离鉴定等步骤,鉴定遍布于环境中的腐生细菌就更加困难。在过去10年中,细菌鉴定的基因组技术的快速发展极大地简化和促进了病菌的检测鉴定工作,目前已报道了多种常见植物病原细菌检测的PCR引物序列。与传统检测方法相比,现代分子生物学技术应用可大大提高检测灵敏度和准确度,并使得快速检测大样本的操作成为可能。但由于试剂、设备、试验人员以及方法本身的局限,利用选择性培养基分离培养或采用免疫诊断进行确定性试验一直是细菌病害诊断的普遍作法。1已有的细菌检测方法了解传播体来源、估计病害发生趋势是控制
*作者简介:刘学敏,男,博士,教授,从事植物病理学教学和研究。收稿日期:2009-09-08第7卷第3-4期菌物研究Vol17No13-42009年11月JournalofFungalResearchNov.2009
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