石榴花活性成分的筛选及小鼠乳房炎模型治疗效果的评价
石榴花活性成分的筛选及小鼠乳房炎模型治疗效果的评价
【摘要】： 目的及意义:现如今,奶牛乳房炎的治疗仍是以抗生素为主,随着我国农业农村部“减抗限抗”等政策的出台,兽医临床需要一种安全、高效、毒副作用小的药物对其进行替代,来进行相关疾病的治疗。实验室在前期的研究中发现,石榴花具有一定抗菌抗炎效果,不但能抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、无乳链球菌的生长,还能抑制二甲苯所致的小鼠耳肿胀。因此,本研究首先对石榴花中多糖、多酚、生物碱、黄酮类活性物质进行提取,通过体外抑菌试验、安全性检测、体内抗炎试验及小鼠乳房炎治疗等多种方法对其作用效果进行评价。旨在探明石榴花的药效成分,挖掘潜在的生物功效。其意义是为石榴花活性成分标准的建立提供数据支持,为抗菌抗炎药物、奶牛乳房炎治疗药物及新疆地方药材的开发与利用提供科学依据。方法:1.采用溶剂提取、超声辅助提取等方式对石榴花中的多糖、多酚、生物碱、黄酮类活性物质进行提取和含量测定,通过打孔法和微量肉汤法对各活性物质粗提物的体外抗菌效果进行检测。2.采用急性毒性预试验和最大耐受量试验对各活性物质粗提物的安全性进行测定,分别对二甲苯致炎的各组小鼠灌胃1 800 mg/kg、900 mg/kg、450 mg/kg的石榴花多糖、多酚、生物碱、黄酮粗提物,计算耳廓肿胀度并观察病理学变化,评价石榴花各粗提物的体内抗炎效果。3.采用第四乳区注射金黄色葡萄球菌的方式建立小鼠乳房炎模型,成功后各组分别灌胃20 m L/kg生理盐水、0.13 g/kg环丙沙星、1.8 g/kg石榴花多糖、1.8 g/kg石榴花多酚、1.8 g/kg石榴花黄酮进行治疗,在治疗的3、5、7d,对各组小鼠乳腺组织中IL-6、TNF-α含量和菌落数量以及病理学变化进行检测,评价石榴花各粗提物对于小鼠乳房炎的治疗效果。结果:1.石榴花多糖、多酚、生物碱、黄酮粗提物中相应活性物质含量分别为35.59±0.27%、43.15±0.90%、34.87±0.42%、28.18±0.19%,其中多糖、多酚、黄酮粗提物对金黄色葡萄球菌具有抑制作用,相同浓度下抑菌效果为,多酚粗提物>黄酮粗提物>多糖粗提物。2.石榴花多糖、多酚、生物碱、黄酮粗提物的LD_(50)值大于1 800 mg/kg,最大耐受量为4.5 g/kg,是成人剂量的45倍,属于无严重急性毒性物质。其中石榴花多糖中剂量、多糖高剂量、多酚高剂量、黄酮高剂量能显著抑制小鼠耳廓肿胀,抑制率分别为31.14%、40.12%、31.14%、32.93%,还能减轻炎性细胞浸润程度,作用效果与地塞米松无显著差异(P>0.05)。3.石榴花多酚、黄酮粗提物能够减轻小鼠乳腺组织内炎性细胞浸润和组织损伤程度,显著降低小鼠乳腺组织中的菌落数量(P<0.05),抑制IL-6和TNF-α分泌的效果与阳性药物环丙沙星无明显差异(P>0.05)。结论:石榴花中含有多糖、多酚、生物碱、黄酮类活性成分。其中,石榴花多糖、多酚、黄酮粗提物具有一定抗菌抗炎效果,不但能够抑制金黄色葡萄球菌的生长,而且具有一定的安全性,在保证小鼠安全的情况下,能够减轻二甲苯所致的小鼠耳肿胀。此外,石榴花多酚、黄酮粗提物对于金黄色葡萄球菌感染造成的小鼠乳房炎同样具有良好的治疗效果,能够显著的降低小鼠乳腺组织中菌落数量和细胞因子含量,减轻炎性细胞浸润和组织损伤程度。
【学位授予单位】：新疆农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2022
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