题型:非选择题-解答题 难度:0.85 引用次数:590 题号:17851622
从植物根系中分离出的C菌可抑制多种土壤传播的植物病原菌。科研人员利用基因工程改造C菌,使其抑菌能力增强的同时具备生物固氮能力。
(1)C菌的抗生素合成受RetS蛋白抑制,图1示敲除C菌中retS基因的过程。
①研究人员将整合了lox序列的庆大霉素抗性基因导入C菌,使用添加
____________的培养基可初步筛选出导入成功的C菌。
②lox-庆大霉素抗性基因通过同源重组的方式整合到C菌基因组中,若要通过PCR技术证明C菌基因组中retS基因已被lox-庆大霉素抗性基因替换,图2中应选择的正确引物组合是
。
A.Ⅰ和Ⅱ B.Ⅱ和Ⅲ C.Ⅰ和Ⅳ D.Ⅱ和Ⅳ
③给C菌导入PC质粒,并将其置于添加
的培养基中,获得敲除retS基因且无庆大霉素抗性基因标记的Cr菌。
(2)为获得具有固氮能力的CrN菌,科研人员提取固氮菌M体内的固氮酶基因导入Cr菌。
①需依据固氮酶基因序列设计引物,扩增待检验菌和
的基因组DNA,对比电泳结果,筛选转化成功的CrN菌。
②将C菌、固氮菌M以及转化成功的CrN菌同时接种在长满枯草芽孢杆菌菌落的培养基上,测量抑菌圈直径,并检测三者的固氮酶活性,分别是为了评估CrN菌的
。
(3)为进一步评估CrN菌对拟南芥生长的影响,科研人员在
(施加/不施加)氮肥的条件下种植拟南芥,并对其根部进行接种实验,结果如图3,其中对照组1和对照组2的接种物分别是
____________。
(4)以上获得的CrN菌并不能盲目推广应用于农业生产,试举一例说明CrN菌的盲目释放可能带来的生态安全问题
。
更新时间:2023/01/12 15:57:54 |
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(1)传统PCR技术的原理是
。
(2)在RT-PCR中每一步都有酶的参与,上图中过程1中的关键酶是
;PCR中的关键酶是
__________,该酶的作用特点是
____________________。
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(1)为扩增CBF基因,应选择图甲中的引物
,经过四次循环形成的产物中同时含有所需引物的DNA占
______。
(2)COR基因超量表达依赖于适宜的启动子。启动子有三种:各种器官中均起作用的启动子、特定器官中起作用的启动子、特定条件诱导的启动子。多种类型启动子可组合使用。从减少物质和能量消耗的角度出发,最好选择
的启动子,使马铃薯块茎在寒冷刺激下才启动COR基因的表达。转录因子CBF特异性识别下游靶基因启动子区后,可能与
______酶结合形成复合体从而激活COR基因的表达。
(3)当遇到平末端和黏性末端不能连接时,可利用限制酶Klenow酶特有的5′→3′DNA聚合酶活性,将黏性末端补平后再与平末端连接。根据图乙分析,构建抗寒基因超量表达载体时,为实现经XbaⅠ切割后的CBF基因与COR基因表达载体的连接,应选用的限制酶是
。
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(填“提高”或“减弱”),其机理是
______。
【推荐3】面对新冠疫情,我国一直坚持严格防控措施,“零容忍”彰显人民立场制度优势。坚持中高风险地区的大面积核酸检测、适龄人群接种疫苗构建免疫屏障是严格防控的主要措施。新冠病毒核酸检测常采用RT﹣PCR检测法,技术流程如下图,①②③④⑤表示相关步骤。
回答下列问题:
(1)步骤①需要的酶是
, PCR扩增目的基因需要在一定的缓冲溶液中进行,除需提供引物、目的基因作为模板外,还需提供
________________________(答两点)。
(2)DNA重组技术的步骤包括目的基因的获取、基因表达载体的构建、
、目的基因的检测与鉴定。一个基因表达载体的组成除了目的基因外,还需具备启动子、终止子、
______、标记基因等。加入标记基因的目的是
______。
(3)新冠病毒抗体检测可作为核酸检测的补充,抗体检测的原理是
。对某人进行检测时发现,其核酸检测为阴性,抗体检测呈阳性,原因可能是
________。
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