维生素C(抗坏血酸)测定试剂盒(比色法)
产品货号：
SNM196
中文名称：
维生素C(抗坏血酸)测定试剂盒(比色法)
英文名称：
Vitamin C assay kit (Colorimetric method)
产品规格：
50管/48样
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本产品仅可用于科研实验，严禁用于其他非科研用途！
本试剂盒可测血清、血浆及动植组织样本中维生素C含量。
本法用Fe3+与还原型抗坏血酸迅速作用生成Fe2+，后者再与啡罗啉显色反应，可以测定血浆中维生素C的含量。
维生素C在体内参与胶原物质合成，是脯氨酸羟化酶和赖氨酸羟化酶的辅因子，是催化多巴胺转变成去甲肾上腺素的铜酶多巴β羟化酶所必需，当维生素C缺乏时，合成的胶原得不到充分的羟化，不能很好的形成纤维。
维生素C最明显的化学活性是作为还原剂，它可以将Fe3+还原成Fe2+，促使铁在肠道吸收，促进铁的贮存和利用。
抗坏血酸作为自由基清除剂，可以很快地与O-2、H2O2反应，更快地与OH-反应生成抗坏血酸自由基，它也可以清除O-2，因此，抗坏血酸可以保护机体免受内源性氧自由基的损伤。
维生素C能与-生育酚自由基还原成维生素E，间接地起着链阻断剂作用。
维生素C是血浆中最有效的抗氧化剂，是细胞外液抗氧化防御系统的第一道防线，Vc对血浆中正在进行着的脂质过氧化作用也有阻断作用。
取样量微：本法取样本量约为150μL。
稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
再现性好：变异系数CV=1.7%。
回收试验：X =103.3%。
受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
测试面广：可测动物血清（浆）、组织等，效果均佳。
保存：4℃避光，有效期6个月。
恒温水浴箱或气浴箱（孵育温度为37℃）
台式离心机
漩涡混匀器
微量移液器
用时按照试剂一贮备液:双蒸水=1:14稀释，混匀制备。
试剂二应用液
用时1支粉剂加0.36mL的冰醋酸再加水至40mL，溶解，4℃保存。
试剂三应用液
因较难溶解，用前2～4小时加95%酒精或无水乙醇60mL充分溶解制备，4℃保存。
试剂四应用液
用时取0.15mL试剂四贮备液加水至25mL制备，现用现配。
600g/mL VC标准品应用液
将1支标准品粉剂溶于10mL试剂一应用液中，制备。
6g/mL VC标准品应用液
取600g/mL Vc标准品应用液再用试剂一应用液100倍稀释备用，现用现配。
注：维生素C标准品易氧化，因此，最好在样本上清液制备好后再配标准，并在10分钟内进行检测。
注：液体样本可直接取0.15mL加试剂一应用液处理制备上清液；组织样本必须先制作匀浆后取0.15mL匀浆液加试剂一应用液处理制备上清液。
上清液中VC的测定：
成分空白管标准管测定管试剂一应用液(mL)0.46g/mL VC标准品应用液(mL)0.4上清液(mL)0.4试剂二应用液(mL)0.50.50.5试剂三应用液(mL)111试剂四应用液(mL)0.250.250.25
充分混匀，37℃水浴30分钟。
各管中加入100μL试剂五，充分混匀，静置10分钟。
波长536nm，光径1cm（或0.5cm），双蒸水调零，处测各管吸光度值。
一、液体样本的计算
计算公式VC含量
(μg/mL)＝A测定－A空白×C标准×NA标准－A空白C标准：标准品浓度6μg/mL；
N：样本前处理稀释倍数4。
举例说明
例1．取血清0.15mL，按步骤操作，测得空白管OD值为0.031，标准管OD值为0.184，测定管OD值为0.144，则计算结果如下：
VC含量
(μg/mL)＝0.144－0.031×6×4＝17.73μg/mL0.184－0.031
二、组织的计算
计算公式组织VC含量
(μg/mgprot)＝A测定－A空白×C标准×N÷CprA标准－A空白C标准：标准品浓度6μg/mL；
N：样本前处理稀释倍数4；
Cpr：组织匀浆蛋白浓度，单位是mgprot/mL(prot指蛋白，mgprot即mg蛋白)。
计算举例
例1．取10%大鼠肝匀浆0.15mL，按步骤操作后，测得空白管OD值为0.032，标准管OD值为0.184，测定管OD值为0.146，同时测得10%大鼠匀浆蛋白浓度为8.5mgprot/mL，则计算结果如下：
大鼠肝VC含量
(μg/mgprot)＝0.146－0.032×6×4÷8.5＝2.12μg/mgprot0.184－0.032
例2．取20%轮虫匀浆0.15mL，按步骤操作后，测得空白管OD值为0.031，标准管OD值为0.186，测定管OD值为0.177，同时测得20%轮虫匀浆蛋白浓度为0.854mgprot/mL，则计算结果为：
轮虫VC含量
(μg/mgprot)＝0.177－0.031×6×4÷0.854＝26.48μg/mgprot0.186－0.031
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