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植物制片技术.ppt

花匠小妙招
2024-12-17 22:45

植物制片技术

植物显微技术绪论一、什么是植物显微技术用于观察研究植物内部精细结构的技术方法，包括制片技术、光学显微镜技术和显微摄影技术，是一门建立在生物学、化学以及物理等多门学科基础之上的综合性技术性学科。绪论二、植物显微技术的任务和目的根据材料的自然特性，观察和研究的需要，将材料制成适宜的薄片，选择合适的显微镜，显示材料正确而清晰的结构，获得反映材料真实特征的显微照片。绪论三、植物显微技术发展简史植物显微技术的诞生与早期发展，最早可追溯到列文?虎克的显微镜与发现。方法非常简陋，材料未经任何处理直接在显微镜下观察，显微镜的分辨率也比较低。绪论 ? 植物显微技术的日渐成熟固定法出现石蜡切片法的发明染色方法的使用早期显微图谱多为徒手绘制高分辨的显微镜制造使用照相技术的应用绪论 ? 植物显微技术的近代发展多种功能显微镜的使用电镜技术的发明多种切片技术的运用电镜技术绪论植物显微技术的发展热点免疫化学与显微技术的结合分子生物学向显微技术的渗透植物显微技术植物制片技术第一章概论第二章植物制片的步骤原理第三章植物制片的各类方法第四章植物组织化学的测定概论目的：为观察植物内部细微结构，将植物材料制成适合显微镜观察的薄片。概论制片分类：保存时间分：临时制片、永久制片制作方法分：活体观察切片法非切片法概论活体观察：对材料不加任何处理直接观察，达到镜检目的。概论切片法：用刀具将材料切成薄片，进行镜检。有徒手切片，石蜡切片，塑料切片等。概论非切片法：不同于上述两种制片方法，用化学药剂处理材料后进行观察。有离析法、涂抹法、整体封固法、透明法等。第二章植物制片技术原理步骤植物制片技术原理步骤制片的步骤：选材?固定?清洗?脱水?透明?浸蜡包埋?切片?粘片?脱蜡?染色?脱水?封固。先后顺序不可颠倒，环环相扣。一、选材根据研究和观察的目的确定取材的部位。原则是“准、巧、小”。一、选材植物材料的切取：根、茎类轴性器官的切取： 1、横切面：观察各种组织的横切面，及其所占比例。垂直于长轴方向切取。 2、纵切面：观察各种组织的纵切面，平行于长轴方向切取。分为：径向切面和切向切面。一、选材叶的切取：横切面。第二章植物制片技术原理步骤二、杀死、固定、保存杀死：迅速终结植物材料的生命。要求越快越好，使用渗透力强的药剂。固定：在杀死基础上，组织或细胞保持生活的状态，并在以后制片的过程中不发生变化。保存：组织或细胞保持生活的状态，能保存较长时间不发生任何变化。二、杀死、固定、保存固定的原理化学作用：凝结作用。如蛋白质变性。物理作用：沉淀作用，如油类、脂肪遇锇酸发生黑色沉淀。二、杀死、固定、保存理想固定剂具备的特点 1、快速渗入材料，杀死原生质，固定其细微结构；不因固定等人为因素发生变化。 2、增加细胞结构及内含物的折光程度，使之更为清晰，适合显微镜观察。二、杀死、固定、保存理想固定剂具备的特点 3、组织或细胞不发生收缩或膨胀 4、能增加染色或媒染能力。 5、增加组织的硬度易于切片，但不至于过于松脆。 6、具有保存作用。二、杀死、固定、保存常用固定剂 1、酒精：分子式为C2H5OH，是常用的有机溶剂，能与水以任意比互溶。是良好的固定剂，杀死速度极快。缺点：具收缩作用。 2、甲醛：分子式为HCOH，是气体。作为固定剂时，为溶于水的溶液（38%）来使用。有良好的硬化作用，也有收缩固定过度，渗透慢的缺点。二、杀死、固定、保存常用固定剂 3、冰醋酸：分子式为CH3COOH，是具有强烈刺激性气味的无色液体。特点是渗透力强，可防腐，保存蛋白质和染色体，但溶解脂肪，有膨胀作用。 4、铬酸：分子式为H2CrO4，是CrO3的水化物，为红棕色晶体，强氧化剂。可沉淀蛋白、核酸。有收缩、渗透慢、硬化的缺点。二、杀死、固定、保存常用固定剂 5、苦味酸：淡黄色晶体，分子式为C6H2（NO2）3OH，强烈的爆炸物，以过饱和水溶液保存。具有渗透力强，沉淀蛋白、核酸，防硬化，增染色的特性，是优良的固定剂。 6、锇酸：分子式为OsO4，是灰黄色的晶体。最好的固定剂，脂类的唯一固定