金钗石斛花花色苷和精油的纯化、产物分析及其活性研究
金钗石斛花花色苷和精油的纯化、产物分析及其活性研究
【摘要】： 金钗石斛(Dendrobium nobile Lindl.)又名扁金钗,是兰科石斛属植物,被称为“救命仙草”。金钗石斛花花形俏丽、色泽鲜艳,具备一定的食用价值。本课题以贵州赤水金钗石斛花为原料,研究了花色苷及精油的提取、组分分析、抗氧化和抑菌活性等。首先采用溶剂提取法和超声波辅助提取法进行金钗石斛花花色苷的提取,通过正交试验和响应面试验优化提取工艺。结果表明,溶剂提取的最优条件:70%酸性乙醇溶液为提取剂,提取温度60℃,料液比1:100,pH值1.0;超声辅助提取的最优条件为:提取时间50.31 min,提取温度60.80℃,功率221.86 W。超声波辅助提取花色苷得率达到3.85 mg/g,优于溶剂提取法。其次,采用大孔树脂吸附法对金钗石斛花花色苷进行分离纯化。通过静态吸附筛选大孔树脂,动态吸附/解吸优化分离条件,得到优化条件为:分离树脂为AB-8,上样流速为2 BV/h,上样浓度为125μg/mL,解吸流速为2 BV/h。在此分离条件下色价增加7.76倍。再次,对纯化的花色苷进行红外光谱扫描和HPLC-MS/MS分析,以及对金钗石斛花精油进行了GC-MS分析。结果共鉴定出13种花色苷类化合物,其中主要成分为矢车菊素类;共鉴定出69种挥发性成分,其中SPME-GC/MS分析出63种化合物,占总组分的80.49%;SD法分析出24种化合物,占总组分的54.92%。SPME法提取的精油成分含量较高的有柠檬烯(25.87%)、四氢柠檬醛(11.10%)、松油烯(8.70%)、2-呋喃甲醛(6.51%)、甲酸己酯(2.12%)等;SD法提取的精油成分含量较高的有亚油酸(36.92%)、庚烷(7.69%)、肉豆蔻酸(3.51%)、亚油酸甲酯(2.12%)等。最后研究了花色苷的稳定性以及花色苷和精油的体外抗氧化活性和抑菌活性。稳定性研究结果表明该花色苷对提取剂的酸碱性十分敏感,在酸性范围内,颜色随着pH的增加由红色变成紫红色再慢慢变浅,当pH=2时花色苷性质稳定且浓度最大;当pH值继续增大到碱性条件时,颜色逐渐变成蓝色;此外,苯甲酸钠溶液、某些金属离子如Cu~(2+)、Na~+对金钗石斛花色素稳定性影响较小,但蔗糖溶液、抗坏血酸溶液、Fe2+、Fe3+等对其影响较大。抗氧化能力显示:花色苷、精油和Trolox对DPPH自由基清除率为50%时的浓度EC50分别为159.92μg/mL、868.42μg/m L和33.17μg/m L,对ABTS+自由基的EC50分别为524.84μg/mL、374.92μg/mL和33.55μg/mL。花色苷的抑菌作用大小依次为:枯草芽孢杆菌>金黄色葡萄球菌>大肠杆菌;精油的抑菌作用大小依次为:大肠杆菌>金黄色葡萄球菌>枯草芽孢杆菌。
【学位授予单位】：江南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
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