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草莓耐寒性状分子标记分析

花匠小妙招
2024-12-31 06:23

摘要 Y2753962 草莓(Fragaria ananassa Duch.)属蔷薇科草莓属,是我国普遍栽培的兼具高营养价值和经济价值的水果。在实际栽培中,特别是北方严寒季节,设施结构一般相对简单,低温是影响草莓产量和品质的主要因素之一。本试验以合肥地区主栽草莓10个品种的叶片为试材,进行0℃,.2℃,.40C,.6℃,.8℃,5个温度梯度的低温处理, 计算出10个草莓材料的半致死温度(LTs0),然后与冷害指数作相关分析,确定各个草莓品种耐寒能力的强弱;运用单因素试验设计方法,对影响草莓SRAP反应体系的 M92+、dNTPs、Taq DNA聚合酶、引物浓度以及模板DNA浓度和退火温度等因素进行优化,;从110对引物中筛选出55对多态性好、条带清晰稳定的引物对,对其进行统计分析、构建聚类树型图,对与草莓耐寒相关的 SRAP标记作初步研究,为草莓选育耐寒品种奠定基础。本试验获得的主要结果如下: (1)不同低温胁迫下,各个草莓品种的电解质渗透率均随着温度降低而增大,处理温度与电解质渗透率之间呈负相关。依据半致死温度的大小对10个草莓品种的耐寒性进行排序,得出:“丰香”>“红颜”>“雪妹”>“二码沃”>“佐贺清香”>“宁丰”>“法兰地”>“枥乙女”>“京承香”>“章姬”,且各个品种的半致死温度依次为:-℃、-℃、--℃、.℃、.℃、.。C、.℃、.℃、.℃、.℃。(2)冷害指数统计得出,10个品种的冷害指数在50%~90%之间,与半致死温度作相关分析,,达显著水平。(3)用改良的CTAB法成功提取了高质量的革莓基因组DNA,其OD260/·,琼脂糖电泳检测结果也表明提取的DNA纯度较好,无明显蛋白质等污染。(4)对草莓SRAP-PCR反应体系进行优化,: 20m的反应体系中含1 0xPCR buffer29l, M92+,dNTPs ,,Taq ,模板DNA为100ng。(5)从110对SRAP引物筛选出条带丰富清晰、多态性较好的引物对共55对, 占总引物对的50%。共扩增出311条多态性条带,%。多态性信息含量(PIC值)~,。聚类分析结果显示, 10个草莓品种可分为3个大类,其中耐寒性最弱的“章姬”单独聚成一类,而耐寒性较强的“丰香”、“雪妹”等聚在第三大类的第一亚类中,说明运用SRAP分子标记可以对草莓耐寒性研究提供一定的参考作用。关键词:草莓,耐寒性,SRAP,体系优化,聚类分析万方数据 Abstract Strawberry(Fragaria ananassa Duch.),belongs to Rosaceae Fragaria,is widely cultivatedwithhigh nutritionalandeconomic value in our temperature one ofthemain factorsaffecting theyield and quality ofstrawberry inactualcultivation. especially thecold season and paratively simple this experiment,1 0Hefejlocal cultivarsofstrawberry leaves were chosed as treatedwith 5temperature gradient stress,O'C,-2"C,一4"C,-6"C,-8"C respectively, calculating the ten strawberry material LTs0,then made analysis ofcorrelation with the chillinginjury index,initially identifiedthecold—resistenceability ofstrawberry varieties. Afterthat,single factorexperiment design methods were adoted,M92+,dNTPs,Taq DNA polymerase,primer concentration,template DNA concen

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