一种培育不结球白菜小孢子植株的方法技术
本发明专利技术公开了一种培育不结球白菜小孢子植株的方法。该方法包括如下步骤：(1)花蕾的选取；(2)培育小孢子胚胎：将花蕾消毒，清洗，1/2NLN‑13培养基润洗；将润洗后的花蕾加入1/2NLN‑13培养基，充分研磨，过滤，离心，黄绿色沉淀用NLN‑13培养基稀释，用甲基磺酸乙酯处理后分装到培养皿中，向培养皿中加入活性炭，使其浓度为1mg/mL，热激处理，然后暗培养14天形成胚状体；(3)成熟胚萌发成植株：将胚状体振荡培养，将其中转绿的成熟胚转移到改良固体1/2MS培养基中培育40d，直接进行炼苗移栽。本发明专利技术所述方法在能够保证出胚率的情况下，简化操作步骤，大大减少了操作时间，提高了植株生产效率。
A method of cultivating microspore plants of non heading Chinese Cabbage
The invention discloses a method for cultivating microspore plants of non heading Chinese cabbage. The method includes the following steps: (1) selection of flower bud; (2) cultivation of microspore embryo: disinfection and cleaning of flower bud, moistening with 1 / 2nln u2011 13 medium; adding moistening flower bud to 1 / 2nln u2011 13 medium, fully grinding, filtering, centrifuging, yellow green precipitation, dilution with NLN u2011 13 medium, treatment with ethyl methanesulphonate, sub loading into culture dish, adding active carbon to culture dish, The concentration was 1mg / ml, heat shock treatment, and then dark culture for 14 days to form embryoids; (3) mature embryos germinated into plants: the embryoids were vibrated and cultured, and the green mature embryos were transferred to the improved solid 1 / 2ms medium for 40 days, and the seedlings were directly cultured and transplanted. The method simplifies the operation steps, greatly reduces the operation time and improves the plant production efficiency under the condition that the embryo rate can be guaranteed.
【技术实现步骤摘要】
一种培育不结球白菜小孢子植株的方法
本专利技术属于植物组织培养
，具体涉及一种培育不结球白菜小孢子植株的方法。技术背景小白菜主要是异花授粉植物，在传统育种工作中，需要得到纯化亲本只能通过常规自交，由于自交衰退，纯合亲本的选育就是一个非常困难的问题，并且用时长，耗费人力以及财力，育种效率很低。小孢子培养技术是利用细胞全能性，将单个细胞培养成纯合植株的过程，能够有效的缩短育种年限，很短的时间内就可获得大量的纯合植株，大大的提高了育种效率。lichter1982年首次在甘蓝型油菜上发现，利用小孢子培养技术可以获得胚状体，从此芸薹属蔬菜小孢子培养方面不断取得新的进展，目前在芸薹属青花菜、大白菜、甘蓝、不结球白菜等品种上都取得了成功。在我国，这项技术相对起步比较迟，主要是在借鉴国外的知识上，迅猛发展起来的，1993年曹鸣庆首次成功利用游离小孢子培养技术培育出了胚状体，后来这项技术在我国快速发展，在芸薹属的许多品种中都取得了突破性的进展，并且在芸薹属的青花菜、芥蓝、花椰菜中获得了小孢子再生植株。但目前该技术较为繁琐，出胚率低，且污染问题较为严重。
技术实现思路
本专利技术主要是针对目前该技术的繁琐，出胚率低以及污染等问题进行改进，从而提供了一种高效简易的培育不结球白菜小孢子植株的方法。本专利技术采取的技术方案：一种培育不结球白菜小孢子植株的方法，具体包括如下步骤：(1)花蕾的选取：选取花瓣与花药长度比为1:1的花蕾；(2)培育小孢子胚胎：将步骤(1)采集的花蕾用次氯酸钠溶液消...
【技术保护点】
1.一种培育不结球白菜小孢子植株的方法，其特征在于具体包括如下步骤/n(1)花蕾的选取：选取花瓣与花药长度比为1:1的花蕾；/n(2)培育小孢子胚胎：将步骤(1)采集的花蕾用次氯酸钠溶液消毒20分钟，灭菌水清洗，1/2NLN-13培养基润洗；将润洗后的花蕾加入1/2NLN-13培养基，充分研磨，过滤，离心，黄绿色沉淀用NLN-13培养基稀释，用甲基磺酸乙酯处理后分装到培养皿中，向培养皿中加入活性炭，使其浓度为1mg/mL，在32～33℃条件才进行热激处理20～24小时，然后24-26℃暗培养12～14天，形成胚状体；/n(3)成熟胚萌发成植株：将胚状体在弱光、25℃条件下进行振荡培养，将其中转绿的成熟胚转移到改良固体1/2MS培养基中培育40-70d，直接进行炼苗移栽。/n
【技术特征摘要】
1.一种培育不结球白菜小孢子植株的方法，其特征在于具体包括如下步骤
(1)花蕾的选取：选取花瓣与花药长度比为1:1的花蕾；
(2)培育小孢子胚胎：将步骤(1)采集的花蕾用次氯酸钠溶液消毒20分钟，灭菌水清洗，1/2NLN-13培养基润洗；将润洗后的花蕾加入1/2NLN-13培养基，充分研磨，过滤，离心，黄绿色沉淀用NLN-13培养基稀释，用甲基磺酸乙酯处理后分装到培养皿中，向培养皿中加入活性炭，使其浓度为1mg/mL，在32～33℃条件才进行热激处理20～24小时，然后24-26℃暗培养12～14天，形成胚状体；
(3)成熟胚萌发成植株：将胚状体在弱光、25℃条件下进行振荡培养，将其中转绿的成熟胚转移到改良固体1/2MS培养基中培育40-70d，直接进行炼苗移栽。
2.根据权利要求1所述的培育不结球白菜小孢子植株的方法，其特征在于步骤(1)中选取花瓣与花药长度比为1:1的花蕾；选取花蕾的时间为早晨9点到11点。
3.根据权利要求1所述的培育不结球白菜小孢子植株的方法，其特征在于步骤(2)选用次氯酸钠溶液质量浓度为1％。
4.根据权利要求1所述的培育不结球白菜小孢子植株的方法，其...
【专利技术属性】
技术研发人员：李英，汪家礼，侯喜林，王建军，刘同坤，张昌伟，
申请(专利权)人：南京农业大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32
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