用于检测啤酒花（啤酒花）中柑橘树皮裂裂类病毒 (CBCVd)、啤酒花潜伏类病毒 (HLVd) 和啤酒花矮化类病毒 (HSVd) 的单重和多重 RT
植物病害造成的直接作物损失及其控制措施对农业和经济产生重大影响。从多样化的小规模生产向大规模基因统一单一栽培生产的转变，加上农业集约化和气候变化，导致人造农业生态系统中出现了几种已知的流行病，这些流行病变得更容易受到病原体的侵害。其中一个例子是啤酒花种植，它受到高度侵略性的啤酒花类病毒的威胁。自2007年以来，斯洛文尼亚近三分之一（约500公顷）的啤酒花园受到柑橘树皮裂裂类病毒（CBCVd）引起的严重啤酒花矮化病的影响，尽管采取了严格的预防措施，但这种病仍在继续蔓延。我们开发并验证了多重 RT-qPCR (mRT-qPCR)，用于灵敏检测 CBCVd、啤酒花潜伏类病毒 (HLVd) 和啤酒花矮化类病毒 (HSVd)。单独设计单重 RT-qPCR 检测，然后将其组合到一步式 mRT-qPCR 检测中。还开发了啤酒花特异性 mRNA170 和 mRNA1192 内部对照来检测可能的 PCR 抑制。对来自不同宿主、地理区域和类病毒组合的 35 个样本进行了分析特异性测试。方法验证表明，mRT-qPCR 的灵敏度低于单重 RT-qPCR，但特异性、选择性、重复性和重现性保持不变。新开发的检测方法稳健、可靠，适合大规模筛选啤酒花类病毒。
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