苹果和啤酒花类病毒的检测
苹果和啤酒花类病毒的检测
【摘要】： 类病毒是一类能够侵染高等植物的单链闭合环状,无编码功能的RNA分子。目前发现的类病毒有30多种,分别侵染多种经济作物并引发严重的病害,从而给相关经济作物造成严重的经济影响。提高植物繁殖材料的质量,检测去除含有类病毒的不合格繁殖材料,是目前防控的主要办法。因此需要发展一种快速高效的类病毒检测方法,明确侵染作物的主要类病毒种类是保证繁殖材料质量关键。本研究分别对苹果和啤酒花中类病毒进行检测,并发展建立了适合这两种作物中类病毒的检测方法。以采自北京市凤凰岭有花脸症状的富十苹果样品为实验材料,利用二维电泳技术确定该样品中存在类病毒。利用斑点杂交技术验证了苹果花脸症的病原物为苹果锈果类病毒(ASSVd),并比较了树叶、树皮及果皮中ASSVd的含量,研究结果表明：树皮中ASSVd含量最高,果皮次之。对斑点杂交、Northern杂交以及正反向电泳三种检测技术的灵敏度进行比较,结果表明：斑点杂交灵敏度最高,Northern杂交次之。经RT-PCR.克隆测序获得ASSVd北京分离物的序列信息。ASSVd北京分离物含330个核苷酸,与GenBank中已发表的序列比较,同源性为84.59%-93.96%,碱基变异率相对较低,序列高度保守。以采自新疆的175个啤酒花样品为材料,建立一种多重PCR技术,同时检测啤酒花矮化类病毒(HSVd)、啤酒花潜隐类病毒(HLVd)(?)口苹果皱果类病毒(AFCVd)三种类病毒在新疆啤酒花中的发病情况。研究结果表明,所有样品均携带有HLVd,均不带有AFCVd,另外HSVd的发病率为22.86%。此外,11个品种中有6个没有感染HSVd,故可以考虑选用上述6种不携带HSVd的啤酒花作为繁殖材料。
【学位授予单位】：大连理工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
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