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茎尖培养与微体快繁(总结)

花匠小妙招
2025-01-04 07:19

茎尖培养与微体快繁意义:解决快繁和脱毒微体繁殖的技术与方法(微体繁殖一般分为四个步骤):I—无菌培养的建立II—繁殖体的增殖(兼热处理)III—芽苗的生根IV—小植株的驯化移栽Date1一、茎尖培养程序茎尖培养的含义比较广泛,包括小的仅仅10-100um的茎尖分生组织,大的几十毫米的茎尖或更大的芽的培养。一般来说,材料体积小或不带叶原基的培养较困难,成苗所需要的时间长,而培养材料体积大的容易培养成功。茎尖培养在园艺植物离体培养中是最常采用的材料之一,它在园艺植物的无性系快速繁殖、无毒苗的培养,品种改良和基础理论研究都有着重要的意义。Date2(一)建立无菌材料按照离体培养的基本操作方法,对外植体的选择原则,严格挑选茎尖培养材料,从健康植株上选取健壮的枝梢,除去叶片,用自来水冲洗污物,再进行消毒处理。常用消毒剂:消毒剂既要有良好的消毒效果,又要易被无菌水冲洗掉或能够自行分解的物质,而且不会损伤材料,影响生长。Date3消毒剂使用原则防止伤害材料,经常采用少量多次,或多种药剂交替使用。Date4几种常用的灭菌方法:茎尖、茎段及叶片等的消毒:流水冲洗—去污粉洗涤—酒精消毒—无菌水冲洗—升汞灭菌—无菌水冲洗果实及种子的消毒:流水冲洗—酒精消毒—无菌水冲洗—升汞灭菌—无菌水冲洗Date5花药消毒:酒精消毒—无菌水冲洗—漂白粉浸泡—无菌水冲洗根及地下部器官的消毒:流水冲洗—去污粉洗涤—去除损伤部位—吸干水分—纯酒精漂洗—无菌水冲洗—升汞灭菌—无菌水冲洗Date6顶端分生组织是指茎的最幼龄叶原基上方的部分,最大直径约为100μm,最大长度约为250μm。茎尖是指顶端分生组织及其下方的1-3个幼叶原基。通过顶端分生组织培养消除病毒的几率高,但多数无毒植株都是通过培养茎尖外植体(250-1000μm)得到的。Date7茎尖区域应是无菌的,但一般在切取外植体之前需对茎芽进行表面消毒。叶片包被紧实的芽(如菊花、菠萝、姜和兰花等)只需在75%酒精中浸蘸一下即可。%次氯酸钠溶液表面消毒10min。Date8材料的接种接种外植体大小,根据不同植物材料及培养目的而异,可以切取整个芽或带茎段接种,-。。Date9茎尖培养脱毒病毒分布并不均匀,病毒的数量随植株的年龄与部位而异,越靠近茎顶端区域的病毒的浓度也越低,分生区域内无维管束,病毒只能通过胞间连丝传递,赶不上细胞的不断分裂和活跃的生长速度,所以生长点含有的病毒数量极其微少,因此剪切的茎尖愈小愈佳,但太小时不易成活,过大则不能保证完全除去病毒,不同种类植物和不同种类病毒在茎尖培养时切取的茎尖大小也不相同。Date10

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