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茎尖培养的脱毒技术.ppt

花匠小妙招
2024-11-30 10:58

茎尖培养的脱毒技术

* 植物脱毒技术一、茎尖培养脱毒 2．茎尖大小与脱毒效果用于脱毒的茎尖外植体可以是顶端分生组织即生长点，最大直径0.lmm；通常是带1～3个叶原基的茎尖（约0.3～0.5mm）。茎尖外植体的大小与脱毒效果成反比。但不带叶原基的过小，外植体离体培养存活困难，生长缓慢，操作难度大。茎尖分生组织不能合成自身需要的生长素，而分生组织以下的1～3个幼叶原基可合成并供给分生组织生长素、细胞分裂素。因而带叶原基的茎尖生长快，成苗率高。但茎尖外植体过大，脱毒效果差。植物脱毒技术一、茎尖培养脱毒植物脱毒技术一、茎尖培养脱毒 1．取样：用于脱毒的植株应是患病群体中病害相对较轻的植株。可直接从选定的植株上取梢段进行消毒接种。也可从室内培养1～2月并进行热处理的盆栽扦插苗上，采顶芽与侧芽消毒接种。 2．消毒：剪取梢段（也可用侧芽）3～5cm，剥去大叶片，用自来水冲洗干净，在75％酒精中浸泡 30s左右，用1％～ 3％次氯酸钠或 5％～7％的漂白粉溶液消毒10～20min（或用 0.1％HgCl2消毒数分钟），最后用无菌水冲洗材料 4～5次。（二）茎尖脱毒的方法植物脱毒技术一、茎尖培养脱毒 3．剥取茎尖与接种在超净工作台上，将已消毒的芽放在垫有无菌滤纸的培养皿中（已灭菌）。在双筒解剖镜下，用解剖针或镊子将材料固定于视野中，用解剖刀尖仔细剥去幼叶，至出现裸露的生长点。用刀尖切下带1～2个叶原基的生长点（约0.3～0.5mm)。用解剖针或解剖刀尖将切下的茎尖转至培养基上（顶部向上)，每管接1～2个茎尖。为防止茎尖失水，可用无菌水润湿滤纸。操作中注意随时更换滤纸和接种工具，剥取茎尖时切勿损伤生长点。植物脱毒技术一、茎尖培养脱毒 5．生根诱导一些植物茎尖培养形成绿芽后，基部很快发生不定根。而另一些植物不产生不定根，必须将无根绿苗再诱导才能生根成为完整植株。诱导生根的方法是将2～3cm高的无根苗转入生根培养基，继续培养1～2个月即可形成根。一些植物茎尖离体培养极难生根，即使转入生根培养基诱导也难奏效（如桃、苹果），这类植物的无病毒绿芽可通过微体嫁接法获得完整植株。如果取茎尖脱毒试管苗的茎尖（可大于第一次切取的茎尖），再培养，即二次茎尖培养脱毒率可达 100％。植物脱毒技术一、茎尖培养脱毒茎尖分生组织剥离植物脱毒技术一、茎尖培养脱毒 4．培养接种后材料置 25?2℃，光照度 1500～5000lx，每日光照10～16h条件下培养。温度对茎尖培养的影响不及光照。不同植物茎尖培养适宜的光强与光照时间不同，但一般光照培养比暗培养效果好。培养两个月左右，大的茎尖再生出绿芽，小的（0.1～0.5mm）茎尖则需3个月以上，有的甚至更长时间才发生绿芽。其间应更换新鲜培养基。提高培养基中BA的浓度，可形成大量丛生芽。植物脱毒技术一、茎尖培养脱毒 * *