概述:土壤微生物数量测定方法生物学是一种研究土壤微生物组成及其功能的科学方法。本文介绍了土壤微生物的种类、分布、结构以及利用不同类型的实验材料进行定量检测的方法。本报告旨在帮助科研人员了解土壤微生物的特性,从而更好地开发和应用土壤微生物相关的科学技术。
分布:温暖,潮湿和富含有机质的地方(3)构造:主要是单细胞的原核生物, 分布:温暖,潮湿和富含有机质的地方(3)构造:主要是单细胞的原核生物,有球形,杆形,螺旋形根本构造: 稀醋酸溶液中,保存于棕色瓶中。2.纳氏试剂甲液:将20.0g碘化汞和10.0g碘化钾溶于100ml蒸 〔Martin〕-孟加拉红琼脂培养基〕葡萄糖MgSO4.7H2O0.5g蛋白胨孟加拉红KHPO1g1 ,滴管将一定体积的菌液移至平板培养基上,然后进展培养.其目的是进展菌落形态观察,别离纯化菌种,活菌计 2 3 K HPO 0.5g 4 2 4 2 word.zl- 土壤微生物的别离-鉴定及数量测定 (一) 培养基的制备 Ⅰ测定微生物总量培养基: 1. 细菌培养基 〔牛肉膏蛋白胨琼脂培养基〕 牛肉膏 Beefextract5.0g 蛋白胨 Peptone10.0g NaCI5.0g 蒸馏水 H 01000m1 琼脂 15~ 20g PH7.2~7.4 制备步骤: ⑴ 在 100 mL 小烧杯中称取牛肉膏 5.0g,蛋白胨 10.0g,加 50 mL 蒸馏水,置电炉搅拌加热至牛肉膏,蛋白胨 完全溶解. ⑵ 向小铝锅中参加 500 mL 蒸馏水,将溶解的牛肉膏, 蛋白胨倒入铝锅中并用自来水洗 2~ 3 次.参加 5.0gNaC1, 在电炉上边加热边搅拌. ⑶ 参加洗净的琼脂条,继续搅拌,加热至琼脂完全熔化,补足水量至 1000 mL. ⑷用 NaOH 或 HC1 调至 pH7.0. 用酸度计或用玻棒沾少许液体用精细 pH 试纸测定其 pH 值,并用 10%NaOH 调至所需 pH 值, 必要时用滤纸或脱脂棉过滤。 一般比要求的 pH 高出 0.2,因为高压蒸汽灭菌后, pH 常降低。 ⑸根据不同需要,可将配好的培养基分装入配有棉塞的试管或三角瓶内。注意分装时防止培养基挂在瓶口或 管口上引起杂菌污染。如液体培养基, 应装试管高度的 1/4 左右;固体培养基装试管高度的 1/5 左右; 装入三 角瓶的量以三角瓶容量的一半为限。,塞好棉塞,装入小铁丝筐,然后用旧报纸将棉塞局部包好 . 标签说明培 养基的名称、配制日期等。 ⑹ 高压蒸汽灭菌,用 0.1Mpa〔15lb/in2 〕121℃灭菌〔 15-20〕 30min. 2.放线菌培养基〔改进高氏 1 号琼脂培养基〕 可溶性淀粉 20g KNO 1g 2 4 MgSO 7HO 0.5g NaCl 0.5g 原 0.05g FeSO 7HO 0.01g pH 7.2-7.4 制备步骤: D为稀释倍数;W为土壤烘干质量〔g〕。--背景知识:微生物(microorganism简称micro和电子显微镜才能看清楚的生物,统称为微生物。〔但有些微生物是可以看见的,像属于真菌的蘑菇、灵芝等。〕mL无菌水并放有小玻璃珠的 D为稀释倍数;W为土壤烘干质量〔g〕。--背景知识:微生物(microorganism简称micro 和电子显微镜才能看清楚的生物,统称为微生物。〔但有些微生物是可以看见的,像属于真菌的蘑菇、灵芝等。〕 mL无菌水并放有小玻璃珠的250mL三角瓶中,用手或置摇床上振荡20min,使微生物细胞分散,静置2 格利斯亚硝酸试剂,观察颜色变化,确定正负反响。⑷好气性自生固氮菌:观察试管培养液外表与滤纸接触处有无 2 4 2 4 2 4 NaH PO 0.25g 4 2 MgSO ·7H O0.03g 2 4 ( 1) 计算 根据配方计算各种药品所需要的量,然后再分别称量。 (2) 称量 准确称量各种成分。 (3) 溶化 配制时, 先用少量冷水将淀粉调成糊状,倒入少许沸水中, 在火上加热,边搅拌边依次逐一溶 化其他成分,溶化后,补足水分到 1000ml,调 PH 〔可不调〕。 (4) 分装、包扎、灭菌。 注:各成分按配方顺序依次溶解,对于微量成分,可预先配成高浓度的溶液,方便配置时量的控制。配制时,先用少量冷水, 将淀粉调成糊状,倒入少于所需水量的沸水中,在火上加热,边搅拌边依次逐一溶化其他成分,溶化后,补足水分到 1000ml, 调 pH。 另:倒平板之前,在溶化的培养基中加重铬酸钾溶液,每 300mL 培养基加 3%重铬酸钾 1mL(l00ppm)。 3. 真菌培养基〔马丁〔 Martin〕-孟加拉红琼脂培养基〕 葡萄糖 MgSO4.7H2O0.5g 蛋白胨 孟加拉红 K HPO 1g 10.0g 5.0g 33.4mg 〔或者每升加 1%溶液 3.3mL〕 蒸馏水 H 01000m1 PH
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