湿地植物内生细菌资源挖掘及其功能研究.pdf
1、博士学位论文学校代码：10357密级：保密期限：湿地植物内生细菌资源挖掘及其功能研究Explorationandfunctionalanalysisofendophyticbacterialresourceinwetlandplants学号X12101003姓名一级学科二级学科郜庭生态学生态学指导教师石先阳(教授)完成时间2018年5月摘要摘要湿地是水陆相互作用形成的独特生态系统，湿地植物与微生物联合净化水质可有效改善区域生态环境质量。
2、湿地植物内生细菌可促进宿主植物生长及对环境的适应性，对维持湿地生态系统的平衡发挥着重要作用。本文以湿地植物芦苇(Phragmitesaustralis)和狭叶香蒲(TyphaangustifoliaL)为研究对象，通过植物细胞工程技术构建其再生体系，应用高通量测序技术分析其根与种子内生及根际环境中细菌群落结构，采用活性污泥孵育芦苇再生苗的手段富集并挖掘功能内生细菌，基于功能内生细菌与植物离体组织共培育的策略改良湿地植物，主要研究内容与结
3、果如下：(1)以种子为外植体，通过体细胞胚发生途径构建芦苇再生体系、器官发生途径构建狭叶香蒲再生体系。增殖的芦苇胚性培养物表现出极强分化潜力，被选为人工种子的繁殖体。胚性培养物能快速再生成大小均一、无污染的植株，为可控条件下内生细菌的定殖研究提供了理想的实验材料。(2)芦苇与狭叶香蒲根际细菌、根部内生细菌和种子内生细菌群落组成存在明显的差异。其种子内生细菌为一个独特的细菌类群，而非根际细菌或根部内生细菌的一个子集。芦苇与狭叶香蒲种子内生
4、细菌群落主要包括7个菌门：变形菌门、拟杆菌门、浮霉菌门、绿弯菌门、热袍菌门、柔壁菌门和螺旋体门；主要菌属包括脱硫杆状菌属、地杆菌属、硫杆菌属、氧化硫单胞菌属、甲基营养菌属和脱氯单胞菌属等。(3)利用活性污泥侵染芦苇再生苗的手段富集内生细菌，通过变性梯度凝胶电泳技术证实了有丰富的内生细菌成功定殖于再生苗根部。从再生苗根部分离出新鞘氨醇单胞菌RE31、吐蕃根瘤菌RE3—2、弗赖森草螺菌RE33、长野雷夫松氏菌RE34、束红球菌RE3—5、沃
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