山楂为蔷薇科落叶灌木或小乔木,全国各地均有栽培,为药食同源植物。山楂果中含有黄酮类、熊果酸、皂苷、糖类、有机酸类、色素等多种活性成分。这些化合物在心血管的治疗与保健方面以及抗氧化等方面越来越受到人们的关注。果蝇是较为普遍的研究抗衰老模型之一,可用于研究衰老对基因的影响与作用。已有研究证明,果蝇的衰老基因与人类的衰老基因高度相似。目前,果蝇已被广泛应用于国内外的抗衰老研究实验中,但是应用于山楂的抗衰老研究鲜见报道。本文以山楂醇提物为原料,以果蝇为动物模型,对山楂的抗衰老作用进行评价,探索研究山楂醇提物的体内抗氧化性。旨在进一步研究探索山楂的体内抗氧化、抗衰老作用,为山楂抗衰老作用的研究与开发提供理论依据。第一,检测山楂提取物中抗氧化物质的种类与含量。以芦丁为标准品,通过紫外分光光度法,测得总黄酮含量为58.60%:经高效液相色谱法,测得原花青素B2、表儿茶素、金丝桃苷三种物质的含量分别为12.72%、7.34%、3.31%。第二,进行体内抗氧化活性的研究。建立正常果蝇模型,分别饲喂不同剂量的山楂醇提物。各组相比较,饲喂山楂醇提物的果蝇较空白组寿命延长;总SOD、 CuZn-SOD、CAT酶活力均显著提高(P<0.01),且在一定范围内随剂量增大活力增强,超出此范围,上述作用降低;在一定浓度范围内MDA含量降低,各组之间呈现量效关系,浓度超过此范围,作用减弱;不同剂量组之间也呈现差异性显著。建立高脂模型。饲喂不同剂量的山楂醇提物,随剂量的增大寿命延长;总SOD、 CuZn-SOD、CAT酶活力均显著提高(P<0.01),且在一定范围内随剂量增大活力增强,超出此范围,作用降低;在一定浓度范围内MDA含量降低,各组之间呈现量效关系,浓度超过此范围,作用减弱;不同剂量组之间也呈现差异性显著。建立急性致死模型。分别用双氧水、Paraquat作用于已饲喂不同剂量山楂醇提物的果蝇,诱导其体内的羟自由基与超氧阴离子氧化,经寿命实验验证,高剂量组的果蝇寿命高于低剂量组。经上述实验证明,山楂提取物具有较强的体内抗氧化性,可开发抗衰老类保健食品。
摘要 4-5
ABSTRACT 5-7
目录 7-10
1 前言 10-22
1.1 山楂概述 10-14
1.1.1 山楂的主要成分 10-11
1.1.2 山楂的营养作用以及药理活性 11-14
1.1.3 山楂产品的开发以及应用 14
1.2 果蝇的基本情况 14-17
1.2.1 果蝇研究历史及其贡献 15
1.2.2 果蝇模型的特点 15-16
1.2.3 果蝇模型的应用 16
1.2.4 果蝇模型的最新研究进展 16-17
1.2.5 果蝇模型的发展 17
1.3 氧化与抗氧化 17-20
1.3.1 抗氧化的作用类型 18-20
1.3.3 自由基的清除 20
1.4 本课题的研究意义与主要内容 20-22
1.4.1 研究意义 20-21
1.4.2 本课题的主要内容 21-22
2 材料与方法 22-30
2.1 实验材料 22
2.2 实验模型 22
2.3 主要实验仪器设备 22-23
2.4 主要实验试剂 23
2.5 实验方法 23-30
2.5.1 山楂醇提物主要成分的检测 23-26
2.5.2 山楂醇提物的体内抗氧化活性研究 26-30
3 结果与讨论 30-54
3.1 山楂醇提物中主要功效成分的检测 30-33
3.1.1 总黄酮含量的检测 30
3.1.2 原花青素B2、表儿茶素、金丝桃苷含量的检测 30-33
3.2 山楂醇提物体内抗氧化活性的研究 33-54
3.2.1 对正常组果蝇体内抗氧化系统的影响 33-40
3.2.2 对高脂组果蝇体内抗氧化系统的影响 40-47
3.2.3 山楂醇提物对急性组果蝇体内抗氧化系统的影响 47-54
4 结论 54-56
4.1 山楂醇提物中主要功效成分的检测 54
4.2 山楂醇提物体内抗氧化活性的研究 54-56
4.2.1 山楂醇提物对正常组果蝇的体内抗氧化活性的研究 54
4.2.2 山楂醇提物对高脂组果蝇的体内抗氧化活性的研究 54
4.2.3 山楂醇提物对急性试验中果蝇的体内抗氧化活性的研究 54-56
5 展望 56-57
6 参考文献 57-61
7 攻读硕士学位期间论文发表情况 61-62
8 致谢 62
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