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天然化合物中有机阴离子转运体1和3强效抑制剂的筛选及其对马兜铃酸肾毒性的保护作用

花匠小妙招
2025-05-12 19:06

　　有机阴离子转运蛋白1和3(OAT1和OAT3)是肾脏中主要的有机阴离子转运蛋白,对多种阴离子及其代谢物的转运和清除起着至关重要的作用。马兜铃酸(AAs)能够引起严重的马兜铃酸肾病(AAN),已被证明是OAT1和OAT3的底物。研究表明,OAT抑制剂丙磺舒可通过抑制肾脏中AAI-DNA加合物的积累来预防AAN。因此,OAT1和OAT3的抑制剂可有效预防AAN的发病进程,保护AAs导致的肾损伤。此外,OAT1和OAT3还被证明是药物—药物相互作用(DDIs)的重要靶点。迄今为止,许多研究都集中在了对当前临床药物与OAT1和OAT3的相互作用的研究上,而对天然产物与OAT1和OAT3之间的相互作用还知之甚少。目的:本研究旨在从天然化合物库(270种天然化合物)中筛选OAT1和OAT3的抑制剂,探究抑制剂与OAT1和OAT3的相互作用,并评估其对AAN的保护作用。方法:通过荧光高通量筛选和细胞摄取实验筛选OAT1和OAT3的抑制剂,对6-CF摄取抑制率大于70%的化合物,通过浓度梯度抑制实验确定其半数抑制浓度(IC50)和抑制方式。通过SWISS-MODEL对OAT1和OAT3进行同源建模,并通过分子对接研究抑制剂与OAT1和OAT3之间的相互作用。作为OAT强抑制剂,蟛蜞菊内酯和汉黄芩素分别被用于研究它们对AAI在大鼠体内药代动力学的影响以及对AAN小鼠肾损伤的保护作用。结果:在270种天然化合物中,共筛选到21种OAT1抑制剂和45种OAT3抑制剂。浓度梯度抑制实验表明分别有7种OAT1强效抑制剂和10种OAT3强效抑制剂(IC50值小于10 μM)。另外,浓度梯度抑制实验显示AAI对OAT1和OAT3的摄取能力都有抑制作用。与HEK-OAT3细胞相比,AAI对HEK-OAT1细胞有更强的细胞毒性。体内研究表明,蟛蜞菊内酯和汉黄芩素在大鼠中显著增加了 AAI的血清浓度,并在小鼠中明显改善AAI导致的肾损伤。结论:本研究从270种天然化合物中筛选了 OAT1和OAT3的抑制剂,并且系统地评估了这些抑制剂与OAT1和OAT3潜在的相互作用,首次证明了蟛蜞菊内酯和汉黄芩素对AAI导致的肾毒性具有良好的保护作用,对天然化合物—药物相互作用的研究具有重大意义,为临床上针对AAN的治疗药物开发提供了天然来源。

[关键词]：

有机阴离子转运体;天然化合物;马兜铃酸;马兜铃酸肾病;蟛蜞菊内酯;汉黄芩素

[文献类型]：硕士论文
[文献出处]：

天津大学2020年

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