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急性肺曲霉菌病动物模型建立及肿块型肺真菌病CT影像学特征分析

花匠小妙招
2025-07-09 20:15

摘要背景随着器官移植及造血干细胞移植的广泛开展,化疗药、免疫抑制剂的广泛应用,肺部机遇性感染发病率迅速上升,是导致免疫抑制患者高死亡率的重要原因之一,如骨髓移植患者及机械通气患者肺部感染的死亡率高达90%。降低死亡率的关键是早期及时的正确诊断,以便能及时有效的给予治疗,遗憾的是目前机遇性感染尤其是机遇性真菌感染的早期及正确诊断极具挑战性,误诊漏诊率在各种肺部感染中居高不下。真菌是常见的机遇性感染致病原之一,其中又以曲霉菌最为多见。为了提高对肺部真菌病影像学特点的认识,提高其诊断准确率,本研究动物实验部分探讨急性烟曲霉菌肺部感染的动物模型制作方法并着重研究其肺部CT表现及演变规律。在此基础上,我们回顾性分析肿块或结节型肺真菌病的流行病学特点及CT表现,并与炎症、结核及良性肿瘤相比较,旨在总结肿块或结节型肺真菌病的影像特点,为鉴别诊断提供依据。第一部分急性肺曲霉菌病动物模型建立及CT征象学研究目的通过建立气管源性与血管源性新西兰大白兔急性肺部烟曲霉菌病模型,总结模型建立方法及其CT表现,并比较气管源性与血管源性模型动物生存期和肺外脏器病变出现情况的差异及CT表现的区别。,随机编号分为6组,1-4组各9只为免疫抑制组,5、6组各6只为非免疫抑制组,1、3、5组动物经皮穿刺气管法接种菌液,2、4、6组经耳缘静脉注射法接种菌液,1、2组接种菌液浓度为5×107cfu/ml,3-6组接种浓度为5×108cfu/ml,。。1-4组实验动物,第1-5天每日耳缘静脉注射阿糖胞苷525mg/m2,第1、2天每天静脉注射甲强龙5mg/kg,第8、9天每天静脉注射阿糖胞苷484mg/m2。为预防混合感染,第4天起,1-6组动物均给予万古霉素15mg/kg、头孢他啶150mg/kg静脉注射,每日1次;庆大霉素5mg/kg静脉注射,隔日1次。实验第二天进行菌液接种,麻醉后根据分组情况按照不同方式不同菌液浓度进行接种。、接种后1、3、5、7、9、11、13天将所有当时存活的实验动物进行肺部CT扫描。采用Sensation16层螺旋CT机。使用儿童头部扫描SFOV,螺旋扫描,床进15mm/周,动物俯卧位,头先进;扫描条件:120KV,200mA;DFOV选择100-120mm;扫描模式:×16;肺算法(60)和标准算法重建(40);常规层厚:3mm;重建层厚:1mm;详细记录病变特征,病变出现的时间,及多次检查的病变演变情况。根据病变的形态、密度将病变分为结节状GGO、片状GGO、实性结节和片状实变4种,根据病变部位分为中心型与外围型,按数量分为单发与多发,且记录弥漫性病变出现情况。、病理检查及真菌培养每日观察动物一般状况并及时解剖死亡动物、留取肺标本做真菌培养(SDA斜面培养基培养并做显微镜下鉴定)及病理检查(HE染色)、记录动物存活时间。接种后第13天将所有存活动物进行CT扫描后处死,解剖、留取标本。:(1)成功接种菌液;(2)兔肺标本真菌培养有烟曲霉菌菌落生长,镜下鉴定为烟曲霉菌;(3)观察期内兔胸部CT扫描发现病灶;(4)病灶部位肺标本病理切片HE染色镜下发现病变;满足条件(1)及(3)或(4)者视为建模成功,满足(1)和(2)但不具备(3)和(4)者视为烟曲霉菌肺部定植状态(潜伏感染),仅满足(1)而不满足其他条件者视为建模失败。结果1、建模成功率:第1组一只动物接种前死亡,其余动物均成功接种菌液。免疫抑制组的建模成功率高于非免疫抑制组(35只和3只,100%VS25%,p=0<)。非免疫抑制组只有42号动物于接种后第8天死亡,其余11只动物均为实验截止日(接种后第13天)人工处死。免疫抑制组动物存活时间最短2天,最长12天,±;±;2组动物平均生存期6±;±;±。生存期的差异受接种方式影响(2因素2水平析因设计,F=,P=<),血管接种组动物生存时间较气管接种组短;4组动物肉眼观肝脏病变出现比率分别为:2/8、8/9、1/9、8/9,肾病变:0/8、5/9、0/9、7/9,血管接种组肝肾病变较气管接种组更易出现(logistic回归分析)。2、肺部病变出现时间:35只建模成功的免疫抑制组动物肺部CT发现异常的时间最短为接种后1天,最长7天,±。±,±1.

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