板栗花发育 B 类基因 CmPI 的克隆及功能分析
摘要：【目的】PISTILLATA（PI）基因作为控制花器官发育的B类功能基因中的一员，在花器官发育中起到重要的作用。为探究PI基因在板栗花发育中的功能，对板栗花器官B类基因PISTILLATA（PI）进行鉴定和功能分析。【方法】在板栗基因组数据中检索PI同源基因CmPI，并克隆编码区序列。利用在线工具对CmPI进行生物信息学分析。通过荧光定量PCR分析CmPI在板栗不同组织及不同花发育时期的时空表达模式。构建35S::CmPI-GFP融合载体，瞬时转化烟草叶片，进行基因表达的亚细胞定位分析。将过表达载体35S::CmPI转入野生型拟南芥获得过表达植株，验证CmPI在花发育中的功能。【结果】克隆到的板栗CmPI基因开放阅读框长度630bp，编码209个氨基酸，有高度保守的MADS域（MADS-box）和K域（K-box），属MADS的Ⅱ型亚家族转录因子，定位于细胞核。CmPI主要在板栗雄花中表达。在拟南芥中过表达CmPI导致萼片转变为花瓣样组织。荧光定量PCR结果表明，CmPI过表达拟南芥中除C类基因AtAG表达量显著高于野生型外，其他A类、B类、E类基因的表达量均低于野生型拟南芥。【结论】鉴定到的MADSbox基因CmPI为板栗花发育B类基因，可导致萼片花瓣化，可能是抑制雌花苞片进一步发育的关键基因。
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