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一种铁皮石斛茎节诱导芽的快速成苗方法与流程

花匠小妙招
2025-10-31 22:06

1.本发明属于生物工程技术领域，尤其涉及一种铁皮石斛茎节诱导芽的快速成苗方法。

背景技术：

2.目前，铁皮石斛(dendrobium officinale kimura et migo.)属于兰科 (orchidaceae_)石斛属(dendrobium sw.)多年生附生草本植物，生于海拔1600 米的山地半阴湿的岩石上，喜温暖湿润气候和半阴半阳的环境，不耐寒，铁皮石斛具有滋阴清热、益胃生津、润肺、止咳、改善消化系统等功效，常用于热病伤津、口干烦渴、病后虚热、视力弱等多种病症，是我国传统的名贵珍稀中药材，具有很高的药用价值和市场前景。
3.铁皮石斛育种基础研究缺乏，盲目引种，种源混乱，且在多代组培繁殖过程中，由于连续继代培养导致品种退化严重和玻璃化现象，需要开展品种选育及小苗复状。
4.在自然环境条件下不同栽培模式，铁皮石斛产生了多种遗传变异类型，园艺性状及农艺性状特异性明显，导致资源质量良莠不齐，药效成分差异大，无法满足消费者对高品质石斛产品的需求，生产上急需培育出适合本地生境及气候特点的铁皮石斛优良品种，也就是本地种源的开发性挖掘。
5.近年来，贵州省林科院石斛研发团队依托《贵州
·
石斛属植物种质资源库》及《铁皮石斛仿野生试培试栽种植基地》等项目，对附树栽培的铁皮石斛开展了种源，附生树种，绑植季节，绑植高度，海拔，绑植带种类，绑植苔藓与否，林地清理与否及施肥，浇水，给药等多种不同试验设计，旨在培育适宜不同种植模式的铁皮石斛优良品种。
6.铁皮石斛优异种质资源选育和优良品种培育是目前产业发展的首要任务，铁皮石斛是一种生长缓慢、自身繁殖能力很低的兰科附生植物，种子繁殖十分困难，需与真菌共生才能萌发，而传统的分株、扦插等方式繁殖系数低，通常为1～3，因此利用选育的优良铁皮石斛枝条为材料开展无性快繁相关技术研发，形成生长周期短，提早开花，满足成苗率较高的需求，达到优良品种的快速繁育，形成品质可控的繁育技术体系，为铁皮石斛产业化发展提供优良种质。
7.通过上述分析，现有技术存在的问题及缺陷为：
8.(1)铁皮石斛种子繁殖十分困难，传统的分株、扦插等方式繁殖系数低。
9.(2)铁皮石斛育种基础研究缺乏，盲目引种，种源混乱，且在多代组培繁殖过程中，由于连续继代培养导致品种退化严重和玻璃化现象。
10.(3)在自然环境条件下不同栽培模式，铁皮石斛产生了多种遗传变异类型，园艺性状及农艺性状特异性明显，导致资源质量良莠不齐，药效成分差异大，无法满足消费者对高品质石斛产品的需求。

技术实现要素：

11.针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种铁皮石斛茎节诱导芽的快速成苗方
法，尤其涉及一种生物促成铁皮石斛萌芽成苗较高的混合药剂的应用。
12.本发明是这样实现的，一种铁皮石斛茎节诱导芽的快速成苗方法，所述铁皮石斛茎节诱导芽的快速成苗方法包括：通过铁皮石斛优良植株的筛选，在每一节间开展人工切口等处理，并分别施以诱导芽萌发及生根的混合药剂ⅰ和混合药剂ⅱ，在短时间内获得大量整齐划一的健壮小苗。
13.进一步，所述铁皮石斛茎节诱导芽的快速成苗方法包括以下步骤：
14.步骤一，铁皮石斛培养对象的建立：选取盆栽的生长健壮的无病虫害的铁皮石斛植株作为试验材料，开展实验前预处理；
15.步骤二，茎段处理：在生长健壮的铁皮石斛植株上选取一定高度的具有一定数量节间的铁皮石斛茎，用花洒喷头冲洗，用酒精消毒，无菌解剖刀在茎的每一节间处划一定深度的切口，在对侧偏下处采用同样方法切口以施混合药剂；
16.步骤三，诱导芽阶段：为获得更多的铁皮石斛萌芽，用滴管吸取一定浓度 6-苄基氨基嘌呤(6-ba)与赛苯隆(tdz)的混合药剂ⅰ，滴在每一节间的切口上，用石蜡封口，经20～30天培养，分化成无根小芽；
17.步骤四，诱导生根阶段：为获得独立生长的铁皮石斛植株，用滴管吸取一定浓度的2,4二氯苯氧乙酸(2,4-d)与α-萘乙酸(naa)的混合药剂ⅱ，滴在每一节间的对侧切口上，用石蜡封口，经10～20天培养，长成具2～3条根的完整植株；
18.步骤五，炼苗：当铁皮石斛小苗长至一定高度时，将有根小苗从基部剥离，置于一定稀释倍数的甲基硫菌灵溶液中浸泡一段时间，用镊子取出在温室中晾干，避免根部腐烂；
19.步骤六，移栽：待根部失水变白，栽植到预先经过消毒处理且由锯末和珍珠岩组成的混合基质的育苗盘中，适宜条件下铁皮石斛即可正常生长；移栽成活后，生长季节浇施花多多，薄肥勤施，加强病虫害管护，铁皮石斛次年开花，从而缩短开花时间，在短时间内满足商品化优良种苗的需求。
20.进一步，所述铁皮石斛茎节诱导芽的快速成苗方法还包括：
21.通过根茎剥离，分离小苗栽植于盛有基质的育苗盘上，短时间内在一定的栽培环境条件下获得大量整齐划一的铁皮石斛开花植株。
22.进一步，所述步骤一中的铁皮石斛培养对象的建立包括：
23.选取盆栽的，生长健壮的，具有生长势强，药效成分含量高，无病虫害的铁皮石斛植株作为母株，置于70％遮阳的温室内，在花芽分化前的30～40天内，摘取铁皮石斛各枝条的顶芽，去掉顶端优势，抑制高生长，获得培养材料。
24.进一步，所述步骤二中的茎段的处理包括：
25.针对所筛选的铁皮石斛植株，选取高度为20～30cm，具有10～15个节间的铁皮石斛茎，用花洒喷头冲洗5min，用棉签蘸75％的酒精消毒每一茎节间，用无菌解剖刀在茎节间处划一切口，深1mm，同样方法在对侧偏下也划一相同深度的切口。
26.进一步，所述步骤三中的6-苄基氨基嘌呤与赛苯隆的质量比为1：1，所述混合药剂ⅰ的浓度为1.0mg/l；经20～30天培养，在节上分化小芽数达1～2株。
27.进一步，所述步骤四中的2,4二氯苯氧乙酸与α-萘乙酸的质量比为1：1，所述混合药剂ⅱ的浓度为0.5mg/l；经10～20天培养，长成具有2～3条根、3～4片叶的完整植株。
28.进一步，所述步骤五中的炼苗包括：
29.当铁皮石斛小苗长至8～10cm，具有4～6条根时，将生根小苗从基部剥离，置于50％甲基硫菌灵可湿性粉剂1500倍液中浸泡3～5min，温室中晾干2～3天。
30.进一步，所述步骤六中的移栽包括：
31.待根部失水变白，栽植到预先经过50％多菌灵500倍液消毒且由锯末和珍珠岩按体积比3：1配置组成的混合基质的育苗盘中，每盘栽植120株，浇足定根水，将育苗盘置于温室中，保持20～28℃温度、60％湿度、70％遮阳并通风条件，铁皮石斛即可正常生长，成苗的移栽成活率达98％以上；生长季节10～15 天浇一次稀释1000倍的花多多，薄肥勤施，加强病虫害管护。
32.本发明的另一目的在于提供一种实施所述的铁皮石斛茎节诱导芽的快速成苗方法所用的促进铁皮石斛萌芽并生根的混合药剂，所述促进铁皮石斛萌芽并生根的混合药剂包括混合药剂ⅰ和混合药剂ⅱ。
33.其中，所述混合药剂ⅰ由6-苄基氨基嘌呤和赛苯隆按1：1的质量比组成，浓度为1.0mg/l，用于铁皮石斛诱导芽阶段；
34.所述混合药剂ⅱ由2,4二氯苯氧乙酸和α-萘乙酸按1：1的质量比组成，浓度为0.5mg/l，用于铁皮石斛诱导生根。
35.结合上述的技术方案和解决的技术问题，请从以下几方面分析本发明所要保护的技术方案所具备的优点及积极效果为：
36.第一、针对上述现有技术存在的技术问题以及解决该问题的难度，紧密结合本发明的所要保护的技术方案以及研发过程中结果和数据等，详细、深刻地分析本发明技术方案如何解决的技术问题，解决问题之后带来的一些具备创造性的技术效果。具体描述如下：
37.本发明筛选的优良铁皮石斛植株中等，叶二列，长披针形，株型紧凑，花序着生3～5朵花，茎直立，红色，圆柱形，茎上下粗细相近，有明显黑节，节凹进，节间微胖，多糖含量高，嚼之粘腻感浓厚，渣少，不易倒伏，耐-4℃的低温等优点，运用植物生物促成技术，即采用茎节间划痕切口与混合药剂ⅰ和混合药剂ⅱ共同刺激相结合的快速成苗方法，短期内在茎节上萌发大量的根芽一体化小苗，进而获得次年开花的健壮优质种苗，满足育种及商品化市场的需求，在科研与开发中具有重大价值。
38.第二，把技术方案看做一个整体或者从产品的角度，本发明所要保护的技术方案具备的技术效果和优点，具体描述如下：
39.本发明开发了一种促进所选育的具有强生长势，药效成分含量高，高抗逆性的铁皮石斛茎节诱导芽成苗的混合药剂ⅰ和混合药剂ⅱ的应用。
40.第三，作为本发明的权利要求的创造性辅助证据，本发明的技术方案转化后的预期收益和商业价值为：铁皮石斛是我国传统的名贵中草药，之前不被熟悉，现如今越来越被重视养生的人们逐步接受和认识到它的好处，进而铁皮石斛种植业也有了长足的发展，21世纪以来铁皮石斛作为一项新兴产业，在产业化过程中逐步应用此项发明等关键技术和大棚设施栽培等技术，使铁皮石斛产业从无到有，由少到多并形成如今的规模产业，种植铁皮石斛不仅可以让劳动力资源和农业资源得到充分利用，也丰富了农业产业结构，提升了农业生态环境水准，从经济效益方面来看，种植铁皮石斛极大地提高了农民收入，为农村脱贫致富创造了条件，其应用前景十分广阔。截至2021年底，全国铁皮石斛种植保守估计超过50万亩，年产鲜条最高达9000余吨，产值近200亿元，产业发展处于鼎盛时期。
附图说明
41.为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对本发明实施例中所需要使用的附图做简单的介绍，显而易见地，下面所描述的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下还可以根据这些附图获得其他的附图。
42.图1是本发明实施例提供的铁皮石斛茎节诱导芽的快速成苗方法流程图；
43.图2～图3是本发明实施例提供的铁皮石斛茎节诱导根和芽的示意图。
具体实施方式
44.为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
45.针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种铁皮石斛茎节诱导芽的快速成苗方法，下面结合附图对本发明作详细的描述。
46.一、解释说明实施例。为了使本领域技术人员充分了解本发明如何具体实现，该部分是对权利要求技术方案进行展开说明的解释说明实施例。
47.如图1所示，本发明实施例提供的铁皮石斛茎节诱导芽的快速成苗方法包括以下步骤：
48.s101，铁皮石斛培养对象的建立：选取盆栽的生长健壮的无病虫害的铁皮石斛植株作为供试材料，开展实验前预处理；
49.s102，茎段处理：在生长健壮的铁皮石斛植株上选取铁皮石斛茎，冲洗，消毒，在茎的每一节间处划痕切口，对侧偏下采用同样方法处理；
50.s103，诱导芽阶段：用滴管吸取6-苄基氨基嘌呤与赛苯隆组成的混合药剂ⅰ，滴在每一节间的切口上，用石蜡封口，经一段时间培养，分化成小芽；
51.s104，诱导生根阶段：用滴管吸取2,4二氯苯氧乙酸与α-萘乙酸组成的混合药剂ⅱ，滴在对侧偏下的切口上，封口，培养，长成完整植株；
52.s105，炼苗：当铁皮石斛小苗长至一定高度时，将有根小苗从基部剥离，置于一定稀释倍数的甲基硫菌灵溶液中浸泡，取出，温室晾干；
53.s106，移栽：待根部失水变白，栽植到预先经过消毒处理且由锯末和珍珠岩组成的混合基质的育苗盘中，定植，管理，铁皮石斛次年开花。
54.本发明实施例提供的铁皮石斛茎节诱导根和芽的示意图如图2～3所示。
55.实施例1
56.本发明开发了一种促进所筛选的具有生长势强，药效成分含量高，高抗逆性的铁皮石斛茎节诱导芽成苗的混合药剂的应用。选取无病虫害，进入开花期，植株生长健壮，高度30～40厘米，具有10～15个节间的优良铁皮石斛植株，运用植物生物促成技术，经过药剂配制、节间划痕切口、蘸取、涂抹、封口等操作步骤，在铁皮石斛茎节上获得根芽一体化植株，次年在母株上开花，继而通过根茎剥离，分离小苗栽植于盛有基质的育苗盘上，短时间内给予一定的栽培环境条件及即可获得大量整齐划一的铁皮石斛开花植株。
57.本发明实施例提供的铁皮石斛茎节诱导芽的快速成苗方法包括以下步骤：
58.(1)铁皮石斛培养对象的确立：选取盆栽的，生长健壮的，具有生长势强，药效成分含量高，无病虫害的铁皮石斛植株作为母株，置于70％遮阳的温室内，在花芽分化前的30～40天内，摘取铁皮石斛各枝条的顶芽，去掉顶端优势，抑制高生长，获得培养材料。
59.(2)茎段处理：针对所获得的铁皮石斛植株，选取高度为20～30厘米，具有10～15个节间的铁皮石斛茎，用花洒喷头冲洗5min，用棉签蘸75％的酒精消毒每一节间，用无菌解剖刀在茎节间处划一切口，深1mm，同样方法在对侧偏下也划一相同深度的切口。
60.(3)诱导芽阶段：为获得更多的铁皮石斛诱导芽，用滴管吸取6-苄基氨基嘌呤(6-ba)与赛苯隆(tdz)(质量比1：1)1.0mg/l的混合液(以下简称混合药剂ⅰ)，滴在铁皮石斛茎每一节间切口上，用石蜡封口，经20～30天培养，在节上分化小芽数达1～2株。
61.(4)诱导生根阶段：为获得独立生长的铁皮石斛植株，用滴管吸取2,4二氯苯氧乙酸(2,4-d)与α-萘乙酸(α-naa)(质量比1：1)0.5mg/l的混合液 (以下简称混合药剂ⅱ)，滴在对侧每一节间的切口上，用石蜡封口，经10～20 天培养，长成具2～3条根、3～4片叶的完整植株。
62.(5)炼苗及移栽：当铁皮石斛小苗长至8～10厘米，具4～6条根时，用手轻轻将生根小苗从基部剥离，置于50％甲基硫菌灵可湿性粉剂1500倍液中浸泡 3～5分钟，用镊子取出在温室中晾干2～3天，待根部失水变白，栽植到预先经过 50％多菌灵500倍液消毒且由锯末和珍珠岩(体积比3：1)组成的混合基质的育苗盘中，每盘栽植120株，浇足定根水，将育苗盘置于温室中，保持20～28℃温度、60％湿度、70％遮阳并通风条件，铁皮石斛即可正常生长，成苗的移栽成活率达98％以上。生长季节通常10～15天浇一次稀释1000倍的花多多，薄肥勤施，加强病虫害管护，铁皮石斛次年即可开花。
63.本发明的有益效果是：此项生物促成铁皮石斛芽及根诱导混合药剂ⅰ和混合药剂ⅱ的发明应用，是获得大量铁皮石斛萌芽成苗的高效繁殖方法，提高了铁皮石斛的繁殖系数，具有萌发率高，成苗快，小苗品质好、生长势强、生殖期缩短，次年开花等优势，在短时间内能够获得高品质且整齐化一的铁皮石斛种苗，为铁皮石斛的育种、种苗培育、标准化、商品化生产及物种的保护及兰科植物的可持续利用提供一条有效的途径。
64.实施例2
65.本发明实施例提供的铁皮石斛茎节诱导芽的快速成苗方法包括以下步骤：
66.(1)铁皮石斛培养对象的建立：选取盆栽的生长健壮的无病虫害的铁皮石斛植株作为试验材料，开展实验前预处理。
67.(2)茎段处理：在生长健壮的铁皮石斛植株上，选取一定高度，具有一定数量节间的铁皮石斛茎，用花洒喷头冲洗，用酒精消毒，无菌解剖刀在茎的每一节间处划一深度的切口，对侧偏下采用同样方法处理。
68.(3)诱导芽阶段：为获得更多的铁皮石斛萌芽，用滴管吸取一定浓度的6
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苄基氨基嘌呤(6-ba)与赛苯隆(tdz)(质量比1：1)混合药剂ⅰ，滴在每一节间的切口上，用石蜡封口，经一段时间培养，分化成小芽。
69.(4)诱导生根阶段：为获得独立生长的铁皮石斛植株，用滴管吸取一定浓度的2,4二氯苯氧乙酸(2,4-d)与α-萘乙酸(naa)(质量比1：1)混合药剂ⅱ，滴在对侧偏下的切口上，用石蜡封口，经一段时间培养，长成完整植株。
70.(5)炼苗及移栽：当铁皮石斛小苗长至一定高度时，用手轻轻将有根小苗从基部剥
离，置于一定稀释倍数的甲基硫菌灵溶液中浸泡，用镊子取出在温室中晾干，待根部失水变白，栽植到预先经过消毒处理且由锯末和珍珠岩(体积比3：1)组成的混合基质的育苗盘中，每盘栽种120株，浇足定根水，将育苗盘置于温室中。保持20～28℃的温度、60％湿度、70％遮阳并通风，铁皮石斛即可正常生长，成苗的移栽成活率达98％以上，生长季节通常10～15天浇一次稀释1000倍的花多多，薄肥勤施，加强病虫害管护，铁皮石斛次年即可开花。
71.二、应用实施例。为了证明本发明的技术方案的创造性和技术价值，该部分是对权利要求技术方案进行具体产品上或相关技术上的应用实施例。
72.本发明应用实施例提供的生物促成铁皮石斛芽及根诱导混合药剂的发明应用，是获得大量铁皮石斛萌芽成苗的高效繁殖方法，提高了铁皮石斛的繁殖系数，具有萌发率高，成苗快，小苗品质好、营养生长期缩短，次年开花等优势，在短时间内能够得到高品质且整齐化一的铁皮石斛种苗，为铁皮石斛的育种、种苗培育、标准化、商品化生产及物种的保护及兰科植物的可持续利用提供一条有效的途径。
73.三、实施例相关效果的证据。本发明实施例在研发或者使用过程中取得了一些积极效果，和现有技术相比的确具备很大的优势，下面内容结合试验过程的数据、图表等进行描述。
74.表1铁皮石斛实施混合药剂ⅰ及混合药剂ⅱ诱导芽及根的萌发率(见下表)
[0075][0076]
从表1可以看出，对于选取的铁皮石斛52个节间，在节间一侧切口1mm，实施混合药剂ⅰ并处理，15天后观察，在每一节上分化出了约1cm长的小芽， 22天后统计，小芽高达15～20cm，数量87个，诱导芽分化率可达167％，即平均每节可诱导1～2个芽；同样在对侧偏下切口1mm，实施混合药剂ⅱ并处理，8 天后观察，在每一节上分化出了约6～10cm长的根，18天后统计，根长12～18cm，数量193条，诱导根分化率可达371％，即平均每节可诱导2～3条根或更多；对照组无切口无混合药剂实施的情况下，52个节间只诱导了11个芽，芽诱导生根 23条，芽及根的诱导率均不足50％。
[0077]
以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，都应涵盖在本发明的保护范围之内。