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萱草花及其制剂的检测方法

花匠小妙招
2025-11-28 21:40

专利名称：萱草花及其制剂的检测方法
技术领域：
本发明涉及一种中药及其制剂的检测方法，特别涉及萱草花及其制剂的检测方法。
背景技术：
萱草花，即萱草花(Hemerocallis citrina Baroni)，又名“金针菜”、“一日百合”，俗称“忘忧草”，属百合科萱草属多年生草本植物植物，在我国各地多有种植，其具有丰富的营养成份，主要化学成分有蛋白质、脂肪、碳水化合物，还有多种维生素、生物碱、苷、黄酮类、胡萝卜素、挥发油、鞣质以及无机矿物钙、磷，以黄酮类化合物为主要成分，可以药食两用，明代李时珍在《本草纲目》中称其有安神醒脑、增智宽胸、美容养血、解热消毒、除烦通乳之功效。现代研究萱草花具有补脑健智、化瘀止血、通络止痛、抗菌消炎等功效，它具有增强免疫力、活血化瘀、保肝抗炎、抗菌抗病毒、抑制肿瘤、清除氧自由基和抑菌作用等多种功能。近年来有研究表明萱草花有明显的抗抑郁作用，萱草花提取制成的制剂能有效的治疗抑郁症，但目前对萱草花制剂的质量检测研究尚少，这会影响产品的质量和疗效，不利于药品的标准化生产及提高生产效率，也不符合现代中药发展的趋势。

发明内容
本发明的目的在于公开了萱草花的检测方法。本发明另一个目的在于公开萱草花制剂的检测方法。本发明目的是通过如下技术方案实现的萱草花制剂的检测方法包括如下鉴别方法和/或含量测定中的一种或几种A、薄层色谱鉴别取萱草花制剂，用10-50%乙醇溶解，离心取上清液，作为供试品溶液；取芦丁标准品，加甲醇制成lmg/ml溶液，作为芦丁对照品溶液；吸取等量供试品及对照品溶液，分别点于同一聚酰胺板上，以1-5 1-5的甲醇水为展开剂，展开，取出，喷0. 5% -2%三氯化铝展开剂显色，置300-400nm紫外光灯下检视；优选的，用10-50%乙醇超声溶解；优选的，置365nm紫外光灯下检视；B、紫外分光光度法含量测定供试品溶液的制备萱草花制剂加10-50%乙醇提取；对照品溶液的制备称取芦丁对照品，加甲醇制成每ImL含0. 1-0. 4mg的溶液；标准曲线的制备分别量取不同容量的对照品溶液，分别置容器中，各容器中先后相同加入3% -8%亚硝酸钠溶液、4% -15%硝酸铝溶液、氢氧化钠试液；在波长400 600nm内选择波长，测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程；取供试品溶液，置量瓶中，先后相同加入3% -8%亚硝酸钠溶液、4% -15%硝酸铝溶液、氢氧化钠试液；按标准曲线选取的紫外波长测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中含芦丁的浓度，计算，即得；供试品溶液的制备优选用10-50%乙醇超声提取；对照品溶液的制备优选制成每ImL含0. 2mg的溶液；所述亚硝酸钠溶液的浓度优选为5% ；所述酸铝溶液的浓度优选为10% ；C、HPLC法含量测定测定条件以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以30-50 50-70的甲醇0. 5% 冰醋酸溶液为流动相；检测波长为200-300nm，理论塔板数按芦丁峰计算应不低于3000 ；对照品溶液的制备称取芦丁对照品，加甲醇制成对照品溶液；供试品溶液的制备称取萱草花制剂加10-50%乙醇提取5-20分钟，过滤，取滤液，即得；测定法分别吸取相同体积的对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，既得；供试品溶液的制备方法中，优选乙醇超声提取；D、原药材的HPLC指纹图谱测定条件C18色谱柱，流动相为甲醇-水(0.5%冰醋酸)梯度洗脱，梯度洗脱的条件为第0-20min 甲醇为20%，0. 5%的冰醋酸水溶液为80% ；第20-30min 甲醇为 30%,0. 5%的冰醋酸水溶液为70% ；第30-70min 甲醇为30%，0. 5%的冰醋酸水溶液为 70%;第70min至最后甲醇为80%,0. 5%的冰醋酸水溶液为20%;流速0. 5-1. 5mL/min^, 检测波长200-300nm，柱温20_30°C ；对照品溶液的制备称取芦丁对照品加甲醇制成对照品溶液；供试品溶液的制备称取萱草花置容量瓶中，加甲醇，超声处理20-45分钟，静置放冷，取上清液，微孔滤膜滤过，取续滤液，即得；按上述方法色谱条件测定，记录指纹图谱；所述指纹图谱包括12个共有特征峰，以3号为芦丁为参照峰，相对保留时间及相对峰面积分别为1号峰相对保留时间为0. 232，相对峰面积为0. 051-0. 278 ；2号峰相对保留时间为0. 936，相对峰面积为0. 020-0. 212 ；4号峰相对保留时间为1. 039，相对峰面积为0. 023-0. 041 ；5号峰相对保留时间为1. 079，相对峰面积为0. 008-0. 178 ；，6号峰相对保留时间为1. 095，相对峰面积为0. 005-0. 029 ；7号峰相对保留时间为1. 115，相对峰面积为0. 045-0. 367 ；8号峰相对保留时间为1. 135，相对峰面积为0. 049-0. 269 ；9号峰相对保留时间为1. 159，相对峰面积为0. 004-0. 023 ；10号峰相对保留时间为1. 171，相对峰面积为0. 003-0. 014 ；11号峰相对保留时间为1. 218，相对峰面积为0. 012-0. 062 ；12号峰相对保留时间为1. 326，相对峰面积为0. 002-0. 313。萱草花制剂的检测方法优选包括如下鉴别方法和/或含量测定中的一种或几种A、薄层色谱鉴别取萱草花制剂，用10-50%乙醇超声溶解，离心取上清液，作为供试品溶液；另取芦丁标准品，加甲醇制成lmg/ml溶液，作为芦丁对照品溶液；吸取等量供试品及对照品溶液，分别点于同一聚酰胺板上，以1-5 1-5的甲醇水为展开剂，展开，取出，喷三氯化铝展开剂显色，置365nm紫外光灯下检视；B、紫外分光光度法含量测定供试品溶液的制备萱草花制剂加10-50%乙醇超声提取；对照品溶液的制备称取芦丁对照品，加甲醇制成每ImL含0. 2mg的溶液；标准曲线的制备分别量取不同容量的对照品溶液，分别置容器中，各容器中先后相同加入5%亚硝酸钠溶液、10%硝酸铝溶液、氢氧化钠试液；在波长400 600nm内选择波长，测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程；取供试品溶液，置量瓶中，先后相同加入5%亚硝酸钠溶液、10%硝酸铝溶液、氢氧化钠试液；按标准曲线选取的紫外波长测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中含芦丁的浓度，计算，即得。C、HPLC法含量测定测定条件以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以30-50 50-70的甲醇0. 5% 冰醋酸溶液为流动相；检测波长为200-300nm，理论塔板数按芦丁峰计算应不低于3000 ；对照品溶液的制备称取芦丁对照品，加甲醇制成对照品溶液；供试品溶液的制备称取萱草花制剂加10-50%乙醇超声5-20分钟，过滤，取滤液，即得；测定法分别吸取相同体积的对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，既得；D、原药材的HPLC指纹图谱测定条件C18色谱柱，流动相为甲醇-水(0.5%冰醋酸)梯度洗脱，梯度洗脱的条件为第0-20min 甲醇为20%，0. 5%的冰醋酸水溶液为80% ；第20-30min 甲醇为 30%,0. 5%的冰醋酸水溶液为70% ；第30-70min 甲醇为30%，0. 5%的冰醋酸水溶液为 70%;第70min至最后甲醇为80%,0. 5%的冰醋酸水溶液为20%;流速0. 5-1. 5mL/min^, 检测波长200-300nm，柱温20_30°C ；对照品溶液的制备称取芦丁对照品加甲醇制成对照品溶液；供试品溶液的制备称取萱草花置容量瓶中，加甲醇，超声处理20-45分钟，静置放冷，取上清液，微孔滤膜滤过，取续滤液，即得；按上述方法色谱条件测定，记录指纹图谱；所述指纹图谱包括12个共有特征峰，以3号为芦丁为参照峰，相对保留时间及相对峰面积分别为1号峰相对保留时间为0. 232，相对峰面积为0. 051-0. 278 ；2号峰相对保留时间为0. 936，相对峰面积为0. 020-0. 212 ；4号峰相对保留时间为1. 039，相对峰面积为0. 023-0. 041 ；5号峰相对保留时间为1. 079，相对峰面积为0. 008-0. 178 ；，6号峰相对保留时间为1. 095，相对峰面积为0. 005-0. 029 ；7号峰相对保留时间为1. 115，相对峰面积为0. 045-0. 367 ；8号峰相对保留时间为1. 135，相对峰面积为0. 049-0. 269 ；9号峰相对保留时间为1. 159，相对峰面积为0. 004-0. 023 ；10号峰相对保留时间为1. 171，相对峰面积为0. 003-0. 014 ；11号峰相对保留时间为1. 218，相对峰面积为0. 012-0. 062 ；12号峰相对保留时间为1. 326，相对峰面积为0. 002-0. 313。
本发明还进一步提供萱草花的检测方法色谱条件C18色谱柱，甲醇-0.5%冰醋酸溶液为流动相二元梯度洗脱，梯度洗脱的条件为第0-20min 甲醇为20%— 30%，0. 5%的冰醋酸水溶液为80% — 70% ；第 20-30min 甲醇为30%，0. 5%的冰醋酸水溶液为70% ；第30_70min 甲醇为30%— 80%, 0. 5%的冰醋酸水溶液为70%- 20% ；流速0. 5-1. 5mL · min-1，检测波长200_300nm，柱温 20-30 0C ；对照品溶液的制备称取芦丁对照品加甲醇制成对照品溶液；供试品溶液的制备称取萱草花置容量瓶中，加甲醇，超声处理20-45分钟，静置放冷，取上清液，微孔滤膜滤过，取续滤液，即得；测定法分别吸取相同体积的对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，既得。本发明还进一步提供萱草花的HPLC指纹图谱检测方法色谱条件C18色谱柱，流动相为甲醇-水(0.5%冰醋酸)梯度洗脱，梯度洗脱的条件为第0-20min 甲醇为20%，0. 5%的冰醋酸水溶液为80% ；第20-30min 甲醇为 30%,0. 5%的冰醋酸水溶液为70% ；第30-70min 甲醇为30%，0. 5%的冰醋酸水溶液为 70%;第70min至最后甲醇为80%,0. 5%的冰醋酸水溶液为20%，流速0. 5-1. 5mL/min^, 检测波长200-300nm，柱温20_30°C ；对照品溶液的制备称取芦丁对照品加甲醇制成对照品溶液；供试品溶液的制备称取萱草花置容量瓶中，加甲醇，超声处理20-45分钟，静置放冷，取上清液，微孔滤膜滤过，取续滤液，即得；按上述方法色谱条件测定，记录指纹图谱；所述指纹图谱包括12个共有特征峰，以3号为芦丁为参照峰，相对保留时间及相对峰面积分别为1号峰相对保留时间为0. 232，相对峰面积为0. 051-0. 278 ；2号峰相对保留时间为0. 936，相对峰面积为0. 020-0. 212 ；4号峰相对保留时间为1. 039，相对峰面积为0. 023-0. 041 ；5号峰相对保留时间为1. 079，相对峰面积为0. 008-0. 178 ；，6号峰相对保留时间为1. 095，相对峰面积为0. 005-0. 029 ；7号峰相对保留时间为1. 115，相对峰面积为0. 045-0. 367 ；8号峰相对保留时间为1. 135，相对峰面积为0. 049-0. 269 ；9号峰相对保留时间为1. 159，相对峰面积为0. 004-0. 023 ；10号峰相对保留时间为1. 171，相对峰面积为0. 003-0. 014 ；11号峰相对保留时间为1. 218，相对峰面积为0. 012-0. 062 ；12号峰相对保留时间为1. 326，相对峰面积为0. 002-0. 313。本发明萱草花制剂由萱草花单味药提取后制成。所述萱草花单味药提取方法包括水提取或有机溶剂提取。所述萱草花单味药提取方法优选有机溶剂提取；所述萱草花单味药提取方法更优选乙醇提取；所述萱草花单味药提取方法更优选乙醇加热回流提取；所述萱草花单味药提取方法更优选萱草花乙醇加热回流提取后通过大孔树脂柱精制；所述萱草花单味药提取方法更优选萱草花60-95%乙醇加热回流提取后通过大孔树脂柱精制；
所述萱草花单味药提取方法更优选为取萱草花，用60-95%乙醇加热回流提取
1-4次，每次0.5-1小时，过滤，合并滤液，回收乙醇，得浸膏A，浸膏A用蒸馏水稀释后过滤，通过大孔树脂柱，蒸馏水洗至流出液透明，先后用20% -95%乙醇洗脱2-6倍柱体积，分别回收乙醇，得提取物。所述萱草花单味药提取方法更优选为将萱草花60-95%乙醇加热回流提取1-4 次，每次0. 5-1小时，过滤，合并滤液，回收乙醇，得浸膏A，残渣I，残渣I用20-80%乙醇加热提取1-4次，每次20-60min，过滤，合并滤液，回收乙醇，得浸膏B，将浸膏A与浸膏B用蒸馏水稀释后过滤，通过大孔树脂柱，蒸馏水洗至流出液透明，先后用20% -95%乙醇洗脱
2-6倍柱体积，分别回收乙醇，得提取物。本发明提供萱草花制剂的最优方法，该方法为包括萱草花用60-75%乙醇冷浸或渗漉，得提取物。上述提取物按常规的制剂工艺制成临床可接受的任意剂型，例如胶囊剂、片剂、颗粒剂、散剂、口服液、丸剂等制剂。为使上述剂型能够实现，需在制备这些剂型时加入药学可接受的辅料，例如填充剂、崩解剂、润滑剂、助悬剂、粘合剂、甜味剂、矫味剂、防腐剂、基质等。填充剂包括淀粉、预胶化淀粉、乳糖、甘露醇、甲壳素、微晶纤维素、蔗糖等；崩解剂包括淀粉、预胶化淀粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素钠等；润滑剂包括硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠、滑石粉、二氧化硅等；助悬剂包括聚乙烯吡咯烷酮、微晶纤维素、蔗糖、琼脂、羟丙基甲基纤维素等；粘合剂包括，淀粉浆、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素等；甜味剂包括糖精钠、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等；矫味剂包括甜味剂及各种香精；防腐剂包括尼泊金类、苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸及其盐类、苯扎溴铵、醋酸氯乙定、桉叶油等；基质包括PEG6000，PEG4000，虫蜡等。本发明所提供的萱草花及其制剂的检测方法，是通过大量具体创造性试验筛选后得到，鉴别方法中通过对样品处理方法的筛选，展开剂的选择，使得鉴别专属性很好，而且方法经济适用、结果快速；含量测定方法中通过对样品、供试品处理方法的筛选，展开剂的选择，使得含量测定方法可以很有效的对产品进行质量检测；指纹图谱测定中分析方法稳定可靠有效，为萱草花制剂和药材的鉴别和质量评价与控制提供了依据。

图IHPLC含量测定阴性样品溶液图谱；图2HPLC含量测定芦丁对照图谱；图3HPLC含量测定样品图谱；图4萱草花药材HPLC含量测定样品图谱；图5萱草花药材HPLC含量测定芦丁对照品图谱；图6萱草花药材HPLC含量测定阴性样品溶液图谱；图7系统生成的萱草花对照图谱(3号为芦丁)；图8不同省份萱草花药材样品的指纹图谱。
具体实施方式
实验例1薄层色谱鉴别实验1仪器与材料1. 1仪器TU-1810紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限公司)；SD-20岛津液相色谱仪(日本)，四元泵(LC-20ATvp)，SPD-M20A 二极管阵列检测器，LC-液相色谱工作站。Sartorius电子分析天平(BT 125D)。KQ3200DE型超声仪(昆山市超声仪器有限公司)。1.2材料制剂样品由北京中医药大学制备(同实施例1)；芦丁对照品购自中国食品药品检定研究院(100080-200707)，甲醇为色谱纯(Fisher公司)；水为屈臣氏纯净水；其他试剂均为分析纯。2 鉴别取制剂(由实施例1制备)0. 5g，用适量30%乙醇超声溶解，离心取上清液，作为供试品溶液。另取芦丁标准品，加甲醇制成lmg/ml溶液，作为芦丁对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)试验，吸取上述溶液各5 μ 1，分别点于同一聚酰胺板上，以甲醇水(1 1)为展开剂，展开，取出，喷三氯化铝展开剂显色，置紫外光灯 (365nm)下检视。3 结果检测色谱中，供试液在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。实验例2紫外分光光度法的总黄酮含量测定实验1测定波长的选择芦丁标准溶液和萱草提取液分别按实验方法显色后，在波长400 600nm范围内扫描，结果芦丁标准溶液显色后在510nm处有最大吸收，萱草提取液显色在此波长下也有吸收，实验选用510nm为测定波长。2供试品溶液的制备精密称取制剂(由实施例1制备)20mg，置IOmL量瓶中，加30%乙醇至刻度，超声处理IOmin,即得。3对照品溶液的制备精密称取芦丁对照品适量，加甲醇制成每ImL含0. 2mg的溶液，摇勻，即得。4标准曲线的制备精密量取对照品溶液0. 5ml，Iml，2ml，3ml，4ml，5ml，6ml，分别置25ml量瓶中，各加水至6. Oml，加5 %亚硝酸钠溶液Iml，混勻，放置6分钟，加10 %硝酸铝溶液Iml，摇勻，放置6分钟，加氢氧化钠试液10ml，再加水至刻度，摇勻，放置15分钟，以相应试剂为空白，在 510nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程为 Y = 13. 65X+0. 0128，r = 0. 9997，结果表明芦丁浓度在 0. 004026 0. 048312mg/ml 与吸光度具有良好的线性关系。5测定方法取供试品溶液1ml，置25ml量瓶中，照标准曲线制备项下的方法，自“加水至 6. 0ml”起，依法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中含芦丁的浓度，计算，即得。6方法学考察结果6.1精密度试验
按样品测定项下的方法对批号为20110530的药材处理得供试液，UV法进行测定，一份样品连续测定6次，结果见表1，RSD为0. 16%。表1精密度试验结果
权利要求
1.萱草花制剂的检测方法，其特征在于该方法包括如下含量测定方法测定条件以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以30-50 50-70的甲醇0.5%冰醋酸溶液为流动相；检测波长为254nm，理论塔板数按芦丁峰计算应不低于3000 ；对照品溶液的制备取芦丁对照品，加甲醇制成对照品溶液；供试品溶液的制备取萱草花制剂加10-50 %乙醇超声5-20分钟，过滤，取滤液，即得；测定法分别吸取相同体积的对照品与供试品溶液，注入液相色谱仪，测定。
2.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于该方法还包括如下方法中的一种或几种A、薄层色谱鉴别取萱草花制剂，用10-50%乙醇溶解，离心取上清液，作为供试品溶液；取芦丁标准品，加甲醇制成lmg/ml溶液，作为芦丁对照品溶液；吸取等量供试品及对照品溶液，分别点于同一聚酰胺板上，以1-5 1-5的甲醇水为展开剂，展开，取出，喷0.5% -2%三氯化铝展开剂显色，置300-400nm紫外光灯下检视；B、紫外分光光度法含量测定供试品溶液的制备萱草花制剂加10-50%乙醇提取；对照品溶液的制备称取芦丁对照品，加甲醇制成每ImL含0. 1-0. 4mg的溶液；标准曲线的制备分别量取不同容量的对照品溶液，分别置容器中，各容器中先后相同加入3% -8%亚硝酸钠溶液、4% -15%硝酸铝溶液、氢氧化钠试液；在波长400 600nm内选择波长，测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程；取供试品溶液，置量瓶中，先后相同加入3% -8%亚硝酸钠溶液、4% -15%硝酸铝溶液、氢氧化钠试液；按标准曲线选取的紫外波长测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中含芦丁的浓度，计算，即得；C、HPLC法含量测定测定条件以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以30-50 50-70的甲醇0.5%冰醋酸溶液为流动相；检测波长为200-300nm，理论塔板数按芦丁峰计算应不低于3000 ；对照品溶液的制备称取芦丁对照品，加甲醇制成对照品溶液；供试品溶液的制备称取萱草花制剂加10-50%乙醇提取5-20分钟，过滤，取滤液，即得；测定法分别吸取相同体积的对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，测定。
3.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于该方法中，流动相为甲醇0.5%冰醋酸溶液=40 60;对照品溶液由芦丁加甲醇制成每ImL 含0. 4mg的溶液。
4.如权利要求2所述的检测方法，其特征在于该方法中对原药材的HPLC指纹图谱检测方法中流速lmL/min-1，检测波长254nm，柱温25°C。
5.如权利要求1-4任一所述的检测方法，其特征在于该方法中所述萱草花制剂为萱草花单味药提取后，所得提取物按常规的制剂工艺制成临床可接受的任意剂型。
6.萱草花的HPLC指纹图谱检测方法，其特征在于该方法为色谱条件C18色谱柱，流动相为甲醇-0. 5%冰醋酸水溶液梯度洗脱，梯度洗脱的条件为第0-20min 甲醇为20 %，0. 5 %的冰醋酸水溶液为80% ；第20-30min 甲醇为30%， 0. 5%的冰醋酸水溶液为70% ；第30-70min 甲醇为30%，0. 5%的冰醋酸水溶液为70% ；第70min至最后甲醇为80%,0. 5%的冰醋酸水溶液为20%，流速0. 5-1. SmL/mirT1，检测波长 200-300nm，柱温 20_30°C ；对照品溶液的制备称取芦丁对照品加甲醇制成对照品溶液；供试品溶液的制备称取萱草花置容量瓶中，加甲醇，超声处理20-45分钟，静置放冷，取上清液，微孔滤膜滤过，取续滤液，即得；按上述方法色谱条件测定，记录指纹图谱。
7.如权利要求6所述的检测方法，其特征在于该方法中指纹图谱包括12个共有特征峰，以3号为芦丁为参照峰，相对保留时间及相对峰面积分别为1号峰相对保留时间为0. 232，相对峰面积为0. 051-0. 278 ；2号峰相对保留时间为0. 936，相对峰面积为0. 020-0. 212 ；4号峰相对保留时间为1. 039，相对峰面积为 0. 023-0. 041 ；5号峰相对保留时间为1. 079，相对峰面积为0. 008-0. 178 ；，6号峰相对保留时间为1. 095，相对峰面积为0. 005-0. 029 ；7号峰相对保留时间为1. 115，相对峰面积为0. 045-0. 367 ；8号峰相对保留时间为1. 135，相对峰面积为0. 049-0. 269 ；9号峰相对保留时间为1. 159，相对峰面积为0. 004-0. 023 ；10号峰相对保留时间为1. 171，相对峰面积为0. 003-0. 014 ；11号峰相对保留时间为1. 218，相对峰面积为0. 012-0. 062 ；12号峰相对保留时间为1. 326，相对峰面积为0. 002-0. 313。
8.如权利要求6所述的检测方法，其特征在于该方法中流速为=ImL · min-1 ；检测波长为:254nm ；柱温为25°C。
9.萱草花的检测方法，其特征在于该方法为色谱条件C18色谱柱，甲醇-0. 5%冰醋酸溶液为流动相二元梯度洗脱，梯度洗脱的条件为第0-20min 甲醇为20%—30%，0. 5%的冰醋酸水溶液为80%—70%;第20-30min 甲醇为30%，0. 5%的冰醋酸水溶液为70% ；第30-70min 甲醇为30%— 80%,0. 5%的冰醋酸水溶液为70%- 20% ；流速0. 5-1. 5mL · min-1，检测波长200_300nm，柱温20-30°C ；对照品溶液的制备称取芦丁对照品加甲醇制成对照品溶液；供试品溶液的制备称取萱草花置容量瓶中，加甲醇，超声处理20-45分钟，静置放冷，取上清液，微孔滤膜滤过，取续滤液，即得；测定法分别吸取相同体积的对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，既得。
10.如权利要求9所述的检测方法，其特征在于该方法中流速为=ImL · min-1 ；检测波长为:254nm ；柱温为25V。
全文摘要
本发明公开了萱草花及其制剂的检测方法，萱草花制剂的检测方法包括如下鉴别方法和/或含量测定中的一种或几种A薄层色谱鉴别；B紫外分光光度法含量测定；C是HPLC法含量测定；D原药材的HPLC指纹图谱，本发明还进一步提供萱草花的HPLC检测方法和HPLC指纹图谱检测方法；本发明的萱草花及其制剂的检测方法中的鉴别专属性很好，方法经济适用、结果快速；含量测定方法可以很有效的对产品进行质量检测；指纹图谱测定中分析方法稳定可靠有效，为萱草花制剂和药材的鉴别和质量评价与控制提供了依据。
文档编号G01N30/90GK102495168SQ20111041083
公开日2012年6月13日申请日期2011年12月12日优先权日2011年12月12日
发明者倪健, 朱陵群, 邹忆怀申请人:倪健