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马铃薯花药培养再生植株鉴定.pdf
摘要 摘要 试验对38个基因型的马铃薯花药进行培养，分析了马铃薯基因型、培养基种类对花药 愈伤组织诱导和分化的影响；以讷16、克新13、克新17、克新18、花525、波C为试验材 料，研究花粉发育时期、预处理、激素浓度、蔗糖浓度以及培养基附加物硝酸银、维生素c、 活性炭，马铃薯提取液等因素对马铃薯花药愈伤组织诱导率及褐化率的影响；同时对马铃薯 花药培养获得的再生植株进行细胞学鉴定；并对获得的双单倍体进行了农艺性状鉴定。 试验结果表明： 1马铃薯花蕾的大小、花药的大小和颜色基本可以作为判断小孢子发育时期的一个简 便而可靠的指标，当小孢予处于单核靠边期时，花蕾大小6．O～8．5m左右，花药3．0～ 5．Om，颜色为浅绿色。 2在相同的培养条件下不同基因型材料的愈伤组织的诱导率有较大的差异。讷16愈伤 组织的诱导数最多，共接种花药960个，诱导愈伤组织达42个，诱导率为4．3％；波C其 次，诱导率为3．5％。 3低温预处理能明显地提高马铃薯愈伤组织的诱导率，但时间过长或过短，都不利于 愈伤组织的诱导。在40条件下处理2d效果最好。接种后的马铃薯花药在33℃高温处理， 处理时间为2d效果最佳。有利于促进愈伤组织的产生。 4甘露醇预处理马铃薯品种讷16和波C，随着处理的天数增加，出愈率均呈现了先升 后降的趋势，预处理时间为4d时愈伤组织诱导率达到最大值。 5植物激素在马铃薯花药培养中起着重要的作用，在MS培养基上采用不同浓度的 NAA、2，4一D、KT配比，结果表明，MS+NAA 0．5 0．5 0．5rag／L+2，4．Dmg／L+KTmg／L适 合愈伤组织的诱导。 6蔗糖浓度为6％时，马铃薯愈伤组织的诱导率最高。马铃薯提取液能够促进愈伤组 织的发生，浓度为509／L效果较好。 7培养基中加入20rag／L硝酸银能有效地减轻花药的褐化程度，并能提高愈伤组织的诱 导率。培养基中添加不同浓度的Vc，随着Vc浓度的提高，花药的褐化程度减轻。 8培养基中加入活性炭，花药的褐化程度可以减轻，但对于愈伤组织的诱导无明显作用， 当活性炭的浓度加到39／L时对愈伤组织的诱导有明显的抑制作用。 9气孔保卫细胞时绿体数鉴定染色体倍性的准确性较好，讷16双单倍体气孔保卫细胞 叶绿体数在10～18个范围内，四倍体在20～30个范围内，叶绿体数少于18个的为双单倍体， 多于20个而少于30个的为四倍体。 10通过对双单倍体植株的农艺性状调查与研究，发现移栽的双单倍体植株在生长势、叶 色、薯型等性状与对照相比存在一定的差异。 关键词：马铃薯；花药培养：愈伤组织；再生植株；双单倍体 Abstract AntherCultureandEvaluationof Regenerated Abstract Anthersfrom wereculturedinvitro．Theeffects thirty-eightganotypesofpotato ofgenotype and ofmediumoncallusformationanddifferentiationinantherculturewere types analyzed． that callusinductionandanther Factorsjnfluence of browningrate．such∞developmentalstage hormonesandhormone pollen，pretreatment,the conce
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