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实验动物与管理：第二章实动分类及质量监控

花匠小妙招
2024-10-15 18:20

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1、实验动物的分类及其质量控制,第二章,实验动物的分类,实验动物按生物学方法分类实验动物按遗传学控制分类实验动物按微生物控制分类,1. 实验动物按生物学方法分类,界,门,亚门,总纲,纲,亚纲,总目,目,亚目,总科,科,亚科,属,亚属,种,亚种,Super;Sub,家犬的分类系统？,种名的命名：,双名法：属名种名人类的学名：Homo sapiens (L),亚种的命名：三名法：属名种名亚种名,2. 实验动物按遗传学控制分类,近交系动物杂交群动物突变系动物封闭群动物,一、近交系动物近交系动物（Inbred strain animals）也称纯系动物，是经至少连续20代的全同胞兄妹交配或

2、亲子交配培育而成，品系内所有个体都可追溯到起源于第20代或以后代数的一对共同祖先，这时个体的近交系数大于98.6%，遗传物质高度纯合和稳定的品系的动物，称为近交系。,近交系数(Inbreeding Coefficient),近交系数是指：个体由于近交而造成的异质基因减少时，同质基因或纯合子的百分数。它反映动物在不同代次的纯和程度。 Falconer（1960）指出连续全同胞的兄妹交配，每代近交率平均上升19%，并提出近交系数的计算公式，即： Fn=1-(1- F )n （n：近交代数； F ：每一代近交系数上升率）如： F =19%，兄妹连续交配第20代的近交率，即：F20 =1-（1-0.1

3、9）20=98.96%,由于各种动物的耐受近交的能力不同，因而建立近交系的的近交系数的标准也不同。如，小鼠和大鼠可以忍受最大程度的近交，近交系数要求大于98.6%，而鸡则不同，过度近交很难成活保存，故鸡的近交系数一般为37.5%50%，相当于全同胞交配23个世代。我国学者培育出西双版纳小耳猪JB、JS近交品系，两品系个体的近交系数95.2%，相当于兄妹交配15代，是国际上第一株大型哺乳类动物的近交系。,近交系动物的特征,1. 基因纯合性。通过持续20代以上的近亲繁殖，基因已高度纯合化，在理论上应达到98.96%以上。2. 遗传稳定性。由于近亲繁殖增加了在特定部位纯合子互相配合的可能性，因而减少

4、了遗传变异，因为基因高度纯合，所以纯合子基因可以极稳定地传给后代。3. 同基因性。基因型或称遗传型是一切遗传基础的总和，是内在的遗传本质。同基因性，是指一个近交品系中所有个体在遗传上是同源的。4. 表现型的均一性。表现型是基因在环境因素作用下表现出来的、可被直接观察到的亲代的性状。在相同环境因素的作用下，由于遗传是均质的，所以其表现型是均一的，反应性是一致的。,5. 个体性。由于不同品系都具有不同的遗传组成和生物学特性，所以不同品系各有不同的特性。6. 分布的广泛性。许多近交系在国际上广泛分布，从而有可能在世界各国之间进行比较研究。 7. 资料可查性。近交品系的一个最有价值的特点是具有相当数量

5、的背景资料，在培育和保种的过程中都有详细的记录，目前已有相当数量的文献记载着各个品系的生物学特征。 8.可分辨性。每个近交品系都具有自己独特的生化标志基因等特点，研究工作者可定期进行检测，以识别所使用的近交品系动物是否可靠,近交系动物的应用,近交系动物应用于实验中，只需少量的动物。近交系动物用于组织细胞或肿瘤移植的实验中。近交系动物是进行基因连锁分析、比较遗传学、生理学和发育生物学研究的理想模型。某些近交品系可成为肿瘤病因学、肿瘤药理学研究的重要模型。多个近交品系同时使用，可使不同研究者分析不同遗传基因对某实验的影响，或者观察实验结果是否具有普遍意义。,常用的近交系大小鼠,1常用的近交

6、系小鼠 1）A；2）AKR；3）BALB/c ； 4）CBA ；5）C3H ；6）C57BL/6 ；7）DBA/1 ；8）DBA/2 2常用的近交系大鼠 1）ACI；2）BN；3）BUF ；4）COP；5）F344 ；6）SHR ；7）LEW。,杂交群动物的基本概念,两个不同近交系之间进行有计划的交配，杂交所产生的第一代动物，即F1代动物。具有两亲本遗传特性或产生新的遗传特性。,特点： 1、杂交一代的动物由于具有杂交优势，因此其生活能力，对外界环境的适应能力和抗病力等都较其亲代强。 2、避免了由于近亲交配所引起的衰退现象。 3、每只动物具有相同的基因组合和基本一致的表现型，对外界刺激和实验具有

7、一致的反应性和敏感性。,杂交群动物的特点及其应用,具有杂交优势，生命力强，表现为适应性和抗病力强，繁殖力高，没有近交系那种近交衰退的现象;适合于进行各种长期慢性实验具有与近交系动物相类似的遗传均质性(遗传和表现型上)，因而动物试验的可重复性好 ,适用于营养、药物、病原和激素的生物评价。具有杂合的遗传组成，适用于免疫学和发育生物学等领域的研究。国内外广泛采用，分布广，研究结果便于类比和交流。,突变系正常染色体的基因发生了突变，从而具有某种特殊性状表型的各种遗传缺陷品系。如，裸鼠、糖尿病大鼠等。突变系动物可分为由自发突变而来和人工诱变而来的两大类。,突变系动物（mutant strain

8、 animals）,可见突变，动物发生了可由肉眼观察到的变异。如，基本没有被毛及胸腺发育不全的裸小鼠、裸大鼠等. 生化突变，动物的某一生化功能发生改变，甚至丧失。如严重联合免疫缺陷小鼠。致死性或条件致死性突变，致死性突变有显性和隐性两种，如镰状红细胞贫血症就是隐性致死性突变。也有一些致死性突变，在某种条件下动物可以存活，缺乏这种条件动物则会致死。,突变系动物的特点及其应用,遗传机制的研究，如作染色体的基因定位等; 人类疾病的动物模型，是其最主要的应用领域。有些突变使动物的免疫系统功能改变，有的使内分泌系统、心血管系统功能发生改变。从而为医学生物学研究，提供了在实验动物身上复制各种人类疾病并加

9、以研究的可能。突变系动物还可以用于其他的领域，如，利用免疫缺陷动物作环境质量监测等。,常用的突变系动物,已报道的突变系小鼠有100多种，常用的有：联合免疫缺陷小鼠裸小鼠尿崩小鼠侏儒症小鼠糖尿病小鼠肌萎缩症小鼠等,裸鼠带有纯合裸基因（nu/nu）的小鼠具有两个主要的缺陷特征：（1）毛发生长发育异常，表现为全身形似无毛，呈裸体外表；（2）无胸腺，仅有胸腺残迹或异常的胸腺上皮，这种上皮不能使T细胞正常分化，缺乏成熟T细胞的辅助、抑制及杀伤功能，因而细胞免疫力低下。主要应用于人类的免疫细胞的移植和肺肿瘤的移植研究。,1962年英国格拉斯医院Grist 在非近交的小鼠中偶然发现有个别

10、无毛小鼠，后来证实是由于基因突变造成的并伴有先天性胸腺发育不良，称为裸小鼠(nude mice)，用“nu”表示裸基因符号。裸小鼠是由于染色体上等位基因(第11对染色体上)突变引起的，已失去正常胸腺，原胸腺残留结构部分上皮样细胞呈巢状排列而部分呈外分泌腺结构。裸鼠淋巴结胸腺依赖区的淋巴细胞消失，外周血中淋巴细胞数目减少。1969年丹麦Rygaard首先将人类结肠腺癌移植裸小鼠成功，为免疫缺陷动物研究和应用开创了新局面。,突变系大鼠有20多种,常用的有：肥胖症大鼠裸大鼠新西兰高血压大鼠糖尿病大鼠等,严重联合免疫缺陷小鼠（Severe Combined Immunodeficient M

11、ice, 简称SCID小鼠）,1983年由美国学者Bosma首先发现于C.B-17近交系小鼠，是位于第16号染色体的称之为SCID的单个隐性突变基因所导致。 SCID小鼠外观与普通小鼠无异，体重发育正常。但胸腺、脾、淋巴结的重量一般均不及正常的30%，组织学上表现为淋巴细胞显著缺乏。其胸腺多为脂肪组织包围，没有皮质结构，仅残存髓质，主要由类上皮细胞和成纤维细胞构成。主要应用于人类肿瘤移植研究，尤其在免疫导向治疗抗白血病药物的筛选、残留白血病细胞的检出和淋巴瘤的研究当中。,封闭群动物的基本概念,一个长期与外界隔绝、雌雄个体之间能够以非近亲随机交配，至少连续繁殖15代以上的一个动物种群。通常把5

12、年以上不从外部引种，只在群体内进行随机交配，为日常提供实验动物而进行生产的群体称之为封闭群。优点：群体基因稳定和杂交优势缺点：容易受到选择、近交和随机遗传漂变的影响而发生遗传上的改变。时空对封闭群也有很大影响。,封闭群,长期不引入新的血缘.虽然群内作随机交配繁殖，但“近亲系数”仍会逐渐上升；为了防止“近亲系数”上升过快，要求群体数量不能过小，国际实验动物科学委员会规定，封闭群动物每代的“近交系数”递增不能超过1%，要求群体内具有生殖力的所有个体都能自由参与交配繁殖，符合有效群体的要求。,常用的封闭群动物,昆明小鼠、 NIH小鼠、 ICR小鼠、 LACA小鼠、 Wistar大鼠、 SD（S

13、prague-Dawley）大鼠、 Dunkin Harleg豚鼠、青紫蓝兔、新西兰兔等。,现代遗传工程产生的新型品系转基因动物,以实验方法导入的外源基因在动物染色体基因组内稳定整合并能遗传给后代的一类动物。使用细胞嵌合技术，雌核发育技术等遗传工程技术，可以培育出一些有特殊用途的新型品系。如使两个不同近交系的早期胚胎粘合，形成嵌合胚胎，经胚胎移植产出后代，称为嵌合体小鼠。又如，用两个不同的近交系交配，产出的早期受精卵，取出雄性原核，使雌性原核加倍为二倍体，然后用胚胎移植技术产出后代。被称为单亲纯合双倍体动物，具有母本的纯合性状。,第三章实验动物微生物质量控制,一、为什么要对实验动物

14、进行微生物控制？ 1、微生物：是一群肉眼直接看不见的，必须用光学显微镜或电子显微镜放大几百倍，几千倍甚至几万倍才能观察到的微小生物。 2、微生物的分类：病原微生物和非病原微大多数微生物对人类无害或有益，如：乳酸杆菌、双歧杆菌等。但有一些微生物对人类、动物，植物造成危害，引起各种疾病，甚至成为毁灭性的灾害，这些具有致病性的微生物称为病原微生物。 3、病原微生物侵入实验动物群，可发生以下几种情况：（1）急性传染病爆发流行。（2）急性和隐性感染。（3）成为潜在的传染源。,后果：可引发动物疫病表现临床症状和病理改变，甚至发生死亡。使动物繁殖率下降和动物发育不良，影响动物自身的稳定性和反应性。

15、引起人兽共患的病。人兽共患病也称为动物源性传染病，是指受感染动物为传染源传播给人类的疾病，其中还包括自然疫源性疾病。沙门氏菌又名副伤寒是人兽共患病之一。急性型爆发，发病急，死亡快。亚急性型呈肠炎症。慢性型消瘦或下痢样稀便，产仔数减少，也有部分隐性感染，长期带菌者。因此，严重影响动物实验的正常进行，并对饲养人员和实验人员的健康和安全造成威胁。人兽共患病原菌还有志贺氏菌、布氏杆菌、结核分枝杆菌等，因其影响实验动物的质量，同时又威胁饲养人员和实验者的身体健康，应坚决予以排除。, 有的微生物污染生物制剂、肿瘤或细胞株以及种子动物等，还可将病原体扩大至其他单位、地区或国家，危害更大。,条件性致病菌

16、随着饲养管理水平的提高，动物的免疫力提高，有些细菌如金黄色葡萄菌等，一般不引起动物自然发病。当动物在某些诱因的刺激下（如射线照射、营养失调、潮湿、拥挤、氨浓度过高、动物处理和给药等），机体抵抗力下降时，导致疾病发生，甚至爆发流行。目前在我国，条件性致病菌在实验动物中影响较为严重，不仅影响动物生产，而且干扰动物科学实验。, 正常菌群的细菌：对实验动物即使是正常菌也会影响其生理数据和实验的重复性。实验研究证明，许多正常菌群成员在受到内外环境的改变而发生菌群失调时，可发生数量的变化和位置的改变，由非致病菌转变成致病菌，从而对动物实验产生不同程度的干扰。,因此对实验动物进行微生物学、寄生虫学质量控

17、制是实验动物标准化的重要内容之一。,实验动物的微生物学分类,按微生物学控制标准，或根据微生物净化程度，实验动物在我国分为四类，普通动物（Conventional animals,CV）、清洁动物(Clena animals,CL)、无特殊病原体动物（Specific pathogen free animals）或称SPF动物、无菌动物（Germfree animals,GF）本节讲述各类动物的特性及应用。,一、普通动物,1、普通动物（Conventional animals,CV）是在微生物学控制上要求最低的动物，它要求不携带人兽共患病和动物烈性传染病的病原。 2、微生物控制上：要求最低。如普

18、通小鼠只排除鼠痘病毒、流行性出血热病毒、淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒、沙门氏菌、皮肤真菌、弓形体及体外寄生虫等对人体和动物危害较大的病原体。 3、饲养管理：饲养在开放系统中。（1）饲料、垫料要消毒，并防止野鼠的污染；（2）饮水要符合城市饮水卫生标准；（3）青饲料应经洗消后再喂；,（4）外来动物必须严格隔离检疫；（5）房屋要有防野鼠、防昆虫的设备；（6）要坚持经常性的环境卫生及笼器具的清洗消毒，严格处理淘汰及死亡动物；,（7）限制无关人员进入动物室。 4、应用：国际上普遍认为仅可作生物医学中示教之用，或作为某些科学研究为探索方法而从事的预试验之用，不可供科研、生产和检验之用。二、清洁动

19、物 1、定义：清洁动物(Clena animals,CL)，除普通动物应排除的病原外，不携带对动物危害大和对科学研究干扰大的病原，这类动物称做清洁动物。,2、微生物控制上：清洁动物比普通动物要求排除的微生物和寄生虫多，但比SPF动物少。清洁动物除肉眼观察无病外，尸体解剖时，主要脏器、组织无论是眼观还是病理组织切片均没有病变3、饲养管理：清洁动物饲养于温湿度恒定的半屏障系统中。,（1）所用的饲料、垫料、笼器具等都要经过消毒灭菌处理；（2）饮用水除用高压灭菌外，也可采用pH2.52.8的酸化水；（3）工作人员需换灭菌工作服、鞋、帽、口罩等进入动物室进行操作。 4、应用：国际上普遍认为清洁

20、动物仅适合于短期或部分科研实验。我国针对自己的实际情况，认为这类动物目前可适用于大多数科研实验，应是国内科研工作主要要求的标准级别的实验动物，可应用于生物医学研究的各个领域。,三、无特殊病原体动物,1、定义：无特殊病原体动物（Specific pathogen free animals）或称SPF动物，是指动物体内无特定的微生物和寄生虫存在，但带有非特定的微生物和寄生虫的动物。 2、微生物控制上：该级动物除一、二级动物应排除的病原外，不携带主要潜在感染或条件致病和对科研实验干扰大的病原。目前国际上对SPF动物的要求不同，质量标准也不一样。两种观点。 3、饲养管理：SPF动物来源于无菌动物，必

21、须饲养在屏障系统中，实行严格的微生物学控制。,4、应用：国际上公认SPF动物适用于所有科研实验，是目前国际标准级别的实验动物。各种疫苗生产所采用的动物应为SPF级动物。,四、无菌动物（一）定义：无菌动物（Germfree animals,GF）指无可检出一切生命体的动物，进一步说，是指用现有的检测技术在动物体内外的任何部位均检不出任何活的微生物和寄生虫的动物。此微生物指病毒、立克次体、细菌（包括螺旋体、支原体）、真菌和原虫。（1）这个“无”是相对而言的。（2）无菌动物必须是生来就是无菌的动物。（二）无菌动物的特点 1、形态学改变（1）消化系统盲肠膨大，肠壁菲薄，盲肠（包括内

22、容物）的总重量是普通动物的510倍。,（2）血液循环系统心脏相对变小，白细胞数量少，与无病原体入侵有关。,（3）.免疫系统免疫机能基本上是处于原始状态，胸腺和淋巴结处于功能较不活跃状态，脾脏缩小。2、生理学改变（1）免疫功能低下，血清中IgM、IgG水平低，免疫功能处于原始状态，应答速度慢，过敏反应、对异体移植物的排斥反应以及自身免疫现象消失或减弱。（2）生长率无菌条件下对不同种属影响不同。无菌禽类生长率高于同种的普通禽类；无菌大小鼠；无菌豚鼠和无菌兔生长率比普通者慢。,（3）生殖无菌条件对动物生殖影响不大。大鼠和小鼠因出生无感染，身体较好，其繁殖率高于普通大小鼠；无菌豚鼠及兔比

23、普通者繁殖力低，可能因盲肠膨大之故。（4）代谢血中含氮量少，肠管对水的吸收率低，代谢周期比普通动物长。,（5）营养无菌动物体内不能合成维生素B和K，故易产生这两种维生素的缺乏症。（6）抗辐射能力无菌动物抗辐射能力强。（7）寿命无菌动物的寿命普遍长于普通动物。,（三）无菌动物的应用 1.在微生物研究中的应用（1）某些疾病的病原研究。（2）微生物间的拮抗作用研究。（3）病毒病研究。（4）细菌学研究。（5）真菌感染研究。（6）原虫感染研究。,2.在免疫学研究中的应用； 3.在放射医学研究中的应用 4.在营养、代射研究中的应用； 5.在老年病学研究中的应用 6.在心血管疾病研究中的应用

24、； 7.在毒理学研究中的应用 8.在肿瘤研究中的应用； 9.在宇航学研究中的应用 10.在寄生虫学研究中的应用,五、悉生动物,（一）基本概念悉生动物（Gnotobiotic animals,GN）也称已知菌动物或已知菌丛动物（Animal with known bacterialuflora），是指在无菌动物体内植入已知微生物的动物。按我国的微生物学控制分类，同无菌动物属同一类动物，必须饲养于隔离系统。根据植入无菌动物体内菌落数目的不同，悉生动物可分为单菌（Mono-xenie）、双菌（Dixenie）、三菌（Trixenie）和多菌(Polyxenie)动物。（二）悉生动物的特性 1 、悉

25、生动物来源于无菌动物，其体内外有已知种类的几种微生物定居。,2、悉生动物肠道内存在能合成某种维生素和氨基酸的细菌，不易发生维生素缺乏症。3、在有些实验中可作为无菌动物的代用动物。4、在免疫学实验中，无菌动物不发生迟发性过敏反应，而感染一种大肠杆菌的悉生动物就可以发生迟发性过敏反应。,（三）悉生动物在生物医学研究中的应用可作为研究微生物与宿主、微生物与微生物之间相互作用的动物模型。1、微生物学研究 2、抗体制备研究 3、克山病病因学的研究 4、微生物和寄生虫相互关系研究 5、其它方面的研究。,实验动物的质量监测,实验动物质量监测的意义实验动物质量检测的依据和方法实验动物常见的感染病原,

26、威胁人类健康出血热、结核病、狂犬病、弓形体等影响动物生产鼠痘病毒感染、仙台病毒感染、兔出血热病毒感染影响实验结果污染实验材料寄生虫对实验动物的影响,1.感染的危害,普通级实验大小鼠携带多种病原,普通级小鼠（个体生产）携带16种病原，大鼠携带13种病原。,普通环境中的实验小鼠（动物实验）携带9种病原。,普通环境中的大小鼠动物尸检可见明显的肺病变和肝病变。,保证实验研究的顺利进行和工作人员的身体健康。确保实验数据的准确性和可重复性。,2.监测的意义,生产供应的动物应定期监测，接受质量检测部门的监督。2. 进行动物实验的动物（超过3个月）最好应用哨兵动物检测，评价实验结果。,实验动物的

27、微生物学、寄生虫学质量监测,依据？ GB GB/T ,实验动物质量检测依据和方法,2.检测方法,采样,要求,方法,成年动物,哨兵动物法（CD1小鼠）,随机抽样法（例如四角和中央）,检测频率,普通级动物：三个月至少检测一次。,清洁级动物：三个月至少检测一次。,无特定病原体动物:三个月至少检测一次。,无菌动物：每年检测动物一次。每2-4周检查一次动物的生活环境标本和粪便标本。,我省近5年实验动物微生物、寄生虫感染状况,实验大小鼠威胁人类健康的病原：流行性出血热病毒，淋巴脉络丛脑膜炎病毒影响实验结果的病原：小鼠脑脊髓炎病毒（TMEV），小鼠肝炎病毒（MHV），大鼠冠状病毒（RCV），线虫新发病原

28、：大小鼠细小病毒，乳鼠腹泻病毒，小鼠诺如病毒，螺杆菌，类阿米巴原虫。条件致病病原：绿脓杆菌、嗜肺巴斯德杆菌、金黄色葡萄球菌、鞭毛虫等,第二节实验动物微生物控制方式,实验动物微生物控制要坚持的原则：预防为主，从动物流行病学的三个基本环节传染源、传播途径和易感动物着手。强调预防医学的作用同时，又强调隔离手段的重要性大于预防接种。一、传染源的控制传染源主要是患病动物（包括潜伏期动物、临床症状的显期动物和恢复期动物）和携带病原体动物。二、切断传播途径三、保护易感动物,四、动物健康状况的监护,1.整体状态的观察 2.个体检查 3.采食和饮水观察 4.特殊检查疑似患病动物须隔离在笼内，放在生产

29、区外的隔离检疫区，作进一步的特殊检查。（1）尸体剖检（2）病理学检查（3）微生物学检查。（4）血液学检查（5）生物化学检验法,一、监测目的二、监测的种类和方法根据监测的对象不同，可分为实验动物病毒学监测，实验动物细菌学监测，实验动物真菌学监测和实验动物寄生虫学监测4种类型。（一）实验动物病毒监测方法 1. 血清学检查适用于各级各类实验动物的经常性检查和疫性普查。目前我国常用方法包括血球凝集（HA）和血球凝集抑制（HI）试验、免疫荧光试验（IFA）、免疫酶染色试验（IEA）和酶联免疫吸附试验（ELISA）。,第三节实验动物微生物、寄生虫质量监测,2.病原学检查,适用于动物群中有疾

30、病流行，需要检出病毒或确证病毒存在的情况。（1）病毒分离培养与鉴定（2）病毒颗粒、抗原或核酸的检出：免疫组化的方法；HA和HI方法；电镜或免疫电镜技术；聚丙烯酰胺凝胶电脉（PAGE）；核酸分子杂交技术或聚合酶链反应（PCR）。（3）潜在病毒的激活：对于潜在性病毒感染，可用免疫抑制剂或应激剂等使动物机体抵抗力下降，使潜在病毒激活，易于检出。（4）抗体产生试验：将待检动物的组织悬液接种于无常见病毒的动物（最好是SPF动物或无菌动物），一个月后采血，用已知抗原检查有无相应抗体存在。,（二）实验动物细菌学监测方法,1、病原菌的分离与培养，是目前最常用的方法。2、采用血清学方法进行诊断，结合分离培养结果

31、最后做出诊断。如鼠伤寒沙门氏菌、鼠棒状杆菌、泰泽氏菌和霉形体等。 3、采用病变组织压片、镜检的方法进行检查，并结合病理检查结果最后做出诊断。如泰泽氏菌，由于不能在人工培养基上生长。（三）实验动物真菌学监测方法目前主要采用分离培养法，所用培养基为沙氏培养基。结合菌落特点和镜下染色检查可进行种属鉴定，有时还需借助于生化反应结果和免疫学方法做出诊断。,（四）实验动物寄生虫学监测方法1.体外寄生虫可肉眼观察体表有无体外寄生虫，也可用透明胶纸粘取毛样，检查体外寄生虫及其虫卵。2.肠道寄生虫采集粪便，肉眼观察有无可见虫体。采用漂浮法、沉淀法浓集粪样检查虫卵、原虫卵囊或包囊。,3.血液寄生虫采集末

32、梢血液，制成厚、薄涂片，染色后镜检。 4.组织内寄生虫在解剖动物时，对疑为寄生虫感染的部位作组织压片、切片检查。（五）结果判定在检查各级动物中如有一项指标不符合该级别标准要求，则头判为不符合该级别标准。,三、监测程序和要求四、我国实验动物微生物学、寄生虫学监测标准我国啮齿类和兔类实验动物微生物学和寄生虫学监测等级标准（GB 1492294）（见表3.2）。,对于检测项目，不同国家间，同一国家的不同地区间均有所不同，存在着争论。另外，就一个国家的标准而言也不是永恒不变的，也应根据疾病的流行情况和新的疫病的出现而进行相应的修改，使其日臻完善。,第四节实验动物发生污染时的对策,一、病原体污

33、染时首先应采取的对策 1、掌握污染情况 2.污染动物的隔离。从最初发现污染，到再次检测确定无病原体污染。 3.繁殖群发生污染，多数会出现繁殖效果异常 4.找出污染原因常发生的污染原因有以下几种情况：（1）隐性感染动物的引进。（2）使用污染的实验材料。（3）野生动物的侵入。（4）用具、设备的缺陷，操作的失误。二、污染动物的净化 1.剖腹产（子宫摘取术）净化 2.淘汰,三、污染饲养室的净化,1.消毒药的喷雾常用的消毒药有氯化铵、次氯酸钠、碘剂和洗必太等。正确的喷雾量很难表示。杀灭表面附着菌一般使用30ml/m2，杀灭空气中浮游菌，使用6.510ML/M3。2.紫外灯照射 3.

34、甲醛熏蒸第五节卫生设备、保健及安全消毒与灭菌消毒，就是用物理方法、化学方法或生物方法杀灭或清除外界环境中的病原微生物。（1.杀灭或清除；2.病原菌；3.无害化）灭菌,杀灭物体上的所有微生物（包括病原微生物）称灭菌。是一种消毒措施。下面介绍动物实验室通常采用的消毒灭菌法。,一、热处理,常利用高温灭菌。如干热灭菌、高压蒸气灭菌锅、焚烧、煮沸消毒。二、紫外线照射紫外线具有强的杀菌作用，可用于房舍用具的消毒。缺点：（1）对物质的内部和背面无效；（2）对人和动物照射有害。距离1m的15W紫外灯，照射15分钟，一般能杀灭病原微生物。三、消毒药处理用于杀菌药剂种类很多，一般可用来作消毒药。理

35、想的消毒药应具备：（1）对多种微生物有作用；（2）对人类与动物无刺激性且毒性要低；（3）环境的变化，对降低药效影响要小；（4）腐蚀性要低；（5）不具有不快的气味。（6）具有很好的洗净效果；（7）原液或稀释液都较稳定；（8）易配制成不同浓度的水溶液。实际上具上述全部特性的消毒药是不存在的。常用消毒药的特性，有效性，常用浓度以及使用注意事项见表4.1。,五、饲养器具的消毒与灭菌,饲养器具基本上是采用蒸气高压灭菌。不耐热或大小不适于高压灭菌的器具，采用消毒药物或紫外线照射灭菌。 1.饲养架（1）高压灭菌锅灭菌；（2）火焰灼烧；（3）喷雾消毒剂；（4）甲醛熏蒸。 2.笼盒，食具与饮水瓶（1）高压灭菌锅灭菌。（2）水瓶可用消毒液浸泡消毒。此时必须考虑消毒药物的残留。 3.垫料高压灭菌（易返潮），环氧乙烷（有残留）。 4.饮水高压灭菌（时间要足够）；添加漂白粉（次氯酸钠）；加盐酸（酸化水，PH保持3.0） 5.污物、动物尸体通常用焚烧和深埋处理。,思考题： 1.实验动物按照遗传学控制可以分为几类？ 2.实验动物按照微生物控制可以分为几类？ 3.何为SPF动物？有何特点？简述目前该种实验动物的应用情况。,