月季的花药培养:
1、被子植物的花粉发育
(1)被子植物的雄蕊通常包含花丝、花药两部分。花药为囊状结构,内部含有许多花粉。
(2)花粉是单倍体的生殖细胞。被子植物花粉的发育要经历小包子四分体时期、单核期和双核期等阶段。
2、产生划分植株的两种途径:一种是花粉通过胚状体阶段发育为植株,另一种是花粉在诱导培养基上先形成愈伤组织,再将其诱导分化成植株。
两种途径之间没有绝对的界限,主要取决于培养基中激素的种类及其浓度配比。
3、影响花药培养的因素:
(1)材料的选择:一般来说,在单核期(通常是完全未开放的花蕾),细胞核由中央移向细胞一侧的时期,花药成功率。
(2)培养基的选择。
(3)此外,亲本植株的生长条件、材料的低温预处理以及接种密度等对诱导成功率又一定影响。
4、材料选取方法:醋酸洋红法和焙花青-铬矾法
5、步骤:
材料的选取→材料的消毒→接种和培养→结果分析与评价
知识点拨:
1、材料的选择要是选择单核期以前的花药接种,质地幼嫩,极易破碎;选择单核期以后的花药接种,花瓣已有些松动,又给材料的消毒带来困难,通常不选择盛开或略微开放的花。
2、选择月季花粉的时期为完全未开放的花蕾。材料的选择是花粉植株能否培养成功的主要影响因素之一,不同植物及同一植物的不同生理状况诱导成功率都不相同。
3、选择花药时,确定花药发育时期最常用的方法是醋酸洋红法。某些植物的花粉不易着色需采用焙花青-铬矾法,这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。
4、材料的消毒过程:
花蕾用体积分数为70%的酒精浸泡30s→无菌水冲洗→吸干表面的水分,放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中2~4min→无菌水再冲洗3~5次。
5、接种和培养过程中注意的情况
在无菌条件下剥离花药时要尽量不损伤花药(否则接种后容易从受伤部位产生愈伤组织),同时还要彻底除去花丝。因为花丝的存在不利于愈伤组织或胚状体的形成。
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