1、月季的花药培养,花的结构,雌蕊 的结构,知识扩展,植物的花药培养在育种上有什么意义?,缩短了育种周期后代为纯合子,花粉粒,花丝,花药:囊状结构,内有很多花粉,2、由花粉母细胞(即小孢子母细胞) 花粉, 即:单倍体的生殖细胞。 3、阶段:四分体时期、单核期、双核期,(一)被子植物的花粉发育,1、雄蕊,一、基础知识,减数分裂,4、过程:,减数分裂,有丝分裂,1花粉母细胞(2n),4个小孢子(小孢子四分体)(n),减分,有分,1个花粉管细胞核(n),1个生殖细胞核(n),有分,2个精子,单核居中期(n),单核靠边期(n),4、过程:,即4个单倍体细胞,注意:,1、二核花粉粒:只含花粉管细胞核和生殖细
2、胞核。 2、三核花粉粒:一个营养核和两个精子。 3、两个精子和一个营养核的基因型相同。 4、减数分裂中四分体:联会后一对同源染色体中含有 四个姐妹染色单体。 小孢子细胞四分体期:花粉母细胞经减数分裂形成的4个连在一起的单倍体细胞,(二)产生花粉植株的两种途径,形成原因:主要取决于培养基中的激素的种类及其浓度的配比,为什么把胚状体到丛芽的 过程称为分化,而把从愈伤组织到丛芽的过程成为再分化?,胚状体的结构及其发育过程与种子相似,所以把胚状体到丛芽的过程称为分化,而把从愈伤组织到丛芽的过程成为再分化,部分花药通过胚状体途径形成小植株,烟草花药培养,胚状体发育途径,愈伤组织转接种到再生培养基,愈伤组
3、织分化形成再生植株,水稻花药培养,愈伤组织发育途径,部分花药产生愈伤组织,接种在平板上的水稻花药,体细胞胚(胚状体): 在组织培养过程中,某些体细胞在形态上转变为与合子发育成的胚非常相似的结构,发育过程亦与合子胚类似,被称为体细胞胚(胚状体)。,人工种子,又称人造种子、合成种子或无性种子,就是将组织培养所产生的体细胞胚、不定芽、顶芽、腋芽或小鳞茎等繁殖体,包裹在能提供营养的胶囊(人造胚乳)里,再在外面包上一层具有保护功能和防止机械损伤的外膜(人造种皮),造成一种类似种子的结构,能在一定的条件下萌发生长,形成完整植株。,(三)影响花药培养的因素 1、材料的选择 不同植物 同一植物的不同生理状况(
4、花期早期初花期) 合适的花粉发育期(单核靠边期) 植株生长条件、材料低温预处理、接种密度等 2、培养基的组成,五月初至中旬,为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难? 答:花瓣松动后,微生物就可能侵入到花药,给材料的消毒带来困难。,(一)材料选取,2、通过镜检来确定是否处于适宜的发育期。 最常用的方法:醋酸洋红法 某些植物的花粉细胞核不易着色:焙花青-铬矾法,花粉细胞核染成蓝黑色。,1、从花药看:月季的初花期 从花粉看:单核期靠边期 从花蕾看:未完全开放的,(二)、材料的消毒:,花蕾,(70酒精) 大约30s,(无菌水) 清洗,(无菌吸水纸)吸干水分,(1氯化汞溶液) 24min,(无菌水) 冲洗
5、,月季花蕾的消毒与菊花外植体的消毒相比较,二者有何不同?,在酒精消毒前,花药不需要预先用流水冲洗、洗衣粉洗涤和软刷刷洗,提示: 用于培养花药,实际上多数未熟,由于它的外面有花萼、花瓣保护,通常处于无菌状态,所以只要将整个花蕾或幼穗消毒即可。,剥取花药,接种花药,培养,分化培养基培养,鉴定和筛选,不要损伤花药?,要彻底除去花丝?,常常会出现染色体倍性的变化?,每个培养瓶接种 (710 ) 个花药?,花药长出愈伤组织还要转移到哪?,主要原因是营养核和生殖核融合造成的,25左右,不需要光照。 幼小植株形成后才需要光照。,(三)、接种和培养,1、关于被子植物花粉发育的说法,不正确的是( ) A、花粉粒
6、是在花药中的花粉囊里形成的 B、被子植物精子的形成是直接减数分裂的结果 C、被子植物的花粉的发育要经历四分体时期、单核期、双核期等阶段 D、花粉粒在发育过程中,核先位于细胞一侧,再移到细胞中央,BD,2、月季花药培养时的花粉粒最好是( ) A、四分体时期 B、单核居中期 C、单核靠边期 D、二核或三核花粉粒,C,3、基因型为AaBb的水稻(条染色体)的花药通过无菌操作,接入试管后,在一定条件下培养成试管苗。 ()愈伤组织是花粉细胞分裂形成的不规则的细胞团,愈伤组织必须从培养基中获得()、( )和小分子有机物等营养物质。 ()要促进花粉细胞的分裂分化,培养基中应有()( )两种激素。 愈伤组织分
7、化是指愈伤组织形成芽和根,由芽发育成叶茎。这一过程必须给予光照,其原因是()利用光能制造有机物促进试管苗生长发育。 ()试管苗的细胞核中有()条脱氧核苷酸链。试管苗的基因型有:,水,无机盐,生长素,细胞分裂素,叶片,24,AB Ab aB ab,4(9分)草莓生产上传统的繁殖方式易将所感染的病毒传播给后代,导致产量降低。品质变差。运用微型繁殖技术可以培育出无病毒幼苗。草 莓微型繁殖的基本过程如下:外植体 愈伤组织 芽、根 植株 请回答: (1)微型繁殖培育无病毒草莓苗时,一般选取_ 作为外植体,其依据是_ _ 。 (2)在过程中,常用的MS培养基主要成分包括大量元素、微量元素和_,在配制好的培
8、养基中,常常需要添加_,有利于外植体启动细胞分裂形成愈伤组织。接种后25d,若发现外植体边缘局部污染,原因可能是_ 。 (3)在过程中,愈伤组织在诱导生根的培养基中未形成根,但分化出了芽,其原因可能是_ 。,茎尖、根尖,茎尖、根尖不含病毒,有机物,植物激素,外植体消毒不彻底,培养基中生长素类物质和细胞分裂素类物质用量的比值偏低,课后作业1,F2代紫色甜玉米的基因型组成可能为Aasusu或AAsusu。如果运用常规育种方法,将F2代中的紫色甜玉米与白色甜玉米(aasusu)进行测交,可以选择出基因型为AAsusu纯种紫色甜玉米。但这种方法比较繁琐,耗时也较长,需要至少三年的选种和育种时间。,如果利用花药培养的技术,在F1代产生的花粉中就可能有Asu的组合,再将花粉植株进行染色体加倍,就可以直接得到紫色甜玉米的纯合子(AAsusu)。这种方法可以大大缩短育种周期。,作业2,植物组织培养技术与花药培养技术的 相同之处是:培养基配制方
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