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泰山松花粉多糖对鸡混合感染B亚型禽白血病病毒和禽波氏杆菌的免疫调理作用

花匠小妙招
2024-10-30 21:01

【摘要】： 禽胚胎性疾病是一类由多种病原引起的综合性疾病，可造成鸡胚发育受阻，孵化率降低，死亡率升高等，给养禽业造成重大的经济损失，其中以传染性胚胎病危害最严重。禽波氏杆菌病(Bordetellosis)是最近几年发现的一种禽的新型细菌性胚胎性疾病，它能引起鸡胚和雏鸡的急性死亡、孵化率降低(10%-40%)，及成年鸡的眼炎等。而禽白血病(Avian Leukosis, AL)不但是一种重要的免疫抑制病，也是一种主要的病毒性胚胎性疫病。近几年，养禽业中多种病原混合感染的现象普遍存在，在胚胎性疾病中禽白血病病毒(ALV)和禽波氏杆菌(B. avium)混合感染的现象也越来越普遍。由于感染后症状、病变不典型，导致疾病的防控更加困难。由于动物食品药物残留和食品安全问题的存在，所以开发和研究新型植物免疫增强剂势在必行。本研究选择泰山松花粉多糖(TPPPS)作为免疫增强剂用于B. avium和B亚型禽白血病病毒(ALV-B)的混合感染中，为控制免疫抑制性病毒与细菌的混合感染提供理论依据和技术支持，为减少抗生素的使用，生产绿色安全的畜禽产品奠定良好的基础。本研究内容主要分为以下三部分：1鸡胚胎性疫病病原的分离鉴定2011年，辽宁铁岭某种鸡孵化场出现孵化率降低、死淘率升高的现象。本实验室通过细菌分离培养进行菌落形态、培养特征、生化特性及血清学鉴定等对该孵化场送检的病死鸡胚和雏鸡进行了细菌学检测。最终检出B. avium、奇异变形杆菌、大肠杆菌、绿脓杆菌和沙门氏菌，其中B. avium和奇异变形杆菌的检出率分别高达76.44%和61.36%，二者混合感染率为51.83%。本研究通过分子生物学检测，采用病原菌23S rRNA基因的共同保守序列设计的一对引物，以及根据临床常见致病菌16S-23S rRNA基因间隔序列(ISR)两端的16S rRNA和23S rRNA保守序列设计的一对通用引物，分别对其中两株分离率较高的菌株进行了PCR扩增，并对其DNA序列进行了测定。结果显示，所得到的DNA片段与GenBank中收录的登录号为HM545299的B. avium和登录号为AY993943的奇异变形杆菌相应核苷酸序列同源性分别高达99.5%和98.7%。另外，本研究通过ALVp27抗原检测试剂盒对禽白血病病毒(ALV)进行了检测，ALV的检出率为6.12%。本研究最终确定了B. avium与ALV的混合感染在养禽业中的存在，给养禽业造成了一定的经济损失。2TPPPS对ALV-B所致鸡免疫抑制条件下混合感染B. avium的免疫调理作用病毒(尤其是免疫抑制性病毒)和B. avium的混合感染，在养禽业中已经存在，造成的经济损失越来越严重，严重威胁着养禽业的发展。另外，由于药物残留和食品安全问题越来越严重，所以新型植物免疫增强剂的开发和研究势在必行，正逐渐成为国内外养禽业研究的新热点。本研究中分别设计了ALV-B+B. avium组，ALV-B+B. avium+TPPPS组，B. avium单独感染组，B. avium+TPPPS组和试验对照组，对TPPPS的免疫调节作用进行了研究。相关指标的检测结果显示，ALV-B对抗体的产生、淋巴细胞比率、淋巴细胞的转化、IL-2和IFN-γ的合成和分泌等造成了明显的抑制作用，并且延长了B. avium的病程，增强了其致病性。在TPPPS的免疫调理作用下，明显缓解了ALV-B造成的免疫抑制，提高了雏鸡的体液免疫和细胞免疫水平。总之，TPPPS对混合感染ALV-B和B. avium的雏鸡发挥了免疫调理作用，增强了机体的免疫机能。通过本试验的研究，为TPPPS作为新型高效的免疫调节剂应用于免疫抑制性病毒与细菌混合感染的防治提供了理论依据。3TPPPS对胚胎期间混合感染ALV-B和B. avium雏鸡的免疫调理作用近些年鸡胚混合感染免疫抑制性病毒和B. avium的现象逐年增加。由于药物残留和食品安全问题逐渐显现，新型安全的免疫增强剂，尤其是植物多糖的研究已逐渐成为养禽业发展中研究的热门话题。本研究选择300枚SPF鸡胚，分别设计了ALV-B和B. avium混合感染组，B. avium单独感染组，试验对照组。随机抽取混合感染后孵出的部分雏鸡注射TPPPS作为免疫调理对象，并与单独感染组进行比较和分析。研究结果显示混合感染组的各项检测指标均显著低于B. avium单独感染组。同时，B. avium的致病性增强，且病程延长。经TPPPS调理后，提高了出壳前混合感染B. avium与ALV-B的病弱雏的存活率和雏鸡质量，促进了机体的生长和免疫器官的发育，提高了病弱雏的存活率和对疾病的抵抗力。因此，考虑到在免疫机能和生产性能方面的积极作用，发现TPPPS能够作为免疫增强剂用于生产实践中。

【学位授予单位】：山东农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014

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